| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写词 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 PHOT1和PHOT2基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 模式植物拟南芥中向光素基因研究进展及功能分析 | 第11-14页 |
| 1.2 其它双子叶植物中向光素基因研究进展 | 第14页 |
| 1.3 转基因棉花现状和技术研究 | 第14-17页 |
| 1.3.1 转基因棉花现状 | 第14-15页 |
| 1.3.2 转基因棉花技术研究 | 第15-16页 |
| 1.3.3 病毒诱导的基因沉默技术 | 第16-17页 |
| 1.4 立题依据 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 常用实验溶液配制方法 | 第20-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.3.1 棉花Gh PHOT1和Gh PHOT2基因的筛选和克隆 | 第22-25页 |
| 2.3.2 棉花Gh PHOT1和Gh PHOT2载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.3.3 拟南芥和棉花的培育 | 第26-27页 |
| 2.3.4 棉花VIGS注射和拟南芥幼苗的侵染 | 第27-28页 |
| 2.3.5 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备及转化 | 第28-30页 |
| 2.3.6 普通PCR和RT-PCR鉴定转基因植株 | 第30页 |
| 2.3.7 花粉管注射 | 第30-31页 |
| 2.3.8 叶绿体避光运动 | 第31-32页 |
| 2.3.9 GFP荧光的观察方法 | 第32页 |
| 2.3.10 气孔开度分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| 3.1 棉花Gh PHOT1和Gh PHOT2基因的克隆和载体的构建 | 第33-37页 |
| 3.1.1 Gh PHOT1和Gh PHOT2基因的筛选 | 第33-35页 |
| 3.1.2 Gh PHOT1和Gh PHOT2基因超表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 3.2 拟南芥转基因苗的筛选和功能分析 | 第37-43页 |
| 3.2.1 转基因拟南芥植株的筛选鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 拟南芥phot1phot2-Gh PHOT2植株的表型分析和功能验证 | 第38-42页 |
| 3.2.3 在phot2-Gh PHOT2拟南芥植株中验证Gh PHOT2的功能 | 第42-43页 |
| 3.3 棉花VIGS植株的获得和鉴定 | 第43-46页 |
| 3.3.1 棉花VIGS载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.2 棉花VIGS幼苗注射 | 第44-45页 |
| 3.3.3 RT-PCR结果鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 棉花VIGS注射植株生理指标分析 | 第46-49页 |
| 3.4.1 气孔开度 | 第46-47页 |
| 3.4.2 花粉管注射植株 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 农杆菌侵染拟南芥验证Gh PHOT1和Gh PHOT2功能 | 第49-50页 |
| 4.2 VIGS注射棉花验证Gh PHOT1和Gh PHOT2基因的功能 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
