| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 构建小麦转基因技术体系的必要性 | 第11页 |
| 2 小麦转基因技术研究进展 | 第11-15页 |
| 2.1 基因枪法 | 第13页 |
| 2.2 农杆菌转化法 | 第13-14页 |
| 2.3 花粉管通道法 | 第14-15页 |
| 3 基因枪法影响小麦转化效率的因素 | 第15-16页 |
| 3.1 基因型及外植体的生理状态 | 第15页 |
| 3.2 转化参数 | 第15-16页 |
| 3.3 高渗处理方式 | 第16页 |
| 4 农杆菌介导法影响小麦转化效率的因素 | 第16-18页 |
| 4.1 外植体类型 | 第17页 |
| 4.2 农杆菌菌株类型 | 第17页 |
| 4.3 侵染和共培养条件 | 第17-18页 |
| 5 GUS报告基因在遗传转化瞬时表达系统中的应用 | 第18-19页 |
| 6 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 基因枪介导小麦幼胚转化效率的优化 | 第20-34页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1 受体材料 | 第20页 |
| 1.2 菌种与质粒 | 第20-21页 |
| 1.3 试剂 | 第21页 |
| 1.4 培养基 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.1 材料准备 | 第21页 |
| 2.2 质粒提取 | 第21页 |
| 2.3 基因枪轰击 | 第21-22页 |
| 2.3.1 微弹制备 | 第21-22页 |
| 2.3.2 轰击转化 | 第22页 |
| 2.4 影响因素的参数设置 | 第22-24页 |
| 2.4.1 小麦幼胚采集时期 | 第22页 |
| 2.4.2 轰击前高渗处理时间 | 第22页 |
| 2.4.3 后高渗处理时间 | 第22页 |
| 2.4.4 高渗培养基中2,4-D浓度 | 第22页 |
| 2.4.5 高渗培养基中不同渗透剂及其浓度 | 第22-23页 |
| 2.4.6 诱导培养基中2,4-D浓度 | 第23-24页 |
| 2.5 GUS检测 | 第24页 |
| 2.6 统计学分析 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-31页 |
| 3.1 小麦幼胚采集时期对GUS瞬时表达的影响 | 第24-25页 |
| 3.2 轰击前高渗处理时间对GUS瞬时表达的影响 | 第25-26页 |
| 3.3 轰击后高渗处理时间对GUS瞬时表达的影响 | 第26-28页 |
| 3.4 高渗培养基中2,4-D浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第28-29页 |
| 3.5 高渗培养基中不同渗透剂对GUS瞬时表达的影响 | 第29-30页 |
| 3.6 诱导培养基2,4-D浓度对GUS瞬时表达率的影响 | 第30-31页 |
| 4 讨论和小结 | 第31-34页 |
| 第三章 农杆菌介导小麦幼胚遗传转化条件优化 | 第34-49页 |
| 1 实验材料 | 第34页 |
| 1.1 受体材料 | 第34页 |
| 1.2 菌种与转化基因 | 第34页 |
| 1.3 培养基 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.1 材料准备 | 第34-35页 |
| 2.1.1 接种菌准备 | 第34页 |
| 2.1.2 幼胚准备 | 第34-35页 |
| 2.2 农杆菌转化 | 第35页 |
| 2.2.1 幼胚预处理和共培养 | 第35页 |
| 2.2.2 胚轴切除 | 第35页 |
| 2.3 参数设置 | 第35-37页 |
| 2.3.1 共培养培养基 | 第35-36页 |
| 2.3.2 G1共培养基时的小麦幼胚采集时期 | 第36页 |
| 2.3.3 G1共培养基条件下的农杆菌培养浓度 | 第36页 |
| 2.3.4 G1共培养基条件下的侵染时间 | 第36页 |
| 2.3.5 G2共培养基条件下的农杆菌培养浓度 | 第36页 |
| 2.3.6 G2共培养基条件下的侵染时间 | 第36页 |
| 2.3.7 G2共培养基条件下的共培养天数 | 第36-37页 |
| 2.4 GUS活性检测和统计学分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-46页 |
| 3.1 不同共培养培养基对GUS瞬时表达率的影响 | 第38-39页 |
| 3.2 G1共培养基条件下小麦幼胚采集时期对GUS瞬时表达率的影响 | 第39-40页 |
| 3.3 G1共培养基条件下农杆菌培养浓度对GUS瞬时表达率的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 G1共培养基条件下的侵染时间对GUS瞬时表达率的影响 | 第41-42页 |
| 3.5 G2共培养基条件下农杆菌培养浓度对GUS瞬时表达率的影响 | 第42-44页 |
| 3.6 G2共培养基条件下的侵染时间对GUS瞬时表达率的影响 | 第44-45页 |
| 3.7 G2共培养基条件下共培养天数对GUS瞬时表达率的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论和小结 | 第46-49页 |
| 第四章 小麦成熟胚再生效率探索 | 第49-57页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 1.1 小麦材料 | 第49页 |
| 1.2 培养基 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-51页 |
| 2.1 预处理方法 | 第49-50页 |
| 2.2 两种诱导培养基处理 | 第50页 |
| 2.3 两种分化培养基处理 | 第50页 |
| 2.4 再生植株的生根培养 | 第50页 |
| 2.5 统计分析 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-55页 |
| 3.1 两种成熟胚预处理方法的比较 | 第51页 |
| 3.2 两种诱导培养基对不同品种成熟胚诱导状态的比较 | 第51-53页 |
| 3.3 两种分化培养基对不同品种成熟胚再生能力的比较 | 第53-55页 |
| 4 讨论和小结 | 第55-57页 |
| 第五章 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 硕士期间发表的文章或专利 | 第68-69页 |
