摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
外文缩写词表 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1 伪狂犬病病毒研究进展 | 第10-15页 |
1.1 病原学特征及基因结构 | 第10-11页 |
1.2 侵入机制及流行现状 | 第11-13页 |
1.3 诊断与防控 | 第13-15页 |
1.3.1 基因缺失苗 | 第13页 |
1.3.2 亚单位疫苗 | 第13页 |
1.3.3 DNA疫苗 | 第13-14页 |
1.3.4 活载体疫苗 | 第14页 |
1.3.5 伪狂犬病毒病的诊断与病原检测 | 第14-15页 |
2 几种猫科野生动物保护现状与常见传染病研究现状 | 第15-17页 |
2.1 朝鲜豹(Leopard orientalis) | 第15页 |
2.2 美洲虎(Jaguar) | 第15-16页 |
2.3 美洲狮(Cougar) | 第16页 |
2.4 豹猫(Felis bengalensis) | 第16页 |
2.5 猫科动物几种常见传染病 | 第16-17页 |
3 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 圈养野生动物源伪狂犬病病毒分离与鉴定 | 第18-31页 |
1 材料与方法 | 第18-24页 |
1.1 材料 | 第18-19页 |
1.1.1 样品采集 | 第18-19页 |
1.1.2 试剂 | 第19页 |
1.1.3 主要的仪器及耗材 | 第19页 |
1.1.4 引物 | 第19页 |
1.1.5 实验动物 | 第19页 |
1.1.6 细胞 | 第19页 |
1.2 方法 | 第19-24页 |
1.2.1 溶液配制 | 第19-20页 |
1.2.2 病料的处理 | 第20-21页 |
1.2.3 核酸提取 | 第21页 |
1.2.4 核酸扩增 | 第21-22页 |
1.2.5 基因酶切 | 第22页 |
1.2.6 家兔感染试验 | 第22页 |
1.2.7 病毒的分离 | 第22页 |
1.2.8 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株的电镜观察 | 第22页 |
1.2.9 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株毒力的测定 | 第22-23页 |
1.2.10 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株红细胞凝集性的检测 | 第23页 |
1.2.11 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株的理化特性鉴定 | 第23-24页 |
2 结果 | 第24-29页 |
2.1 核酸的检测 | 第24-26页 |
2.2 SPF兔感染试验 | 第26页 |
2.3 病毒分离 | 第26-27页 |
2.4 伪狂犬病毒的鉴定 | 第27页 |
2.5 伪狂犬病毒 BJ/Tiger/2012 株毒力的测定 | 第27-28页 |
2.6 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株红细胞的凝集特性 | 第28-29页 |
2.7 伪狂犬病毒BJ/Tiger/2012株分离株对紫外和温度的敏感特性 | 第29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 BJ/Tiger/2012伪狂犬病毒分离株部分基因组扩增及序列分析 | 第31-39页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 材料 | 第31-32页 |
1.1.1 病毒 | 第31页 |
1.1.2 引物 | 第31-32页 |
1.1.3 菌株与载体、试剂 | 第32页 |
1.2 方法 | 第32-34页 |
1.2.1 DNA的提取 | 第32页 |
1.2.2 基因组DNA的扩增 | 第32-33页 |
1.2.3 连接转化 | 第33页 |
1.2.4 质粒提取 | 第33-34页 |
1.2.5 BJ/Tiger/2012株的序列分析 | 第34页 |
2 结果 | 第34-37页 |
2.1 目的基因PCR扩增 | 第34页 |
2.2 测序与分析 | 第34-35页 |
2.3 BJ/Tiger/2012gG全基因的分析 | 第35页 |
2.4 BJ/Tiger/2012 gE全基因的序列分析 | 第35-36页 |
2.5 BJ/Tiger/2012 gD部分基因的序列分析 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
第四章 BJ/Tiger/2012病毒动物回归试验 | 第39-47页 |
1 材料与方法 | 第39-42页 |
1.1 材料 | 第39-40页 |
1.1.1 实验动物 | 第39页 |
1.1.2 感染用毒 | 第39页 |
1.1.3 主要仪器与试剂 | 第39-40页 |
1.1.4 溶液配制 | 第40页 |
1.2 方法 | 第40-42页 |
1.2.1 感染途径与感染剂量 | 第40页 |
1.2.2 临床观察及剖检病理变化 | 第40页 |
1.2.3 病料的处理 | 第40页 |
1.2.4 病毒核酸提取 | 第40-41页 |
1.2.5 PCR的鉴定 | 第41页 |
1.2.6 常规石蜡切片制备 | 第41-42页 |
1.2.7 HE染色 | 第42页 |
1.2.8 免疫组化染色 | 第42页 |
2 实验结果 | 第42-45页 |
2.1 BJ /Tiger/2012回归猫试验 | 第42-43页 |
2.1.1 临床观察及病理剖检结果 | 第42页 |
2.1.2 PCR扩增结果 | 第42-43页 |
2.1.3 HE检测及免疫组化结果 | 第43页 |
2.2 BJ /Tiger/2012回归犬试验研究 | 第43-45页 |
2.2.1 临床观察及病理剖检结果 | 第43-44页 |
2.2.2 PCR扩增结果 | 第44-45页 |
2.2.3 HE检测及免疫组化结果 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第五章伪狂犬病毒检测及野毒株抗体调查 | 第47-55页 |
1 材料与方法 | 第47-52页 |
1.1 材料 | 第47-49页 |
1.1.1 样品 | 第47-48页 |
1.1.1.1 组织样品来源 | 第47页 |
1.1.1.2 血清样品来源 | 第47-48页 |
1.1.2 试剂 | 第48-49页 |
1.1.3 主要的仪器及耗材 | 第49页 |
1.1.4 引物 | 第49页 |
1.2 方法 | 第49-52页 |
1.2.1 病料的处理 | 第49-50页 |
1.2.2 病毒核酸提取 | 第50页 |
1.2.3 核酸扩增 | 第50-51页 |
1.2.4 血清样品制备 | 第51页 |
1.2.5 ELISA伪狂犬病病毒(gE)抗体检测 | 第51-52页 |
2 结果 | 第52-53页 |
2.1 组织样品检测结果 | 第52-53页 |
2.2 血清样品gE抗体检测结果 | 第53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-72页 |
附录1 伪狂犬病毒gB基因鉴定引物对死亡圈养动物组织检测结果电泳图谱 | 第62-64页 |
附录2 伪狂犬病毒分离株BJ/Tiger/2012的部分基因序列 | 第64-67页 |
附录3 圈养野生动物血清样品采集表 | 第67-70页 |
附录4 血清样品gE抗体ELISA检测结果 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73-75页 |
导师简介 | 第75-76页 |