摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 乳腺炎的研究进展 | 第10-14页 |
1.1 乳腺炎简介 | 第10页 |
1.2 乳腺炎发病原因 | 第10-12页 |
1.2.1 病原菌 | 第10-11页 |
1.2.2 环境因素 | 第11页 |
1.2.3 饲养管理 | 第11页 |
1.2.4 遗传因素 | 第11-12页 |
1.3 乳腺炎的危害 | 第12页 |
1.4 乳腺炎的检测方法 | 第12-13页 |
1.4.1 乳汁病原微生物检查 | 第12页 |
1.4.2 乳汁体细胞计数法 | 第12页 |
1.4.3 乳汁pH值检验 | 第12-13页 |
1.4.4 北京乳腺炎试验法 | 第13页 |
1.5 奶牛乳腺炎的免疫及防御机制 | 第13页 |
1.6 奶牛乳腺炎抗性选择的研究进展 | 第13-14页 |
2 金黄色葡萄球菌的研究进展 | 第14-16页 |
2.1 金黄色葡萄球菌的概述 | 第14页 |
2.2 金黄色葡萄球菌型乳腺炎发病机理 | 第14-15页 |
2.3 金黄色葡萄球菌型乳腺炎的研究进展 | 第15页 |
2.4 人工诱导金黄色葡萄球菌型乳腺炎模型的建立与应用 | 第15-16页 |
3 蛋白质组学的研究平台及其在奶牛乳腺炎的研究进展 | 第16-21页 |
3.1 蛋白质组学的概述 | 第16-18页 |
3.2 iTRAQ标记技术的特点及其应用 | 第18-20页 |
3.3 蛋白质组学在奶牛乳乳腺炎上的研究进展 | 第20-21页 |
4 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 人工诱导性金葡菌型乳腺炎乳腺组织差异蛋白质的分析 | 第22-54页 |
1 材料与方法 | 第22-28页 |
1.1 材料 | 第22-23页 |
1.1.1 实验动物的选择和准备 | 第22页 |
1.1.2 菌种 | 第22-23页 |
1.1.3 奶样 | 第23页 |
1.1.4 组织样品 | 第23页 |
1.2 主要试剂及仪器设备 | 第23-24页 |
1.2.1 主要试剂 | 第23页 |
1.2.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
1.3 主要数据库及软件 | 第24页 |
1.4 实验方法与步骤 | 第24-25页 |
1.4.1 金黄色葡萄球菌的复苏,培养,鉴定 | 第24页 |
1.4.2 奶牛金黄色葡萄球菌的人工诱导模型的建立 | 第24-25页 |
1.4.2.1 实验奶牛的准备工作 | 第24页 |
1.4.2.2 实验奶牛金黄色葡萄球菌接种 | 第24-25页 |
1.4.2.3 感染金黄色葡萄球菌后奶牛临床表现变化及各项指标测量记录 | 第25页 |
1.5 奶牛人工诱导金黄色葡萄球型乳腺炎差异表达蛋白组学分析 | 第25-28页 |
1.5.1 乳腺组织样品蛋白质的提取和定量 | 第25-26页 |
1.5.2 iTRAQ实验过程 | 第26-27页 |
1.5.2.1 蛋白质酶解、标记 | 第26页 |
1.5.2.2 SCX分离 | 第26页 |
1.5.2.3 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MS/MS | 第26-27页 |
1.5.3 差异蛋白质的鉴定和定量 | 第27页 |
1.5.4 差异蛋白的生物信息学分析 | 第27-28页 |
2 结果与分析 | 第28-49页 |
2.1 奶牛金黄色葡萄球菌型乳腺炎人工诱导试验 | 第28-29页 |
2.1.1 感染后奶牛临床表现变化 | 第28页 |
2.1.2 感染后原料乳BMT检测情况 | 第28-29页 |
2.1.3 原料乳体细胞数测定 | 第29页 |
2.2 奶牛人工诱导金黄色葡萄球菌型乳腺炎差异蛋白质组学分析 | 第29-49页 |
2.2.1 蛋白质的检测结果 | 第29-31页 |
2.2.2 重复性分析 | 第31页 |
2.2.3 差异表达蛋白质分析 | 第31-49页 |
2.2.3.1 差异表达蛋白的筛选 | 第31-32页 |
2.2.3.2 与防御,免疫,炎症反应相关的差异蛋白 | 第32-45页 |
2.2.3.3 差异蛋白的GO富集分析 | 第45-46页 |
2.2.3.4 差异蛋白的Pathway富集分析 | 第46-49页 |
3 讨论 | 第49-54页 |
3.1 奶牛乳腺组织的差异蛋白 | 第49-51页 |
3.2 差异表达蛋白的GO富集分析 | 第51页 |
3.3 差异蛋白的Pathway富集分析 | 第51-52页 |
3.4 金葡菌诱导型乳腺炎乳腺组织和健康乳腺组织的差异蛋白的抗性分析 | 第52-54页 |
全文结论 | 第54-55页 |
下一步工作 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录 | 第66-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读学位期间发表的文章 | 第90-91页 |