摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 毛囊生长发育过程中相关信号通路的研究 | 第15-27页 |
1.毛囊的结构与功能 | 第15-16页 |
2 毛囊的发育 | 第16-18页 |
3.毛囊形态发生相关的信号通路 | 第18-24页 |
4.Dlx3基因的功能及研究进展 | 第24-27页 |
第二章 研究论文 Dlx3在阿尔巴斯绒山羊毛乳头细胞增殖中的调控作用 | 第27-58页 |
1 引言 | 第27-29页 |
1.1 阿尔巴斯绒山羊初级毛乳头细胞和次级毛乳头细胞的培养与鉴定 | 第27-28页 |
1.2 Dlx3基因过表达载体和干扰载体的构建及转染 | 第28-29页 |
1.3 Dlx3基因在初级和次级毛乳头增殖和凋亡检测 | 第29页 |
2 材料和方法 | 第29-41页 |
2.1 材料 | 第29-31页 |
2.1.1 主要设备及耗材 | 第29-30页 |
2.1.2 实验材料 | 第30页 |
2.1.3 实验试剂 | 第30-31页 |
2.2 方法 | 第31-41页 |
2.2.1 目的基因Dlx3的同源性比较 | 第31-34页 |
2.2.2 过表达载体的构建 | 第34-36页 |
2.2.3 干扰载体的构建 | 第36页 |
2.2.4 毛乳头细胞的培养 | 第36-37页 |
2.2.5 细胞免疫荧光检测 | 第37页 |
2.2.6 过表达载体和干扰载体的电转及筛选 | 第37-38页 |
2.2.7 毛乳头细胞总RNA的提取和q-PCR | 第38-39页 |
2.2.8 细胞总蛋白提取 | 第39页 |
2.2.9 WesternBlot | 第39-40页 |
2.2.10 CCK8细胞增殖与活性检测 | 第40页 |
2.2.11 细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-53页 |
3.1 阿尔巴斯绒山羊初级毛乳头和次级毛乳头细胞培养与鉴定 | 第41-42页 |
3.1.1 阿尔巴斯绒山羊初级毛乳头和次级毛乳头细胞的体外培养 | 第41-42页 |
3.1.2 初级毛乳头和次级毛乳头细胞的免疫荧光鉴定 | 第42页 |
3.2 Dlx3基因过表达载体和干扰载体的构建 | 第42-48页 |
3.2.1 Dlx3基因同源性比较 | 第42-44页 |
3.2.2 Dlx3基因片段 | 第44-45页 |
3.2.3 构建Dlx3基因过表达载体 | 第45-46页 |
3.2.4 构建Dlx3基因的干扰载体 | 第46-48页 |
3.3 Dlx3过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第48-53页 |
3.3.1 Dlx3基因过表达载体和干扰载体对初级、次级毛乳头细胞的转染 | 第48-49页 |
3.3.2 Dlx3基因及相关基因的mRNA的检测 | 第49-50页 |
3.3.3 Dlx3、Hoxc13、TP63、GAPDH、Lef1基因的蛋白质检测 | 第50-51页 |
3.3.4 Dlx3对初级毛乳头细胞增殖的影响 | 第51页 |
3.3.5 Dlx3基因对细胞凋亡的影响 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
4.1 阿尔巴斯绒山羊初级和次级毛乳头细胞的培养和鉴定 | 第53页 |
4.2 Dlx3基因过表达载体和干扰载体的构建与转染 | 第53-54页 |
4.3 Dlx3基因对初级和次级毛乳头细胞增殖的检测 | 第54-55页 |
4.4 细胞凋亡检测 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |