| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 绪论 | 第13-35页 |
| 1 引言 | 第13-16页 |
| ·研究背景 | 第13-16页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第16页 |
| 2 国内外油菜油脂的研究进展 | 第16-34页 |
| ·油菜主要脂肪酸组分的种类 | 第17-20页 |
| ·植物脂肪酸和甘油三脂的代谢途径 | 第20-21页 |
| ·脂肪酸代谢过程中的酶 | 第21-34页 |
| ·乙酰-CoA羧化酶 | 第21-24页 |
| ·脂肪酸合成酶(FAS) | 第24-25页 |
| ·脂肪酸去饱和酶 | 第25-30页 |
| ·超长链脂肪酸延长酶 | 第30-32页 |
| ·三酰甘油组装酶系 | 第32-34页 |
| 3 研究目标和主要研究内容 | 第34页 |
| ·研究目标 | 第34页 |
| ·主要研究内容 | 第34页 |
| 4 本研究的技术路线 | 第34-35页 |
| 第一章 甘蓝型油菜A/C组Fad2基因的SNP分型与表达研究 | 第35-46页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·供试品种 | 第35-36页 |
| ·菌株 | 第36页 |
| ·载体与质粒 | 第36页 |
| ·分子生物学试剂 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-40页 |
| ·油菜总DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物回收 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的测序和比对 | 第38页 |
| ·等位基因特异PCR引物设计 | 第38页 |
| ·Fad2基因的表达 | 第38-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·同源性比对分析 | 第40-42页 |
| ·等位基因特异PCR引物设计及PCR检测 | 第42-43页 |
| ·Fad2基因的表达模式 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 第二章 甘蓝型油菜种子不同发育时期SSH文库的构建 | 第46-62页 |
| 1 材料与方法 | 第48-53页 |
| ·材料和试剂 | 第48页 |
| ·种子总RNA的分离与纯化 | 第48页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第48-49页 |
| ·第二链cDNA合成与纯化 | 第49页 |
| ·RsaI消化与纯化 | 第49-50页 |
| ·加接头 | 第50-51页 |
| ·杂交反应 | 第51页 |
| ·PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·SSH cDNA文库的构建 | 第52-53页 |
| ·序列测定和Blast分析 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·甘蓝型油菜种子总RNA质量检测 | 第53页 |
| ·第一链合成和LD-PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·抑制消减杂交 | 第54-55页 |
| ·差异表达cDNA文库的PCR产物检测 | 第55-56页 |
| ·EST测序分析 | 第56-60页 |
| ·开花后35天SSH文库EST序列的功能分析 | 第56页 |
| ·开花后20天SSH文库EST序列的功能分析 | 第56-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 第三章 甘蓝型汕菜BnaLCR78基因生物信息学分析及表达载体的构建 | 第62-76页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| ·材料和试剂 | 第62-63页 |
| ·电子克隆BnaLCR78全长基因 | 第63页 |
| ·BnaLCR78基因生物信息学的分析 | 第63页 |
| ·构建BnaLCR78基因的表达载体 | 第63-66页 |
| ·种子总RNA的分离与纯化 | 第63页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第63页 |
| ·BnaLCR78基因的克隆 | 第63页 |
| ·表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·工程菌转化 | 第64-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-73页 |
| ·BnaLCR78基因的电子克隆 | 第66页 |
| ·BnaLCR78蛋白的二级结构 | 第66-68页 |
| ·BnaLCR78的同源性分析 | 第68-70页 |
| ·BnaLCR78基因表达载体的构建 | 第70-73页 |
| ·引物设计 | 第70-71页 |
| ·BnaLCR78基因全长克隆 | 第71-72页 |
| ·BnaLCR78-pHB载体的构建 | 第72页 |
| ·BnaLCR78-B1载体的构建 | 第72-73页 |
| ·其他表达载体的构建 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| ·BnaLCR78基因与LCR家族的关系 | 第73-74页 |
| ·研究BnaLCR78基因的功能的方法 | 第74-76页 |
| 第四章 BnaLCR78基因的功能研究 | 第76-94页 |
| 1 材料与方法 | 第77-82页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·供试材料 | 第77页 |
| ·菌种 | 第77页 |
| ·质粒载体 | 第77页 |
| ·仪器设备 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77-78页 |
| ·方法 | 第78-82页 |
| ·拟南芥的转化 | 第78-79页 |
| ·突变体纯和子的筛选 | 第79-81页 |
| ·转基因拟南芥与突变体的表型观察 | 第81-82页 |
| ·转基因拟南芥与突变体脂肪酸含量的检测 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-92页 |
| ·卡拉霉素筛选拟南芥的浓度确定 | 第82-83页 |
| ·F78B1和N78B1转化拟南芥的筛选结果 | 第83-84页 |
| ·突变体纯和子的筛选 | 第84-85页 |
| ·突变体BnaLCR78与LCR23基因的表达 | 第85-86页 |
| ·扫描电镜观察结果 | 第86-87页 |
| ·授粉后花粉管染色观察结果 | 第87-89页 |
| ·拟南芥种子脂肪酸组分的测定 | 第89-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| 全文总结与创新点 | 第94-96页 |
| 1 总结 | 第94-95页 |
| 2 创新点 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简介 | 第111页 |
