符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-29页 |
1.1 玉米粒重性状相关基因的遗传研究 | 第14-23页 |
1.1.1 玉米产量性状的构成要素 | 第14页 |
1.1.2 玉米粒重的研究现状 | 第14-23页 |
1.1.2.1 玉米胚乳发育的生理过程 | 第15-17页 |
1.1.2.2 玉米胚乳淀粉发育的调控基因 | 第17-19页 |
1.1.2.3 玉米胚乳发育的调控途径 | 第19-23页 |
1.2 细胞色素P450超蛋白家族及CPB1研究进展 | 第23-28页 |
1.2.1 细胞色素P450蛋白超家族的研究进展 | 第23-25页 |
1.2.2 CPB1的研究进展 | 第25-28页 |
1.3 本研究目的意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-39页 |
2.1 材料 | 第29-30页 |
2.1.1 玉米自交系及其生长条件 | 第29页 |
2.1.2 拟南芥及其生长条件 | 第29页 |
2.1.3 菌株及质粒 | 第29页 |
2.1.4 酶及各种生化试剂 | 第29页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第29-30页 |
2.1.6 引物 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-39页 |
2.2.1 培养基的配制 | 第30-31页 |
2.2.2 总RNA提取方法(TriZol) | 第31-32页 |
2.2.3 RNA琼脂糖电泳检测 | 第32页 |
2.2.4 RNA浓度检测 | 第32页 |
2.2.5 基因组DNA去除及cDNA第一链的合成(TRANS试剂盒) | 第32页 |
2.2.6 Real-timeQuantitativePCR(UltraSYBRMixture) | 第32-33页 |
2.2.7 PCR扩增 | 第33页 |
2.2.8 连接反应(以pEASY–T1SimpleCloningKit为例) | 第33页 |
2.2.9 质粒DNA的酶切鉴定 | 第33页 |
2.2.10 植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
2.2.11 根癌农杆菌感受态细胞的转化 | 第34页 |
2.2.12 农杆菌介导的拟南芥的遗传转化 | 第34-35页 |
2.2.12.1 拟南芥的培育 | 第34-35页 |
2.2.12.2 拟南芥的遗传转化 | 第35页 |
2.2.12.3 转基因拟南芥植株的筛选 | 第35页 |
2.2.13 玉米幼胚再生体系的建立 | 第35-36页 |
2.2.13.1 玉米的控制授粉 | 第35页 |
2.2.13.2 玉米幼胚组织培养 | 第35-36页 |
2.2.14 基因枪介导玉米的遗传转化 | 第36-37页 |
2.2.14.1 基因枪微弹的制备 | 第36页 |
2.2.14.2 基因枪转化方法 | 第36-37页 |
2.2.15 转化后愈伤组织的培养及转基因检测 | 第37页 |
2.2.16 ZmCPB1融合RFP表达载体的构建 | 第37-38页 |
2.2.17 ZmCPB1的烟草表皮亚细胞定位 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-56页 |
3.1 玉米ZmCPB1基因的克隆与生物信息学鉴定 | 第39-48页 |
3.1.1 水稻OsCPB1在玉米基因组中的同源基因搜索鉴定 | 第39-42页 |
3.1.2 玉米ZmCPB1基因及编码蛋白结构分析 | 第42-48页 |
3.1.2.1 ZmCPB1基因结构分析 | 第42-43页 |
3.1.2.2 ZmCPB1基因启动子元件分析 | 第43-45页 |
3.1.2.3 ZmCPB1基因编码蛋白的结构分析 | 第45-48页 |
3.2 玉米ZmCPB1蛋白的亚细胞定位及表达模式分析 | 第48-50页 |
3.2.1 ZmCPB1亚细胞定位分析 | 第48-49页 |
3.2.2 ZmCPB1基因的表达模式分析 | 第49-50页 |
3.3 不同玉米自交系ZmCPB1序列多态性与粒重的相关性分析 | 第50-54页 |
3.3.1 玉米自交系的粒型统计分析 | 第50-52页 |
3.3.2 玉米自交系ZmCPB1表达量与粒重的关系 | 第52-53页 |
3.3.3 不同玉米自交系ZmCPB1基因多态性 | 第53-54页 |
3.4 ZmCPB1 基因植物表达载体的构建 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-60页 |
4.1 水稻OsCPB1直系同源基因在玉米中的搜索鉴定 | 第56-57页 |
4.2 玉米ZmCPB1基因功能分析 | 第57-58页 |
4.3 玉米ZmCPB1基因与玉米粒重相关性状的关系 | 第58-59页 |
4.4 下一步研究方向 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
附录 | 第70-74页 |
致谢 | 第74页 |