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Septin11对肥大细胞活化的影响及机理研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略语索引第14-15页
第一章 绪论第15-43页
    第一节 过敏反应第15-28页
        1.1 过敏性疾病第15-22页
            1.1.1 常见过敏性疾病第15-18页
            1.1.2 常见过敏原第18-20页
            1.1.3 常见过敏性疾病的预防和治疗现状第20-22页
        1.2 肥大细胞第22-27页
            1.2.1 肥大细胞基本特点第22-25页
            1.2.2 肥大细胞参与Ⅰ型超敏反应第25-27页
        1.3 与过敏反应相关的信号通路第27-28页
            1.3.1 MAPK信号通路第27-28页
    第二节 Septin蛋白第28-35页
        2.1 Septin蛋白的分类与结构特点第28-30页
        2.2 Septin蛋白的生理功能第30-35页
            2.2.1 Septin调控酵母出芽过程第30-31页
            2.2.2 Septin调控微管蛋白网络第31页
            2.2.3 Septin在细菌感染中的作用第31-35页
        2.3 Septin11与本研究的关系第35页
    第三节 基因编辑技术第35-43页
        3.1 基因编辑技术概述第36页
        3.2 基因编辑技术的发展第36-37页
        3.3 基因编辑分子工具的分类第37-41页
            3.3.1 ZFN技术第37-38页
            3.3.2 TALEN技术第38-39页
            3.3.3 CRISPR/Cas系统第39-41页
        3.4 基因编辑在本研究中的应用第41-43页
第二章 P815-Septin11-KO质粒和稳定细胞系的构建第43-67页
    第一节 实验方法第43-56页
        1.1 细胞培养第43-46页
        1.2 质粒构建第46-48页
        1.3 细胞转染、筛选、挑单克隆第48-50页
            1.3.1 细胞转染第48-49页
            1.3.2 细胞筛选第49-50页
            1.3.3 挑单克隆第50页
        1.4 WB验证第50-53页
        1.5 基因验证第53-56页
    第二节 实验结果第56-64页
        2.1 Septin11在P815肥大细胞中表达丰度较高第56-57页
        2.2 P815-Septin11-KO质粒构建成功第57-58页
        2.3 P815-Septin11-KO稳定细胞系构建成功第58-64页
            2.3.1 WB检测P815-Septin11-KO稳定细胞系第58-61页
            2.3.2 基因组水平检测细胞P815-Septin11-KO稳定系第61-64页
    第三节 实验小结第64-67页
第三章 Septin11对肥大细胞活化的影响第67-87页
    第一节 实验方法第67-72页
        1.1 CCK8检测细胞增殖第67-68页
        1.2 细胞粘附实验第68-69页
        1.3 甲苯胺蓝染色第69-70页
        1.4 底物显色法检测β-氨基己糖苷酶第70页
        1.5 Q-PCR检测mRNA水平第70-71页
        1.6 ELISA检测白介素水平第71-72页
        1.7 激光共聚焦显微镜检测Ca~(2+)内流第72页
        1.8 Septin11对ERK信号通路的影响第72页
    第二节 实验结果第72-84页
        2.1 细胞增殖和细胞粘附实验第72-75页
            2.1.1 细胞增殖实验第73页
            2.1.2 细胞粘附实验第73-75页
        2.2 甲苯胺蓝染色第75-77页
        2.3 mRNA水平检测肥大细胞活化情况第77-79页
        2.4 蛋白水平检测肥大细胞活化情况第79-81页
        2.5 激光共聚焦显微镜检测Ca~(2+)流第81-82页
        2.6 Septin11对ERK信号通路的影响第82-84页
    第三节 实验小结第84-87页
第四章 总结与展望第87-89页
致谢第89-93页
参考文献第93-101页
附录A(攻读学位期间发表论文目录)第101-123页
附录B (实验材料)第123-129页
附录C (主要实验试剂配方)第129-130页

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