摘要 | 第2-3页 |
Summary | 第3页 |
英文略缩词表 | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-17页 |
1.1 猪带绦虫简介 | 第7-11页 |
1.1.1 猪带绦虫的防控研究进程 | 第8页 |
1.1.2 猪带绦虫病疫苗的研究现状 | 第8-10页 |
1.1.3 猪带绦虫病的诊断研究现状 | 第10-11页 |
1.2 缺氧诱导因子-1(HIF-1)的研究进展 | 第11-16页 |
1.2.1 缺氧诱导因子-1 在糖酵解中的作用 | 第11-12页 |
1.2.2 缺氧诱导因子-1 在感染和免疫中的作用 | 第12-13页 |
1.2.3 HIF-1 与肿瘤的关系 | 第13-16页 |
1.3 研究的目的及意义 | 第16-17页 |
第二章 猪带绦虫缺氧诱导因子-1(HIF-1)基因的克隆及序列分析 | 第17-22页 |
2.1 主要材料和试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 虫体、载体和菌株 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂及酶 | 第17页 |
2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-20页 |
2.2.1 猪带绦虫成虫总RNA的提取 | 第18-19页 |
2.2.2 引物的设计与合成 | 第19页 |
2.2.3 HIF-1 基因的扩增 | 第19页 |
2.2.4 HIF-1 基因的的测序鉴定 | 第19-20页 |
2.2.5 HIF-1 基因的生物信息学分析 | 第20页 |
2.3 结果 | 第20-21页 |
2.3.1 HIF-1 基因的扩增 | 第20页 |
2.3.2 HIF-1 基因的序列分析 | 第20-21页 |
2.4 讨论 | 第21-22页 |
第三章 猪带绦虫HIF-1 基因的原核表达 | 第22-35页 |
3.1 主要材料和试剂 | 第22-23页 |
3.1.1 载体、菌株和实验动物 | 第22页 |
3.1.2 主要试剂与酶 | 第22页 |
3.1.3 溶液 | 第22-23页 |
3.1.4 主要仪器 | 第23页 |
3.2 实验方法 | 第23-27页 |
3.2.1 重组表达载体的构建与鉴定 | 第23-24页 |
3.2.2 重组蛋白的诱导表达 | 第24-25页 |
3.2.3 重组蛋白表达条件的优化 | 第25页 |
3.2.4 重组蛋白的可溶性分析 | 第25页 |
3.2.5 重组蛋白的Western-blot分析 | 第25-26页 |
3.2.6 HIF-1 蛋白的纯化及免疫原的制备 | 第26页 |
3.2.7 实验动物的免疫 | 第26-27页 |
3.2.8 间接ELISA检测实验兔子血清的抗体滴度 | 第27页 |
3.3 实验结果 | 第27-34页 |
3.3.1 重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
3.3.2 重组蛋白的诱导表达 | 第28-29页 |
3.3.3 重组蛋白表达条件的优化 | 第29-30页 |
3.3.4 重组蛋白的可溶性分析 | 第30-31页 |
3.3.5 重组蛋白的Western-blot分析 | 第31-32页 |
3.3.6 ELISA结果 | 第32-33页 |
3.3.7 HIF-1 蛋白多克隆抗体的Western-blot分析 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-35页 |
第四章 猪带绦虫HIF-1 基因的真核表达 | 第35-39页 |
4.1 材料与试剂 | 第35页 |
4.1.1 主要材料和试剂 | 第35页 |
4.1.2 主要溶液 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-37页 |
4.2.1 真核表达质粒的构建 | 第35-36页 |
4.2.2 质粒转染 | 第36页 |
4.2.3 蛋白免疫印迹 | 第36-37页 |
4.3 实验结果 | 第37-38页 |
4.3.1 真核表达质粒构建 | 第37-38页 |
4.3.2 WB结果 | 第38页 |
4.4 讨论 | 第38-39页 |
全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46-47页 |
导师简介 | 第47-48页 |