摘要 | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第8-15页 |
1.1 真核生物转录因子概述 | 第8-9页 |
1.2 GLUT2、GLUT5和SGLT1糖类转运蛋白概述 | 第9-10页 |
1.3 GATA2转录因子概述 | 第10-11页 |
1.4 鸡小肠上皮细胞原代培养概述 | 第11-12页 |
1.4.1 鸡小肠上皮细胞结构和功能概述 | 第11-12页 |
1.4.2 细胞鉴定方法 | 第12页 |
1.5 荧光定量PCR概述 | 第12-13页 |
1.5.1 荧光定量PCR工作原理 | 第12-13页 |
1.5.2 荧光定量的分类 | 第13页 |
1.6 本研究的目的、意义和技术路线 | 第13-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-30页 |
2.1 试验材料 | 第15-17页 |
2.1.1 试验动物 | 第15页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第15页 |
2.1.3 主要药品、试剂及酶 | 第15-16页 |
2.1.4 常用溶液及试剂的配制 | 第16-17页 |
2.2 试验方法 | 第17-30页 |
2.2.1 生物信息软件预测GATA2转录因子 | 第17页 |
2.2.2 重组外源基因的构建 | 第17-23页 |
2.2.3 鸡小肠上皮细胞培养及外源基因转染 | 第23-28页 |
2.2.4 绝对荧光定量检测 | 第28-30页 |
第三章 试验结果 | 第30-46页 |
3.1生物信息筛查结果 | 第30-32页 |
3.1.1 理化信息分析结果 | 第30页 |
3.1.2 磷酸化位点预测结果 | 第30-31页 |
3.1.3 转录因子结合位点预测结果 | 第31-32页 |
3.2 重组外源基因的鉴定结果 | 第32-33页 |
3.2.1 GATA2基因的扩增 | 第32页 |
3.2.2 外源重组质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
3.3 重组质粒在鸡小肠上皮细胞中的表达 | 第33-37页 |
3.3.1 细胞形态学观察 | 第33-34页 |
3.3.2 细胞免疫组化鉴定结果 | 第34-35页 |
3.3.3 细胞转染形态学观察 | 第35页 |
3.3.4 细胞总RNA提取结果 | 第35-37页 |
3.4 GATA2、GLUT2、GLUT5和SGLT1的表达量 | 第37-46页 |
3.4.1 GATA2基因绝对定量 | 第37-38页 |
3.4.2 GLUT2基因绝对定量 | 第38-40页 |
3.4.3 GLUT5基因绝对定量 | 第40-42页 |
3.4.4 SGLT1基因绝对定量 | 第42-44页 |
3.4.5 鸡小肠上皮细胞GATA2、GLUT2、GLUT5和SGLT1基因表达量 | 第44-46页 |
第四章 讨论 | 第46-50页 |
4.1 转录因子GATA2生物信息筛查结果讨论 | 第46页 |
4.2 GATA2对糖转运蛋白功能基因的调控机制 | 第46-47页 |
4.3 试验影响因素 | 第47-48页 |
4.3.1 影响重组外源基因构建的因素 | 第47页 |
4.3.2 影响鸡小肠上皮培养的因素 | 第47-48页 |
4.4 全文结果讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
Abstract | 第55页 |
附录 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |