摘要 | 第8-9页 |
文献综述 | 第9-17页 |
1 线粒体途径细胞凋亡的研究进展 | 第9-14页 |
1.1 线粒体的功能 | 第10-11页 |
1.2 线粒体凋亡的调控机制 | 第11-12页 |
1.3 线粒体内各种促凋亡因子的生理功能 | 第12-13页 |
1.4 Bcl-2蛋白家族对线粒体凋亡途径的调控作用 | 第13-14页 |
2 猪肺炎支原体与细胞凋亡的关系 | 第14-17页 |
2.1 支原体的黏附作用 | 第14-15页 |
2.2 支原体对宿主细胞的损伤机制 | 第15页 |
2.3 宿主细胞的信号通路 | 第15-16页 |
2.4 Mhp可引起呼吸道上皮细胞凋亡,但机制尚不清楚 | 第16-17页 |
前言 | 第17-18页 |
试验一 Mhp 168强、弱毒感染猪气管上皮细胞模型的建立 | 第18-23页 |
1 材料 | 第18-19页 |
1.1 支原体,细胞与培养基 | 第18页 |
1.2 试剂 | 第18页 |
1.3 仪器 | 第18页 |
1.4 主要溶液及配制 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-20页 |
2.1 Mhp菌液培养 | 第19页 |
2.2 PTEC细胞培养 | 第19页 |
2.3 Mhp感染细胞 | 第19页 |
2.4 感染时间的筛选 | 第19-20页 |
2.5 统计分析 | 第20页 |
3 结果与分析 | 第20-22页 |
3.1 不同感染时间的细胞凋亡统计 | 第20-22页 |
4 小结 | 第22-23页 |
试验二 Mhp对PTEC细胞凋亡典型特征的检测 | 第23-29页 |
1 材料 | 第23-24页 |
1.1 支原体,细胞与培养基 | 第23页 |
1.2 PTEC细胞培养 | 第23页 |
1.3 Mhp感染细胞 | 第23页 |
1.4 试剂 | 第23页 |
1.5 仪器 | 第23-24页 |
1.6 主要溶液及配制 | 第24页 |
2 方法 | 第24-25页 |
2.1 DAPI检测 | 第24页 |
2.2 TUNEL检测 | 第24-25页 |
2.3 Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测 | 第25页 |
3 结果与分析 | 第25-27页 |
3.1 Mhp 168感染对细胞核形态的影响 | 第25-26页 |
3.2 TUNEL检测细胞基因组DNA的断裂 | 第26-27页 |
3.3 Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率 | 第27页 |
4 小结 | 第27-29页 |
试验三 猪肺炎支原体引起细胞凋亡通路的研究 | 第29-39页 |
1 材料 | 第29-30页 |
1.1 支原体,细胞与培养基 | 第29页 |
1.2 试剂 | 第29页 |
1.3 仪器 | 第29页 |
1.4 主要溶液及配制 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-33页 |
2.1 Mhp菌液培养 | 第30页 |
2.2 PTEC细胞培养 | 第30页 |
2.3 Mhp感染细胞 | 第30页 |
2.4 Caspase-3活性的检测 | 第30-31页 |
2.5 Caspase-8活性的检测 | 第31-32页 |
2.6 Caspase-12活性的检测 | 第32-33页 |
2.7 胞浆Cyt C的检测 | 第33页 |
2.8 线粒体膜电位的检测 | 第33页 |
2.9 统计分析 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-37页 |
3.1 Caspase-3活性 | 第33-34页 |
3.2 Caspase-8活性 | 第34-35页 |
3.3 Caspase-12活性 | 第35-36页 |
3.4 Cyt C的免疫荧光检测 | 第36页 |
3.5 线粒体膜电位检测 | 第36-37页 |
4 小结 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-42页 |
1 猪肺炎支原体强、弱毒株可以诱导PTEC细胞发生凋亡 | 第39-40页 |
2 Mhp 168L和Mhp 168通过线粒体通路诱导PTEC细胞发生凋亡 | 第40-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
Abstract | 第48页 |
致谢 | 第50页 |