摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第9-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
实验技术路线 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
1 材料与方法 | 第15-28页 |
1.1 实验材料 | 第15-19页 |
1.1.1 肺癌细胞株 | 第15页 |
1.1.2 小干扰RNA | 第15页 |
1.1.3 主要实验抗体 | 第15-16页 |
1.1.4 主要实验仪器 | 第16页 |
1.1.5 主要实验试剂 | 第16-17页 |
1.1.6 主要实验试剂盒 | 第17页 |
1.1.7 实验常用工作液配制 | 第17-19页 |
1.2 实验方法 | 第19-27页 |
1.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
1.2.2 细胞转染 | 第20-21页 |
1.2.3 PI3K/AKT特异性抑制剂的添加 | 第21页 |
1.2.4 细胞总蛋白提取 | 第21页 |
1.2.5 BCA法测定蛋白浓度 | 第21-22页 |
1.2.6 Western blot | 第22-23页 |
1.2.7 Real time PCR | 第23-26页 |
1.2.8 MTT | 第26-27页 |
1.2.9 Transwell体外迁移实验 | 第27页 |
1.2.10 Transwell体外侵袭实验 | 第27页 |
1.3 统计学处理 | 第27-28页 |
2 结果 | 第28-38页 |
2.1 检测肺癌细胞株中ADAM23的表达 | 第28页 |
2.2 瞬时转染siRNA后ADAM23的表达 | 第28-30页 |
2.2.1 瞬时转染效率 | 第28-29页 |
2.2.2 验证瞬时转染效率后ADAM23 mRNA表达 | 第29页 |
2.2.3 检测瞬时转染ADAM23-siRNA-3后ADAM23蛋白表达 | 第29-30页 |
2.3 瞬时转染ADAM23-siRNA后EMT及相关分子的表达 | 第30-31页 |
2.3.1 ADAM23对SK-MES-1细胞E-cadherin、vimentin、α-SMA、TWIST的影响 | 第30页 |
2.3.2 ADAM23对SK-MES-1细胞中整合素αV的影响 | 第30-31页 |
2.4 ADAM23对SK-MES-1细胞增殖能力的影响 | 第31页 |
2.5 ADAM23对SK-MES-1细胞迁移能力的影响 | 第31-33页 |
2.6 ADAM23对SK-MES-1细胞侵袭能力的影响 | 第33-34页 |
2.7 检测ADAM23对SK-MES-1细胞AKT、pAKT的影响 | 第34页 |
2.8 LY294002对ADAM23-siRNA细胞AKT、pAKT的影响 | 第34-35页 |
2.9 LY294002对ADAM23-siRNA细胞EMT及相关分子的影响 | 第35-36页 |
2.9.1 LY294002对ADAM23-siRNA细胞α-SMA、E-cadherin、vimentin、TWIST的影响 | 第35页 |
2.9.2 LY294002对ADAM23-siRNA细胞整合素α_v的影响 | 第35-36页 |
2.10 LY294002对ADAM23-siRNA细胞迁移能力的影响 | 第36-37页 |
2.11 LY294002对ADAM23-siRNA细胞侵袭能力的影响 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-42页 |
3.1 ADAM23表达下调后增强肺鳞癌SK-MES-1细胞的增殖、浸润、转移能力 | 第38-39页 |
3.2 ADAM23表达下调后对SK-MES-1细胞整合素α_v的影响 | 第39页 |
3.3 ADAM23表达下调与AKT、pAKT的关系 | 第39-40页 |
3.4 LY294002对ADAM23-siRNA细胞整合素α_v的表达及细胞浸润迁移能力的影响 | 第40-42页 |
4 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
综述 | 第49-58页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58页 |