| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-19页 |
| 1.1 产单核细胞李斯特菌 | 第7-8页 |
| 1.2 p60蛋白 | 第8-11页 |
| 1.3 LMp60蛋白的结构域 | 第11-15页 |
| 1.3.1 LysM | 第11-13页 |
| 1.3.2 SH3结构域 | 第13-14页 |
| 1.3.3 Nlpc/P60家族结构域 | 第14-15页 |
| 1.4 LMp60蛋白的催化活性 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的意义和依据 | 第16-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 引物 | 第19页 |
| 2.1.3 载体 | 第19-20页 |
| 2.1.4 其它主要试剂 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 LMp60蛋白重组表达质粒pRSETB-iap的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.2 LMp60蛋白各定点突变体重组表达质粒的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2.1 重组表达质粒pRSETB-D207的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2.2 重组表达质粒pRSETB-V30的构建 | 第23页 |
| 2.2.2.3 重组表达质粒pRSETB-V/D的构建 | 第23页 |
| 2.2.2.4 重组表达质粒pRSETB-S395的构建 | 第23页 |
| 2.2.3 结构域重组表达质粒的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.3.1 C端结构域重组表达质粒的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.3.2 N端结构域重组表达质粒的构建 | 第24页 |
| 2.2.4 LMp60蛋白及其各定点突变体、结构域的诱导表达与纯化 | 第24页 |
| 2.2.5 LMp60蛋白及其各定点突变体、结构域的活性检测 | 第24-26页 |
| 第三章 实验结果 | 第26-33页 |
| 3.1 重组表达质粒pRSETB-iap的构建 | 第26-27页 |
| 3.1.1 iap基因的扩增 | 第26页 |
| 3.1.2 原核表达载体pRSET-B的线性化 | 第26-27页 |
| 3.1.3 阳性克隆的筛选 | 第27页 |
| 3.2 LMp60蛋白各定点突变体及C、N端结构域重组表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| 3.3 序列的测定 | 第28-29页 |
| 3.4 LMp60蛋白、各定点突变体及C、N端结构域的诱导表达 | 第29-31页 |
| 3.5 LMp60蛋白、各定点突变体及C端结构域的纯化 | 第31-32页 |
| 3.6 蛋白的活性检测 | 第32-33页 |
| 第四章 讨论与分析 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
