摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-21页 |
1.1 红藻糖苷的研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 红藻糖苷结构与分布特征 | 第12-13页 |
1.1.2 红藻糖苷的代谢 | 第13-14页 |
1.1.3 红藻糖苷的生物学功能 | 第14页 |
1.1.4 红藻糖苷产量的影响因素 | 第14-15页 |
1.1.5 红藻糖苷的主要研究方法 | 第15页 |
1.2 液质联用技术在代谢组学研究中的应用 | 第15-18页 |
1.2.1 核磁共振技术(NMR)与液质联用技术(LC-MS)的比较 | 第15-16页 |
1.2.2 液质联用技术(LC-MS)的类型、特点以及应用 | 第16-18页 |
1.2.3 展望 | 第18页 |
1.3 高温胁迫对紫菜的影响及其相关抗逆基因的研究进展 | 第18-21页 |
1.3.1 高温胁迫对紫菜的影响 | 第18-19页 |
1.3.2 紫菜抗逆相关基因的研究 | 第19-21页 |
2 高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS)法检测红藻中的红藻糖苷和异红藻糖苷的含量 | 第21-32页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 红藻糖苷标准品和七种红藻的采集 | 第22页 |
2.1.2 七种红藻的采集 | 第22页 |
2.1.3 试剂和药品 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 红藻糖苷和异红藻糖苷的纯化 | 第23页 |
2.2.2 NMR 检测 | 第23页 |
2.2.3 红藻糖苷检测条件的优化 | 第23-24页 |
2.2.4 最低检测限和最低定量限的确定 | 第24页 |
2.2.5 红藻糖苷标准曲线的制作 | 第24页 |
2.2.6 稳定性检测(日间稳定性,日内稳定性) | 第24页 |
2.2.7 回收率和离子抑制效应的测定与计算 | 第24-25页 |
2.2.8 红藻样品的制备 | 第25页 |
2.2.9 数据分析处理 | 第25页 |
2.3 实验结果 | 第25-30页 |
2.3.1 色谱质谱条件优化结果 | 第25-27页 |
2.3.2 最低检测限和最低定量限 | 第27页 |
2.3.3 红藻糖苷标准曲线 | 第27-28页 |
2.3.4 稳定性检测(日间精密度,日内精密度)结果 | 第28-29页 |
2.3.5 回收率和离子抑制效应 | 第29页 |
2.3.6 七种红藻中红藻糖苷和异红藻糖苷含量 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-31页 |
2.4.1 方法验证 | 第30页 |
2.4.2 潮间带红藻中的红藻糖苷和异红藻糖苷的分析 | 第30-31页 |
本章小结 | 第31-32页 |
3 高温胁迫下坛紫菜中红藻糖苷含量变化 | 第32-43页 |
3.1 实验材料 | 第32-33页 |
3.1.1 实验材料和试剂 | 第32页 |
3.1.2 仪器设备 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-34页 |
3.2.1 材料预处理 | 第33页 |
3.2.2 热激处理 | 第33-34页 |
3.2.3 红藻糖苷的提取 | 第34页 |
3.2.4 LC-MS 法测定红藻糖苷的含量 | 第34页 |
3.2.5 数据分析 | 第34页 |
3.3 实验结果 | 第34-39页 |
3.3.1 不同采集地点坛紫菜中红藻糖苷和异红藻糖苷的含量差异 | 第34-35页 |
3.3.2 不同生长阶段坛紫菜中红藻糖苷和异红藻糖苷含量的变化 | 第35-36页 |
3.3.3 高温胁迫下Ⅱ组坛紫菜中红藻糖苷以及异红藻糖苷含量变化 | 第36-37页 |
3.3.4 高温胁迫下不同生长阶段坛紫菜中红藻糖苷含量的变化 | 第37-38页 |
3.3.5 高温胁迫对 Me-05(Ⅱ组)和申福 1 号(Ⅴ组)两种品系坛紫菜中红藻糖苷含量的影响 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-42页 |
本章小结 | 第42-43页 |
4 高温胁迫下坛紫菜抗逆相关基因的差异表达 | 第43-52页 |
4.1 实验材料 | 第43-44页 |
4.1.1 实验样品 | 第43页 |
4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
4.1.3 培养基 | 第43-44页 |
4.1.4 仪器设备 | 第44页 |
4.2 实验方法 | 第44-46页 |
4.2.1 紫菜的处理 | 第44页 |
4.2.2 Trizol 提取法提取组织总 RNA | 第44页 |
4.2.3 总 RNA 质量的检测 | 第44-45页 |
4.2.4 cDNA 的合成 | 第45页 |
4.2.5 实时荧光定量 PCR 引物的设计 | 第45页 |
4.2.6 Real-Time PCR 实验反应体系及条件 | 第45-46页 |
4.2.7 统计分析 | 第46页 |
4.3 实验结果 | 第46-49页 |
4.3.1 总 RNA 的质量检测 | 第46-47页 |
4.3.2 高温胁迫下坛紫菜中 Phnho1 和 Phgpdh 基因的差异表达 | 第47-48页 |
4.3.3 高温胁迫下紫菜中 hsp70、Mn-sod、rboh 基因的差异表达 | 第48-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
4.4.1 Phnho1 和 Phgpdh 基因 | 第49-50页 |
4.4.2 抗逆相关基因 hsp70、Mn-sod 和 rboh | 第50-51页 |
本章小结 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
在学研究成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |