| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略词表 | 第16-18页 |
| 第一章 Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞线粒体依赖性凋亡 | 第18-37页 |
| 1.1 材料 | 第20-23页 |
| 1.1.1 细胞系培养 | 第20页 |
| 1.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第20-21页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第22-23页 |
| 1.2 方法 | 第23-29页 |
| 1.2.1 肝细胞培养 | 第23页 |
| 1.2.2 肝细胞生存率的测定 | 第23页 |
| 1.2.3 细胞内蛋白含量的测定 | 第23-24页 |
| 1.2.4 肝细胞线粒体膜电位的测定 | 第24-25页 |
| 1.2.5 肝细胞ATP含量的测定 | 第25页 |
| 1.2.6 肝细胞蛋白表达水平的测定 | 第25-28页 |
| 1.2.7 肝细胞caspase-3活性的测定 | 第28-29页 |
| 1.2.8 肝细胞凋亡率的测定 | 第29页 |
| 1.2.9 统计学分析 | 第29页 |
| 1.3 结果 | 第29-33页 |
| 1.3.1 Cr(Ⅵ)导致肝细胞生存率下降 | 第29-30页 |
| 1.3.2 Cr(Ⅵ)诱导肝细胞线粒体膜电位降低 | 第30-31页 |
| 1.3.3 Cr(Ⅵ)减少肝细胞线粒体VDAC1蛋白表达 | 第31页 |
| 1.3.4 Cr(Ⅵ)抑制肝细胞线粒体ATP合成 | 第31-32页 |
| 1.3.5 Cr(Ⅵ)诱导肝细胞p53蛋白表达水平增加 | 第32页 |
| 1.3.6 Cr(Ⅵ)促使肝细胞caspase-3活性增加 | 第32-33页 |
| 1.3.7 Cr(Ⅵ)诱导肝细胞凋亡率增加 | 第33页 |
| 1.4 讨论 | 第33-37页 |
| 第二章 线粒体MPT抑制剂CsA对Cr(Ⅵ)诱导线粒体依赖性肝细胞凋亡的影响 | 第37-55页 |
| 2.1 材料 | 第38-41页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第38页 |
| 2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第38-39页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.4 主要溶液配方 | 第40-41页 |
| 2.2 方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 肝细胞培养和染毒处理 | 第41页 |
| 2.2.2 线粒体提取 | 第41页 |
| 2.2.3 线粒体超微结构观察 | 第41-42页 |
| 2.2.4 线粒体呼吸功能的测定 | 第42-43页 |
| 2.2.5 线粒体氧化磷酸化效能的测定 | 第43页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第43-44页 |
| 2.3 结果 | 第44-51页 |
| 2.3.1 提取的线粒体结构完整,功能良好 | 第44-45页 |
| 2.3.2 CsA抑制肝细胞生存率的下降 | 第45页 |
| 2.3.3 CsA保护肝细胞线粒体膜功能 | 第45-47页 |
| 2.3.4 CsA有利于肝细胞线粒体功能的维持 | 第47-49页 |
| 2.3.5 CsA抑制Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡 | 第49-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-55页 |
| 第三章 ROS清除剂NAC对Cr(Ⅵ)诱导线粒体依赖性肝细胞凋亡的作用 | 第55-80页 |
| 3.1 材料 | 第57-59页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第57页 |
| 3.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第57-58页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第58页 |
| 3.1.4 主要溶液配方 | 第58-59页 |
| 3.2 方法 | 第59-65页 |
| 3.2.1 肝细胞培养 | 第59页 |
| 3.2.2 肝细胞超氧阴离子自由基含量的测定 | 第59页 |
| 3.2.3 肝细胞ROS含量的测定 | 第59-60页 |
| 3.2.4 肝细胞内钙离子含量的测定 | 第60-61页 |
| 3.2.5 肝细胞膜上CRAC通道活性的测定 | 第61-65页 |
| 3.2.6 统计学分析 | 第65页 |
| 3.3 结果 | 第65-76页 |
| 3.3.1 NAC拮抗Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞生存率的降低 | 第65页 |
| 3.3.2 NAC抑制Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞氧化损伤 | 第65-67页 |
| 3.3.3 NAC拮抗肝细胞内钙超载 | 第67-68页 |
| 3.3.4 NAC保护肝细胞膜CRAC通道功能 | 第68-70页 |
| 3.3.5 NAC保护肝细胞线粒体膜功能 | 第70-71页 |
| 3.3.6 NAC减轻肝细胞线粒体呼吸功能的损伤 | 第71-74页 |
| 3.3.7 NAC抑制Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡 | 第74-76页 |
| 3.4 讨论 | 第76-80页 |
| 第四章 自噬诱导剂Rap对Cr(Ⅵ)诱导的线粒体依赖性肝细胞凋亡的作用 | 第80-105页 |
| 4.1 材料 | 第82-86页 |
| 4.1.1 细胞系 | 第82页 |
| 4.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第82-83页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第83-84页 |
| 4.1.4 PCR引物 | 第84页 |
| 4.1.5 主要溶液配方 | 第84-86页 |
| 4.2 方法 | 第86-90页 |
| 4.2.1 肝细胞培养 | 第86页 |
| 4.2.2 自噬体的观察 | 第86页 |
| 4.2.3 肝细胞蛋白表达水平的测定 | 第86-87页 |
| 4.2.4 自噬相关基因mRNA表达水平的测定 | 第87-89页 |
| 4.2.5 统计学分析 | 第89-90页 |
| 4.3 结果 | 第90-101页 |
| 4.3.1 调节自噬活性对肝细胞生存率的影响 | 第90-91页 |
| 4.3.2 Cr(Ⅵ)诱导肝细胞自噬体形成 | 第91-92页 |
| 4.3.3 Cr(Ⅵ)对肝细胞自噬通路蛋白表达水平的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.4 Cr(Ⅵ)诱导肝细胞自噬基因表达水平增加 | 第93-96页 |
| 4.3.5 调节自噬活性对肝细胞线粒体功能的影响 | 第96-98页 |
| 4.3.6 调节自噬活性对肝细胞能量代谢的影响 | 第98-99页 |
| 4.3.7 调节自噬活性对肝细胞凋亡的影响 | 第99-101页 |
| 4.4 讨论 | 第101-105页 |
| 综合分析 | 第105-108页 |
| 研究结论 | 第108页 |
| 创新点 | 第108页 |
| 进一步研究的内容 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-118页 |
| 综述 | 第118-129页 |
| 参考文献 | 第124-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第130页 |
