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紫外线辐射诱导DNA损伤时Rock2磷酸化位点的鉴定及对肝癌细胞生物学活性影响的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第1章 引言第8-11页
第2章 材料与方法第11-27页
    2.1 研究对象第11页
    2.2 主要试剂第11-12页
    2.3 常见试剂配制第12-14页
    2.4 主要仪器设备第14-15页
    2.5 实验方法第15-17页
        2.5.1 细胞传代第15-16页
        2.5.2 细胞冻存第16页
        2.5.3 细胞复苏第16-17页
        2.5.4 细胞转染第17页
    2.6 琼脂糖凝胶电泳第17-18页
    2.7 Western blot 检测蛋白表达变化第18-20页
        2.7.1 细胞蛋白提取第18页
        2.7.2 BCA 法测定蛋白浓度第18-19页
        2.7.3 SDS-PAGE 凝胶电泳第19页
        2.7.4 转膜第19-20页
        2.7.5 免疫反应第20页
        2.7.6 蛋白检测第20页
    2.8 Rock2 磷酸化位点的预测及其抗体的制备第20-25页
        2.8.1 生物信息学预测第20-21页
        2.8.2 特异性 Rock2 磷酸化位点抗体的制备第21页
        2.8.3 KOD 位点突变第21-23页
        2.8.4 质粒中量提取第23-24页
        2.8.5 无内毒素质粒大量提取第24-25页
    2.9 平板克隆形成实验第25页
    2.10 流式细胞术检测分析细胞凋亡的改变情况第25-26页
        2.10.1 细胞计数及种板第25页
        2.10.2 采用 AnnexinV-FITC 细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡第25-26页
    2.11 统计学分析第26-27页
第3章 结果第27-33页
    3.1 Rock2 磷酸化位点的预测第27页
    3.2 特异性 Rock2 磷酸化位点抗体的制备第27-28页
    3.3 UV 照射时,Rock2 磷酸化位点的确定第28-30页
    3.5 Rock2 磷酸化位点对肝癌细胞生物学活性的影响第30-33页
第4章 讨论第33-35页
第5章 结论第35-36页
致谢第36-37页
参考文献第37-40页
攻读学位期间的研究成果第40-41页
综述第41-46页
    参考文献第44-46页

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