| 致谢 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 骨髓间充质干细胞的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1 BMSCs的发现和分布 | 第12页 |
| 1.2 BMSCs的生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.3 BMSCs的分离方法 | 第13页 |
| 1.4 BMSCs定向分化的机制 | 第13-14页 |
| 1.5 BMSCs的应用前景 | 第14-15页 |
| 2 BMSCs向胰岛细胞分化的研究进展 | 第15-18页 |
| 2.1 BMSCs向胰岛细胞定向诱导分化方法的研究 | 第15-17页 |
| 2.1.1 诱导剂法 | 第15-16页 |
| 2.1.2 转录因子调控法 | 第16-17页 |
| 2.1.3 共培养法 | 第17页 |
| 2.2 BMSCs胰岛样分化在临床上的应用 | 第17-18页 |
| 试验一 不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞生物活性的影响 | 第18-27页 |
| 引言 | 第18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-21页 |
| 1.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 1.1.3 主要仪器与器材 | 第18-19页 |
| 1.2 试剂的配制 | 第19-20页 |
| 1.2.1 PBS缓冲液配制 | 第19页 |
| 1.2.2 0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液 | 第19页 |
| 1.2.3 双抗配制 | 第19页 |
| 1.2.4 FBS的冻融 | 第19页 |
| 1.2.5 DMEM/F-12完全培养基 | 第19页 |
| 1.2.6 台盼蓝染色液 | 第19-20页 |
| 1.3 试验方法 | 第20-21页 |
| 1.3.1 BMSCs的提取 | 第20页 |
| 1.3.2 全骨髓贴壁法 | 第20页 |
| 1.3.3 红细胞裂解法 | 第20页 |
| 1.3.4 兔BMSCs细胞活性检测 | 第20页 |
| 1.3.5 兔BMSCs生长曲线的绘制 | 第20-21页 |
| 1.3.6 首次换液时间对兔BMSCs的影响 | 第21页 |
| 1.3.7 细胞免疫组化鉴定兔BMSCs | 第21页 |
| 1.3.8 统计学处理 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.1 不同分离方法对兔BMSCs形态和生长的影响 | 第21-23页 |
| 2.2 兔BMSCs生长曲线绘制 | 第23-24页 |
| 2.3 兔BMSCs的鉴定 | 第24页 |
| 2.4 首次换液时间对兔BMSCs培养周期的影响 | 第24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 4 小结 | 第26-27页 |
| 试验二 兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛细胞的动态变化的研究 | 第27-39页 |
| 引言 | 第27页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| 1.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 试验对象 | 第27页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 1.1.3 主要仪器与器械 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂配制 | 第28-29页 |
| 1.2.1 生长因子（bFGF，EGF，activin-A，HGF）配制为 1μg/mL | 第28页 |
| 1.2.2 配制 1mol/L HEPES | 第28页 |
| 1.2.3 不同浓度（0.23mol/L，0.175mol/L，0.111 mol/L）葡萄糖的配制 | 第28-29页 |
| 1.2.4 第一阶段的诱导剂 | 第29页 |
| 1.2.5 第二阶段的诱导剂 | 第29页 |
| 1.2.6 第三阶段的诱导剂 | 第29页 |
| 1.2.7 双硫腙染色剂 | 第29页 |
| 1.2.8 0.2％TritonX-100 | 第29页 |
| 1.2.9 DAB显色液 | 第29页 |
| 2 试验方法 | 第29-33页 |
| 2.1 体外定向诱导分化 | 第29-30页 |
| 2.2 双硫腙染色 | 第30页 |
| 2.3 RT-PCR检测胰岛细胞特异性基因的表达 | 第30-32页 |
| 2.3.1 细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 反转录合成c DNA | 第31页 |
| 2.3.3 PCR反应 | 第31-32页 |
| 2.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 2.4 免疫组织化学染色 | 第32页 |
| 2.5 ELISA检测 | 第32-33页 |
| 2.6 数据处理 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 3.1 诱导分化过程中细胞的形态学变化 | 第33-34页 |
| 3.2 DTZ染色鉴定结果 | 第34页 |
| 3.3 RT-PCR检测胰岛细胞特异性基因表达 | 第34-35页 |
| 3.4 免疫细胞化学检测结果 | 第35-36页 |
| 3.5 ELISA检测结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-49页 |
| 英文缩写词表 | 第49-50页 |
| ABSTACT | 第50-51页 |
