摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第1章 引言 | 第8-11页 |
第2章 材料与方法 | 第11-27页 |
2.1 研究对象 | 第11页 |
2.2 主要试剂 | 第11-12页 |
2.3 常见试剂配制 | 第12-14页 |
2.4 主要仪器设备 | 第14-15页 |
2.5 实验方法 | 第15-17页 |
2.5.1 细胞传代 | 第15-16页 |
2.5.2 细胞冻存 | 第16页 |
2.5.3 细胞复苏 | 第16-17页 |
2.5.4 细胞转染 | 第17页 |
2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第17-18页 |
2.7 Western blot 检测蛋白表达变化 | 第18-20页 |
2.7.1 细胞蛋白提取 | 第18页 |
2.7.2 BCA 法测定蛋白浓度 | 第18-19页 |
2.7.3 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第19页 |
2.7.4 转膜 | 第19-20页 |
2.7.5 免疫反应 | 第20页 |
2.7.6 蛋白检测 | 第20页 |
2.8 Rock2 磷酸化位点的预测及其抗体的制备 | 第20-25页 |
2.8.1 生物信息学预测 | 第20-21页 |
2.8.2 特异性 Rock2 磷酸化位点抗体的制备 | 第21页 |
2.8.3 KOD 位点突变 | 第21-23页 |
2.8.4 质粒中量提取 | 第23-24页 |
2.8.5 无内毒素质粒大量提取 | 第24-25页 |
2.9 平板克隆形成实验 | 第25页 |
2.10 流式细胞术检测分析细胞凋亡的改变情况 | 第25-26页 |
2.10.1 细胞计数及种板 | 第25页 |
2.10.2 采用 AnnexinV-FITC 细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
2.11 统计学分析 | 第26-27页 |
第3章 结果 | 第27-33页 |
3.1 Rock2 磷酸化位点的预测 | 第27页 |
3.2 特异性 Rock2 磷酸化位点抗体的制备 | 第27-28页 |
3.3 UV 照射时,Rock2 磷酸化位点的确定 | 第28-30页 |
3.5 Rock2 磷酸化位点对肝癌细胞生物学活性的影响 | 第30-33页 |
第4章 讨论 | 第33-35页 |
第5章 结论 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
综述 | 第41-46页 |
参考文献 | 第44-46页 |