摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-15页 |
1.1 副结核分枝杆菌与副结核病简介 | 第10-11页 |
1.1.1 副结核分枝杆菌 | 第10页 |
1.1.2 副结核病症状及危害 | 第10-11页 |
1.2 副结核病检测诊断方法 | 第11-13页 |
1.2.1 细菌学检测 | 第11-12页 |
1.2.2 血清学检测 | 第12页 |
1.2.3 细胞免疫介导试验 | 第12-13页 |
1.2.4 其他检测方法 | 第13页 |
1.3 本研究目的和意义 | 第13-15页 |
第二章 牛副结核病流行病学调查 | 第15-22页 |
2.1 引言 | 第15页 |
2.2 材料 | 第15-16页 |
2.2.1 主要试剂及耗材 | 第15-16页 |
2.2.2 主要仪器、设备 | 第16页 |
2.3 方法 | 第16-19页 |
2.3.1 皮肤延迟变态反应试验(SDTH) | 第16-17页 |
2.3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第17-18页 |
2.3.3 PCR方法检测 | 第18-19页 |
2.4 结果 | 第19-20页 |
2.4.1 SDTH阳性率 | 第19页 |
2.4.2 ELISA抗体阳性率 | 第19-20页 |
2.4.3 PCR方法检测结果 | 第20页 |
2.5 讨论 | 第20-22页 |
第三章 副结核分枝杆菌的分离及鉴定 | 第22-39页 |
3.1 引言 | 第22页 |
3.2 材料 | 第22-23页 |
3.2.1 主要试剂及耗材 | 第22-23页 |
3.2.2 主要仪器、设备 | 第23页 |
3.3 方法 | 第23-32页 |
3.3.1 副结核培养基制备 | 第23-24页 |
3.3.2 副结核分枝杆菌分离 | 第24-25页 |
3.3.3 抗酸染色与病理切片制作 | 第25-27页 |
3.3.4 副结核分枝杆菌基因组提取 | 第27页 |
3.3.5 副结核分枝杆菌PCR鉴定及分型 | 第27-29页 |
3.3.6 副结核补体结合实验(CFT) | 第29-32页 |
3.3.7 人工感染副结核阳性血清与自然感染血清效价ELISA比较 | 第32页 |
3.4 结果 | 第32-37页 |
3.4.1 分离得到副结核分枝杆菌 | 第32-33页 |
3.4.2 抗酸染色与病理切片 | 第33-35页 |
3.4.3 IS900特异性片段PCR验证 | 第35页 |
3.4.4 IS1311特异性片段验证及分型 | 第35-37页 |
3.4.5 补体结合试验 | 第37页 |
3.4.6 人工感染血清与自然感染血清ELISA抗体效价比较 | 第37页 |
3.5 讨论 | 第37-39页 |
第四章 副结核分枝杆菌小鼠感染模型建立 | 第39-50页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 实验材料 | 第39-40页 |
4.2.1 实验动物及菌株 | 第39-40页 |
4.2.2 主要试剂、耗材 | 第40页 |
4.2.3 主要仪器、设备 | 第40页 |
4.3 方法 | 第40-47页 |
4.3.1 菌种复苏及培养 | 第40页 |
4.3.2 细菌量及活性的测定 | 第40-41页 |
4.3.3 动物感染 | 第41页 |
4.3.4 感染小鼠剖检 | 第41-42页 |
4.3.5 感染小鼠外周血RNA提取 | 第42-43页 |
4.3.6 感染小鼠血清收集 | 第43页 |
4.3.7 副结核分枝杆菌抗体ELISA检测板制备 | 第43页 |
4.3.8 感染血清抗体ELISA测定 | 第43-44页 |
4.3.9 cDNA文库构建 | 第44页 |
4.3.10 引物设计 | 第44-45页 |
4.3.11 引物特异性检测 | 第45-46页 |
4.3.12 qRT-PCR检测细胞因子 | 第46-47页 |
4.4 结果 | 第47-48页 |
4.4.1 血清中抗体ELISA检测 | 第47页 |
4.4.2 小鼠外周血中不同细胞因子转录水平差异 | 第47-48页 |
4.5 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
5.1 实验结论 | 第50页 |
5.2 创新点 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |