| 中文摘要 | 第10-16页 |
| 英文摘要 | 第16-23页 |
| 第一部分 整合素β5在肝细胞癌中的表达及其与临床特征相关性研究 | 第24-40页 |
| （一）前言 | 第24-25页 |
| （二）材料和方法 | 第25-31页 |
| 1.实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1 组织微列阵芯片及临床资料 | 第25页 |
| 1.2 实验细胞 | 第25页 |
| 1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
| 1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第27页 |
| 2.实验方法 | 第27-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.2 免疫组织化学 | 第28-29页 |
| 2.3 细胞免疫荧光 | 第29页 |
| 2.4 Western blot检测 | 第29-31页 |
| 2.5 统计学分析 | 第31页 |
| （三）结果 | 第31-35页 |
| 1.整合素 β5 在肝癌组织中高表达 | 第31-32页 |
| 2.肝细胞癌组织中整合素 β5 高表达与临床特征相关 | 第32-34页 |
| 3.整合素 β5 在不同肝癌细胞系中的表达情况 | 第34页 |
| 4.整合素 β5 在不同肝癌细胞系中的表达及亚细胞定位 | 第34-35页 |
| （四）讨论 | 第35-36页 |
| （五）结论 | 第36-37页 |
| （六）参考文献 | 第37-40页 |
| 第二部分 整合素 β5 通过FAK磷酸化促进玻连蛋白介导肝癌细胞黏附的研究 | 第40-55页 |
| （一）前言 | 第40-41页 |
| （二）材料和方法 | 第41-47页 |
| 1.实验材料 | 第41-42页 |
| 1.1 实验细胞 | 第41页 |
| 1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 1.3 实验仪器 | 第42页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第42页 |
| 2.实验方法 | 第42-47页 |
| 2.1 细胞培养 | 第42-43页 |
| 2.2 病毒的包装和细胞的感染 | 第43-44页 |
| 2.3 细胞黏附实验 | 第44页 |
| 2.4 药物对细胞的预处理 | 第44-45页 |
| 2.5 Western blot检测 | 第45-46页 |
| 2.6 统计学分析 | 第46-47页 |
| （三）结果 | 第47-51页 |
| 1.整合素 β5 稳定转染细胞系的构建 | 第47-48页 |
| 2.整合素 β5 促进玻连蛋白介导肝癌细胞的黏附 | 第48页 |
| 3.整合素 β5 通过FAK磷酸化促进玻连蛋白介导的黏附 | 第48-49页 |
| 4.整合素 β5 通过FAK依赖方式调节玻连蛋白介导的黏附 | 第49-51页 |
| （四）讨论 | 第51-52页 |
| （五）结论 | 第52-53页 |
| （六）参考文献 | 第53-55页 |
| 第三部分 整合素 β5 调控 β-catenin通路促进肝癌细胞增殖、迁移的机制研究 | 第55-91页 |
| （一）前言 | 第55-56页 |
| （二）材料和方法 | 第56-69页 |
| 1.实验材料 | 第56-58页 |
| 1.1 组织微列阵芯片 | 第56页 |
| 1.2 实验动物 | 第56页 |
| 1.3 实验细胞 | 第56页 |
| 1.4 实验试剂 | 第56-57页 |
| 1.5 实验仪器 | 第57-58页 |
| 1.6 主要溶液配制 | 第58页 |
| 2.实验方法 | 第58-69页 |
| 2.1 细胞培养 | 第58-59页 |
| 2.2 脂质体转染 | 第59页 |
| 2.3 Transwell迁移实验 | 第59-60页 |
| 2.4 克隆形成 | 第60页 |
| 2.5 蛋白稳定性实验 | 第60页 |
| 2.6 裸鼠皮下移植瘤模型的建立 | 第60-61页 |
| 2.7 苏木素-伊红染色(HE染色) | 第61页 |
| 2.8 免疫组织化学 | 第61-62页 |
| 2.9 qRT-PCR实验 | 第62-64页 |
| 2.10 荧光素酶报告实验 | 第64-65页 |
| 2.11 TOP-flash /FOP-flash荧光素酶活性检测 | 第65页 |
| 2.12 ITGB5结合蛋白的质谱分析 | 第65-66页 |
| 2.13 免疫共沉淀 | 第66-67页 |
| 2.14 体内泛素化实验 | 第67页 |
| 2.15 Western blot检测 | 第67-69页 |
| 2.16 统计学分析 | 第69页 |
| （三）结果 | 第69-86页 |
| 1.整合素 β5 促进肝癌细胞的增殖 | 第69-70页 |
| 2.整合素 β5 促进肝癌细胞的迁移 | 第70-71页 |
| 3.体内实验证实整合素 β5 促进肝癌生长 | 第71-72页 |
| 4.β-catenin与整合素 β5 的相互作用 | 第72-73页 |
| 5.整合素 β5 在转录后水平调控 β-catenin的表达 | 第73-74页 |
| 6.整合素 β5 能够影响 β-catenin稳定性 | 第74-75页 |
| 7.整合素 β5 是通过 β-catenin的泛素化来调节其稳定性 | 第75-76页 |
| 8.整合素 β5 促进 β-catenin/TCL/LEF的转录活性 | 第76-77页 |
| 9.整合素 β5 对 β-catenin下游靶基因的水平 | 第77-78页 |
| 10.整合素β5通过 β-catenin 依赖方式调控肝癌细胞的增殖、迁移及成瘤能力 | 第78-79页 |
| 11.miR-185 负性调控整合素 β5 的表达 | 第79-81页 |
| 12.miR-185 与整合素 β5 的 3′UTR区域的靶向结合 | 第81-82页 |
| 13.miR-185 负性调控 β-catenin的表达 | 第82-83页 |
| 14.miR-185 通过整合素 β5 依赖方式调控 β-catenin表达 | 第83-84页 |
| 15.miR-185 通过整合素 β5/β-catenin调节肝癌细胞增殖 | 第84-85页 |
| 16.miR-185 通过整合素 β5/β-catenin调节肝癌细胞迁移 | 第85页 |
| 17.肝癌组织中miR-185/β-catenin与整合素 β5 相关性分析 | 第85-86页 |
| （四）讨论 | 第86-88页 |
| （五）结论 | 第88-89页 |
| （六）参考文献 | 第89-91页 |
| 综述 | 第91-102页 |
| 参考文献 | 第97-102页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
