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副结核分枝杆菌分离及小鼠感染模型的建立

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
缩略词表第9-10页
第一章 引言第10-15页
    1.1 副结核分枝杆菌与副结核病简介第10-11页
        1.1.1 副结核分枝杆菌第10页
        1.1.2 副结核病症状及危害第10-11页
    1.2 副结核病检测诊断方法第11-13页
        1.2.1 细菌学检测第11-12页
        1.2.2 血清学检测第12页
        1.2.3 细胞免疫介导试验第12-13页
        1.2.4 其他检测方法第13页
    1.3 本研究目的和意义第13-15页
第二章 牛副结核病流行病学调查第15-22页
    2.1 引言第15页
    2.2 材料第15-16页
        2.2.1 主要试剂及耗材第15-16页
        2.2.2 主要仪器、设备第16页
    2.3 方法第16-19页
        2.3.1 皮肤延迟变态反应试验(SDTH)第16-17页
        2.3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)第17-18页
        2.3.3 PCR方法检测第18-19页
    2.4 结果第19-20页
        2.4.1 SDTH阳性率第19页
        2.4.2 ELISA抗体阳性率第19-20页
        2.4.3 PCR方法检测结果第20页
    2.5 讨论第20-22页
第三章 副结核分枝杆菌的分离及鉴定第22-39页
    3.1 引言第22页
    3.2 材料第22-23页
        3.2.1 主要试剂及耗材第22-23页
        3.2.2 主要仪器、设备第23页
    3.3 方法第23-32页
        3.3.1 副结核培养基制备第23-24页
        3.3.2 副结核分枝杆菌分离第24-25页
        3.3.3 抗酸染色与病理切片制作第25-27页
        3.3.4 副结核分枝杆菌基因组提取第27页
        3.3.5 副结核分枝杆菌PCR鉴定及分型第27-29页
        3.3.6 副结核补体结合实验(CFT)第29-32页
        3.3.7 人工感染副结核阳性血清与自然感染血清效价ELISA比较第32页
    3.4 结果第32-37页
        3.4.1 分离得到副结核分枝杆菌第32-33页
        3.4.2 抗酸染色与病理切片第33-35页
        3.4.3 IS900特异性片段PCR验证第35页
        3.4.4 IS1311特异性片段验证及分型第35-37页
        3.4.5 补体结合试验第37页
        3.4.6 人工感染血清与自然感染血清ELISA抗体效价比较第37页
    3.5 讨论第37-39页
第四章 副结核分枝杆菌小鼠感染模型建立第39-50页
    4.1 引言第39页
    4.2 实验材料第39-40页
        4.2.1 实验动物及菌株第39-40页
        4.2.2 主要试剂、耗材第40页
        4.2.3 主要仪器、设备第40页
    4.3 方法第40-47页
        4.3.1 菌种复苏及培养第40页
        4.3.2 细菌量及活性的测定第40-41页
        4.3.3 动物感染第41页
        4.3.4 感染小鼠剖检第41-42页
        4.3.5 感染小鼠外周血RNA提取第42-43页
        4.3.6 感染小鼠血清收集第43页
        4.3.7 副结核分枝杆菌抗体ELISA检测板制备第43页
        4.3.8 感染血清抗体ELISA测定第43-44页
        4.3.9 cDNA文库构建第44页
        4.3.10 引物设计第44-45页
        4.3.11 引物特异性检测第45-46页
        4.3.12 qRT-PCR检测细胞因子第46-47页
    4.4 结果第47-48页
        4.4.1 血清中抗体ELISA检测第47页
        4.4.2 小鼠外周血中不同细胞因子转录水平差异第47-48页
    4.5 讨论第48-50页
第五章 结论第50-51页
    5.1 实验结论第50页
    5.2 创新点第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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