| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 肝再生的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 肝再生的分子机理 | 第14-15页 |
| 1.3 肝细胞与肝再生 | 第15-16页 |
| 1.4 CTGF的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.4.1 CTGF的起源 | 第16页 |
| 1.4.2 CTGF的结构功能 | 第16页 |
| 1.4.3 CTGF的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.4.4 CTGF与肝纤维化 | 第17-18页 |
| 1.4.5 CTGF调控肝再生的可能机制 | 第18-20页 |
| 1.4.6 CTGF功能相关的信号通路 | 第20-21页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第21页 |
| 1.6 研究方案 | 第21-25页 |
| 第二章 CTGF过表达对大鼠正常肝细胞BRL-3A生长的作用研究 | 第25-63页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.2.1 实验细胞和动物 | 第25-26页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2.3 主要耗材 | 第26-27页 |
| 2.2.4 试剂和配制 | 第27-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-44页 |
| 2.3.1 Rat Genome2302.0芯片数据检测和分析 | 第30-31页 |
| 2.3.2 大鼠肝再生模型制备和再生肝肝细胞的分离与鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 CTGF信号通路网络的构建 | 第31页 |
| 2.3.4 细胞的培养 | 第31-32页 |
| 2.3.5 CTGF慢病毒重组载体的构建及病毒包装 | 第32-37页 |
| 2.3.6 慢病毒包装和侵染BRL-3A细胞 | 第37-38页 |
| 2.3.7 MTT法检测CTGF表达上调对BRL-3A细胞活力的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.8 EdU法检测CTGF表达上调对细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.9 流式细胞术检测CTGF表达上调对细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.10 流式细胞术检测CTGF表达上调对细胞凋亡的影响 | 第41页 |
| 2.3.11 qRT-PCR检测CTGF上调后通路相关基因的表达变化 | 第41-43页 |
| 2.3.12 Western Blot检测CTGF通路相关蛋白表达变化 | 第43-44页 |
| 2.3.13 统计学分析 | 第44页 |
| 2.4 实验结果 | 第44-60页 |
| 2.4.1 CTGF在大鼠再生肝中的表达情况 | 第44页 |
| 2.4.2 CTGF信号网络 | 第44-45页 |
| 2.4.3 pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-CTGF重组载体鉴定 | 第45-49页 |
| 2.4.4 CTGF单克隆的筛选 | 第49-51页 |
| 2.4.5 CTGF过表达对BRL-3A细胞活力的影响 | 第51-52页 |
| 2.4.6 EdU法检测CTGF表达上调对BRL-3A细胞的影响 | 第52-54页 |
| 2.4.7 CTGF表达上调对BRL-3A细胞周期的影响 | 第54-56页 |
| 2.4.8 CTGF表达上调对BRL-3A凋亡的影响 | 第56-58页 |
| 2.4.9 CTGF表达上调对BRL-3A细胞中CTGF信号通路相关基因、蛋白表达的影响 | 第58-60页 |
| 2.5 讨论 | 第60-63页 |
| 第三章 CTGF下调表达对BRL-3A细胞生长的作用研究 | 第63-73页 |
| 3.1 引言 | 第63页 |
| 3.2 实验材料 | 第63-64页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第63-64页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第64页 |
| 3.2.3 主要耗材 | 第64页 |
| 3.2.4 试剂和配制 | 第64页 |
| 3.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第64页 |
| 3.3.2 干涉片段siRNA的设计与合成 | 第64-65页 |
| 3.3.3 细胞转染 | 第65页 |
| 3.3.4 MTT法检测CTGF表达下调对BRL-3A细胞活力的影响 | 第65页 |
| 3.3.5 EdU法检测CTGF表达下调对细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测CTGF表达下调对细胞周期的影响 | 第66页 |
| 3.3.7 流式细胞术检测CTGF表达下调对细胞凋亡的影响 | 第66页 |
| 3.3.8 qRT-PCR和Western Blot检测CTGF下调后通路相关基因表达变化 | 第66页 |
| 3.3.9 统计学分析 | 第66页 |
| 3.4 结果 | 第66-71页 |
| 3.4.1 CTGF-siRNA的最佳干涉片段的筛选 | 第66-67页 |
| 3.4.2 CTGF表达下调对BRL-3A细胞活力的影响 | 第67页 |
| 3.4.3 CTGF表达下调对BRL-3A细胞增殖的影响 | 第67-68页 |
| 3.4.4 CTGF表达下调对BRL-3A细胞周期的影响 | 第68-70页 |
| 3.4.5 CTGF表达下调对BRL-3A细胞凋亡的影响 | 第70-71页 |
| 3.4.6 CTGF表达下调对BRL-3A细胞中CTGF信号通路相关基因/蛋白表达的影响 | 第71页 |
| 3.5 讨论 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
