东乡野生稻耐冷qLOP2、qPSR2-1的克隆及功能研究
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 引言 | 第9页 |
| 2 水稻耐冷研究背景及东乡野生稻的发现 | 第9-10页 |
| 2.1 水稻耐冷研究背景 | 第9-10页 |
| 2.2 东乡野生稻的发现及相关研究 | 第10页 |
| 3 QTL定位研究 | 第10-12页 |
| 3.1 QTL定位及克隆基本原理 | 第10-12页 |
| 3.2 耐冷QTL定位 | 第12页 |
| 4 DREB转录因子家族 | 第12-17页 |
| 4.1 转录因子结构 | 第13-14页 |
| 4.2 转录因子家族分类 | 第14-15页 |
| 4.3 AP2/EREBP家族的结构特点 | 第15-16页 |
| 4.4 DREB类转录因子在植物抗逆方面的作用 | 第16-17页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 耐冷QTL的基因克隆及表达分析 | 第19-28页 |
| 1 前言 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-23页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-26页 |
| 3.1 东乡野生稻耐冷QTL的克隆 | 第23-25页 |
| 3.2 目的基因的序列及结构分析 | 第25-26页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR表达谱 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 农杆菌介导目的基因转化水稻 | 第28-38页 |
| 1 前言 | 第28页 |
| 2 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.2 质粒载体 | 第28-29页 |
| 2.3 菌株 | 第29页 |
| 2.4 培养基 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.1 含目的基因的农杆菌双T-DNA区载体构建 | 第30-31页 |
| 3.2 载体质粒DNA的提取 | 第31页 |
| 3.3 农杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 3.4 载体质粒转化农杆菌 | 第31页 |
| 3.5 农杆菌介导法转化水稻 | 第31-33页 |
| 3.6 转基因T_0代植株的PCR检测 | 第33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-37页 |
| 4.1 转基因双T-DNA区载体的构建 | 第33-34页 |
| 4.2 再生植株的获得 | 第34-35页 |
| 4.3 阳性植株的获得 | 第35-37页 |
| 5 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 转基因T_1代的生理功能分析 | 第38-46页 |
| 1 前言 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-41页 |
| 2.1 材料 | 第38页 |
| 2.2 转基因T_1代植株生理指标测定 | 第38-39页 |
| 2.3 转基因T_1代植株存活率测定 | 第39页 |
| 2.4 叶绿素含量的测定 | 第39页 |
| 2.5 叶绿素荧光的测定 | 第39-40页 |
| 2.6 相对含水量(RWC)的测定 | 第40页 |
| 2.7 脯氨酸(Pro)含量的测定 | 第40页 |
| 2.8 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.1 转基因T_1代植株耐冷表型和存活率 | 第41-42页 |
| 3.2 叶绿素含量的测定 | 第42页 |
| 3.3 叶绿素荧光的测定 | 第42-43页 |
| 3.4 相对含水量的测定 | 第43页 |
| 3.5 Pro含量的测定 | 第43页 |
| 3.6 MDA含量的测定 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
