摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第1章 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 卵母细胞冷冻保存的研究进展 | 第13-15页 |
1.2 卵母细胞低温保存原理 | 第15页 |
1.3 造成卵母细胞在冷冻保存过程中受损的原因 | 第15-17页 |
1.4 冷冻方法 | 第17-21页 |
1.4.1 慢速冷冻法 | 第17-18页 |
1.4.2 玻璃化冷冻法 | 第18-21页 |
1.5 冷冻保护剂 | 第21-22页 |
1.5.1 渗透性冷冻保护剂 | 第21页 |
1.5.2 非渗透性冷冻保护剂 | 第21-22页 |
1.6 冷冻保存对卵母细胞的影响 | 第22-23页 |
1.7 影响卵母细胞冷冻效果的因素 | 第23-24页 |
1.8 未成熟卵母细胞的冷冻保存 | 第24-25页 |
1.9 卵母细胞冷冻保存中存在的问题与展望 | 第25-26页 |
第2章 牛未成熟卵母细胞液氮OPS玻璃化冷冻法的建立 | 第26-39页 |
2.1 试验材料 | 第27-30页 |
2.1.1 卵巢的来源和保存 | 第27页 |
2.1.2 冻精和液氮来源 | 第27页 |
2.1.3 主要设备 | 第27-28页 |
2.1.4 主要试剂和溶液配制 | 第28-30页 |
2.2 试验方法 | 第30-34页 |
2.2.1 卵丘-卵母细胞复合体( COCs )的采集 | 第30页 |
2.2.2 卵泡液的制备 | 第30-31页 |
2.2.3 体外成熟(IVM) | 第31页 |
2.2.4 体外受精(IVF) | 第31页 |
2.2.5 体外培养(IVC) | 第31-32页 |
2.2.6 细管法玻璃化冷冻和解冻 | 第32页 |
2.2.7 OPS法玻璃化冷冻和解冻 | 第32-34页 |
2.2.8 解冻后卵母细胞的形态鉴定 | 第34页 |
2.2.9 试验设计 | 第34页 |
2.2.10 数据分析 | 第34页 |
2.3 结果 | 第34-36页 |
2.3.1 不同加热方法拉制OPS管的结果 | 第34-35页 |
2.3.2 不同冷冻方法对牛GV期卵母细胞的影响 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
2.5 结论 | 第38-39页 |
第3章 牛未成熟卵母细胞液氦OPS玻璃化冷冻法的探索 | 第39-46页 |
3.1 材料 | 第40-41页 |
3.1.1 卵巢的来源和保存 | 第40页 |
3.1.2 冻精和液氮来源 | 第40页 |
3.1.3 主要设备 | 第40-41页 |
3.1.4 主要试剂和溶液配制 | 第41页 |
3.2 试验方法 | 第41-43页 |
3.2.1 卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集 | 第41页 |
3.2.2 液氮OPS法玻璃化冷冻和解冻 | 第41页 |
3.2.3 液氦OPS法玻璃化冷冻和解冻 | 第41-42页 |
3.2.4 解冻后卵母细胞的形态鉴定 | 第42页 |
3.2.5 体外成熟(IVM) | 第42页 |
3.2.6 体外受精(IVF) | 第42页 |
3.2.7 体外培养(IVC) | 第42页 |
3.2.8 试验设计 | 第42-43页 |
3.2.9 数据分析 | 第43页 |
3.3 试验结果 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
3.5 结论 | 第45-46页 |
第4章 液氦OPS玻璃化冷冻法的优化试验 | 第46-54页 |
4.1 试验材料 | 第46-47页 |
4.1.1 卵巢的来源和保存 | 第46-47页 |
4.1.2 冻精和液氮来源 | 第47页 |
4.1.3 主要设备 | 第47页 |
4.1.4 主要试剂和溶液配制 | 第47页 |
4.2 试验方法 | 第47-49页 |
4.2.1 卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集 | 第47页 |
4.2.2 液氦OPS法玻璃化冷冻和解冻 | 第47页 |
4.2.3 解冻后卵母细胞的形态鉴定 | 第47-48页 |
4.2.4 体外成熟(IVM) | 第48页 |
4.2.5 体外受精(IVF) | 第48页 |
4.2.6 体外培养(IVC) | 第48页 |
4.2.7 试验设计 | 第48-49页 |
4.2.8 数据分析 | 第49页 |
4.3 结果 | 第49-52页 |
4.3.1 液氦OPS玻璃化冷冻法最佳冷冻保护剂浓度的筛选 | 第49页 |
4.3.2 液氦玻璃化冷冻中两种操作温度的对比 | 第49-50页 |
4.3.3 液氦OPS玻璃化冷冻法最佳平衡时间的筛选 | 第50-52页 |
4.4 讨论 | 第52-53页 |
4.4.1 液氦OPS玻璃化冷冻法最佳冷冻保护剂浓度的筛选 | 第52页 |
4.4.2 液氦玻璃化冷冻中两种操作温度的对比 | 第52-53页 |
4.4.3 液氦OPS玻璃化冷冻法最佳预处理时间的筛选 | 第53页 |
4.5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
缩略语词汇表 | 第60-61页 |
附录 | 第61-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第65页 |