致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
目录 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 水稻细菌性褐条病概况 | 第11-13页 |
1.1.1 水稻细菌性褐条病的发生与危害 | 第11页 |
1.1.2 水稻细菌性褐条病病原菌 | 第11-12页 |
1.1.3 水稻细菌性褐条病病害症状 | 第12页 |
1.1.4 水稻细菌性褐条病的发病条件及侵染循环 | 第12-13页 |
1.2 病原细菌的分泌系统 | 第13-15页 |
1.2.1 Ⅰ型分泌系统 | 第13-14页 |
1.2.2 Ⅱ型分泌系统 | 第14页 |
1.2.3 Ⅲ型分泌系统 | 第14-15页 |
1.2.4 Ⅳ型分泌系统 | 第15页 |
1.2.5 Ⅴ型分泌系统 | 第15页 |
1.3 新型的分泌系统—Ⅵ型分泌系统 | 第15-18页 |
1.3.1 Ⅵ型分泌系统与革兰氏阴性病原菌致病性的关系 | 第16页 |
1.3.2 Ⅵ型分泌系统的作用机制 | 第16-18页 |
1.4 胞外多糖 | 第18-19页 |
1.5 本论文研究的目的和意义 | 第19-21页 |
2 水稻细菌性褐条病菌Ⅵ型基因ClpB和ImpM突变体构建 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第21-22页 |
2.1.2 主要试剂(盒)、酶及配制 | 第22页 |
2.1.3 主要设备 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-30页 |
2.2.1 实验准备 | 第23页 |
2.2.2 引物设计 | 第23-24页 |
2.2.3 ClpB和ImpM基因目的片段扩增 | 第24-25页 |
2.2.4 自杀质粒pJP5603质粒 | 第25页 |
2.2.5 双酶切 | 第25页 |
2.2.6 基因重组自杀质粒的构建及鉴定 | 第25页 |
2.2.7 大肠杆菌感受态的制备及热击 | 第25-26页 |
2.2.8 重组质粒基因突变菌株的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
2.2.9 电击感受态的制备与电击 | 第27-28页 |
2.2.10 基因突变菌株的筛选与鉴定 | 第28-29页 |
2.2.11 突变体菌株和野生型菌株致病性的测定 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
2.3.1 ClpB和ImpM基因目的片段克隆 | 第30页 |
2.3.2 ClpB和ImpM基因重组自杀质粒的构建及鉴定 | 第30-31页 |
2.3.3 ClpB和ImpM基因突变菌株的筛选与鉴定 | 第31-33页 |
2.3.4 △ClpB和△ImpM和野生型菌株致病性的测定 | 第33-35页 |
2.4 讨论 | 第35-36页 |
3 △ClpB和△ImpM胞外多糖的实验研究 | 第36-46页 |
3.1 实验材料 | 第36页 |
3.1.1 实验菌株 | 第36页 |
3.1.2 主要试剂 | 第36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-39页 |
3.2.1 阳离子交换树脂的前处理 | 第36-37页 |
3.2.2 EPS提取 | 第37页 |
3.2.3 EPS含量测定及对水稻种子生长的影响 | 第37-38页 |
3.2.4 EPS提取前后细胞透射电镜观察 | 第38页 |
3.2.5 EPS红外检测 | 第38-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
3.3.1 胞外多糖含量 | 第39-40页 |
3.3.2 红外检测 | 第40-41页 |
3.3.3 透射电镜 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-46页 |
4 水稻细菌性褐条病菌在氧胁迫条件下的蛋白表达差异 | 第46-61页 |
4.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.1 供试菌株 | 第46页 |
4.1.2 培养基 | 第46页 |
4.1.3 供试菌株的活化与培养 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-50页 |
4.2.1 病菌RS-1不同氧胁迫条件的处理 | 第46-47页 |
4.2.2 全蛋白提取方法 | 第47页 |
4.2.3 SDS-PAGE | 第47-48页 |
4.2.4 染色 | 第48-49页 |
4.2.5 割胶、胶内酶解 | 第49-50页 |
4.2.6 LC-MS/MS质谱鉴定 | 第50页 |
4.2.7 蛋白分析 | 第50页 |
4.3 结果与分析 | 第50-56页 |
4.3.1 不同百草枯浓度下野生型菌株的生长曲线 | 第50-51页 |
4.3.2 氧胁迫条件下蛋白的表达情况 | 第51-56页 |
4.4 讨论 | 第56-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
作者简历 | 第68-69页 |