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小盐芥HKT1基因家族的结构和表达研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第9-20页
    1.1 植物盐胁迫及其应答第9页
    1.2 植物耐盐生理生化机制的研究第9-11页
        1.2.1 离子的稳态第9-10页
        1.2.2 渗透压的稳态第10页
        1.2.3 氧化清除第10-11页
    1.3 小盐芥的耐盐分子机制的研究第11-13页
        1.3.1 小盐芥耐盐相关基因的研究第11-12页
        1.3.2 小盐芥基因表达的研究第12页
        1.3.3 小盐芥全基因组测序的完成第12-13页
    1.4 植物 HKT 家族基因的研究第13-17页
        1.4.1 HKT 基因的克隆和功能的鉴定第13页
        1.4.2 HKT 家族基因的模式表达第13-14页
        1.4.3 拟南芥 HKT1 基因的研究进展第14-17页
    1.5 基因表达调控与非生物胁迫第17-18页
        1.5.1 CRT(C-repeat)/DRE 元件第17-18页
        1.5.2 G-rich 元件第18页
        1.5.3 GT-1 元件第18页
        1.5.4 ABREs 元件第18页
    1.6 小盐芥 HKT1s 基因的研究意义第18-20页
2 实验材料与方法第20-31页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌种及载体第20页
        2.1.3 实验试剂和药品第20-21页
        2.1.4 常用培养基和溶液的配制第21-22页
        2.1.5 仪器与设备第22页
        2.1.6 分析软件第22页
    2.2 实验方法第22-31页
        2.2.1 大肠杆菌 XL1-blue 感受态细胞的制备和转化第22-23页
        2.2.2 质粒 DNA 的提取第23-24页
        2.2.3 农杆菌 GV3101 感受态的制备及转化第24页
        2.2.4 菌种的保存第24页
        2.2.5 小盐芥和拟南芥植株的培养第24页
        2.2.6 基因的克隆第24-26页
        2.2.7 植物表达载体的转化及筛选第26-27页
        2.2.8 小盐芥 TsHKT1s 基因启动子的元件分析及 GUS 表达分析第27页
        2.2.9 RT-PCR第27-29页
        2.2.10 Northern blot第29-31页
3 实验结果与分析第31-50页
    3.1 小盐芥 HKT1s 基因的分子特征分析第31-36页
        3.1.1 小盐芥 TsHKT1s 与 AtHKT1 的氨基酸序列比对分析第31-32页
        3.1.2 小盐芥 HKT1s 基因组序列的分析第32-33页
        3.1.3 TsHKT1s 基因系统谱系分析第33页
        3.1.4 小盐芥 HKT1s 基因启动子的克隆和分析第33-36页
    3.2 盐处理条件下小盐芥 HKT1s 基因表达的分析第36-39页
        3.2.1 小盐芥总 RNA 的提取第36页
        3.2.2 盐处理下 TsHKT1s 的表达量分析第36-38页
        3.2.3 盐处理下 TsHKT1a 和 AtHKT1 在根和地上部分的表达分析第38-39页
    3.3 TsHKT1s 的表达模式分析第39-42页
        3.3.1 小盐芥 TsHKT1s 启动子::GUS 载体的构建第39页
        3.3.2 小盐芥 TsHKT1s 在拟南芥转基因中的表达分析第39-40页
        3.3.3 盐胁迫及 ABA 诱导的 TsHKT1s 的表达第40-42页
    3.4 TsHKT1s 基因功能的分析第42-48页
        3.4.1 拟南芥 HKT1 突变体的耐盐分析第42-44页
        3.4.2 TsHKT1s 基因 cDNA 过表达载体以及基因全长互补表达载体的构建第44-47页
        3.4.3 TsHKT1s 基因 cDNA 过表达拟南芥以及基因全长互补拟南芥植物的获得第47-48页
    3.5 讨论第48-50页
参考文献第50-53页
附录A TsHKT1b 启动子区缺失的核苷酸序列(3293bp)第53-55页
附录B 中英文缩略表第55-56页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第56-57页
致谢第57页

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