| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 前言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料 | 第13-17页 |
| 2.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.2 主要试剂与材料 | 第13-15页 |
| 2.2.1 细胞培养使用的试剂 | 第13页 |
| 2.2.2 RT-PCR 使用的试剂 | 第13-14页 |
| 2.2.3 Western Blot 使用试剂 | 第14-15页 |
| 2.2.4 MTT 使用试剂 | 第15页 |
| 2.2.5 凋亡检测使用试剂 | 第15页 |
| 2.3 主要仪器 | 第15-17页 |
| 第3章 方法 | 第17-25页 |
| 3.1 细胞培养 | 第17-19页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第17页 |
| 3.1.2 细胞换液 | 第17页 |
| 3.1.3 细胞传代 | 第17-18页 |
| 3.1.4 细胞冻存 | 第18页 |
| 3.1.5 细胞计数 | 第18-19页 |
| 3.2 实验分组 | 第19页 |
| 3.2.1 分组 | 第19页 |
| 3.2.2 各种浓度药物的配置 | 第19页 |
| 3.3 RT-PCR 法检测不同药物浓度、不同作用时间在 HT29 细胞中对 P21WAFI mRNA 表达的变化 | 第19-21页 |
| 3.3.1 提取各组细胞中总 RNA | 第19-20页 |
| 3.3.2 将总 RNA 逆转录为 cDNA | 第20页 |
| 3.3.3 PCR 扩增 | 第20-21页 |
| 3.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| 3.4 Western blot 法检测不同药物浓度、不同作用时间在 HT29 细胞中对P21WAFI蛋白表达的变化 | 第21-23页 |
| 3.4.1 各组细胞蛋白提取 | 第21-22页 |
| 3.4.2 SDS-PAGE 电泳 | 第22页 |
| 3.4.3 转膜 | 第22-23页 |
| 3.4.4 免疫反应 | 第23页 |
| 3.4.5 化学发光，显影，定影 | 第23页 |
| 3.4.6 凝胶图像分析 | 第23页 |
| 3.5 细胞凋亡检测 | 第23-24页 |
| 3.6 MTT 法检测各浓度的培美曲塞及 5-FU 对细胞增殖的抑制作用 | 第24页 |
| 3.7 统计学方法 | 第24-25页 |
| 第4章 结果 | 第25-40页 |
| 4.1 RT-PCR 检测培美曲塞及 5-FU 不同药物浓度，不同用药时间作用于 HT29细胞后 P21WAFImRNA 的表达情况 | 第25-31页 |
| 4.2 Western blot 检测培美曲塞及 5-FU 不同药物浓度，不同用药时间作用于HT29 细胞后 P21WAFI蛋白的表达情况 | 第31-37页 |
| 4.3 流式细胞技术检测各种药物浓度及作用时间对细胞凋亡的影响 | 第37-39页 |
| 4.4 MTT 检测各种药物浓度及作用时间的条件下 OD 值的变化 | 第39-40页 |
| 第5章 讨论 | 第40-43页 |
| 第6章 结论与展望 | 第43-44页 |
| 6.1 结论 | 第43页 |
| 6.2 展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 综述 | 第49-56页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
