| 符号说明 | 第6-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第14-31页 |
| 1.1 弓形虫病原的发现 | 第14-15页 |
| 1.2 弓形虫病原学及生活史 | 第15-17页 |
| 1.2.1 病原学 | 第15页 |
| 1.2.2 弓形虫生活史 | 第15-17页 |
| 1.3 鸡弓形虫研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 鸡弓形虫病的流行 | 第17页 |
| 1.3.2 鸡弓形虫病临床症状 | 第17-18页 |
| 1.3.3 鸡弓形虫病的诊治 | 第18页 |
| 1.3.4 小结 | 第18-19页 |
| 1.4 弓形虫分子诊断技术研究进展 | 第19-23页 |
| 1.4.1 核酸分子杂交技术 | 第19-20页 |
| 1.4.2 弓形虫特异性靶基因 | 第20-21页 |
| 1.4.3 诊断弓形虫的PCR类型 | 第21-22页 |
| 1.4.4 环介导等温扩增法 | 第22-23页 |
| 1.5 弓形虫基因分型研究进展 | 第23-27页 |
| 1.5.1 限制性长度多态性-PCR分析技术(PCR-RFLP) | 第23-25页 |
| 1.5.2 微卫星DNA序列分析 | 第25-26页 |
| 1.5.3 多位点DNA测序分型技术(multilocussequencetyping,MLST) | 第26-27页 |
| 1.6 弓形虫主要抗原的研究进展 | 第27-29页 |
| 1.6.1 表面抗原(surfaceantigen,SAG) | 第27-28页 |
| 1.6.2 致密颗粒抗原(densegranulesantigen,GRA) | 第28-29页 |
| 1.6.3 微线体蛋白(micronemeprotein,MIC) | 第29页 |
| 1.6.4 棒状体蛋白(rhoptryprotein,ROP) | 第29页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 2 材料和方法 | 第31-42页 |
| 2.1 材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 研究地点与对象 | 第31页 |
| 2.1.2 弓形虫阳性参照DNA | 第31页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 所需的酶 | 第31页 |
| 2.1.5 引物合成 | 第31-32页 |
| 2.1.6 主要仪器和设备 | 第32-33页 |
| 2.1.7 主要试剂配制 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-42页 |
| 2.2.1 样品的采集 | 第34-35页 |
| 2.2.2 样品的处理 | 第35页 |
| 2.2.3 碱裂解法提取样品基因组DNA | 第35-36页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取试剂盒提取样品DNA | 第36页 |
| 2.2.5 引物的设计 | 第36页 |
| 2.2.6 基因组DNA巢式PCR扩增 | 第36-38页 |
| 2.2.7 特异性试验 | 第38页 |
| 2.2.8 敏感性试验 | 第38页 |
| 2.2.9 两种DNA提取方法的比较 | 第38页 |
| 2.2.10 阳性样品的筛选与统计分析 | 第38页 |
| 2.2.11 目的片段序列测序及分析 | 第38-39页 |
| 2.2.12 SAG3基因片段和GRA6基因片段的扩增 | 第39页 |
| 2.2.13 SAG3基因片段和GRA6基因片段的胶回收 | 第39-40页 |
| 2.2.14 酶切及鉴定 | 第40页 |
| 2.2.15 分型分析 | 第40-41页 |
| 2.2.16 测序分析 | 第41-42页 |
| 3 结果和分析 | 第42-57页 |
| 3.1 巢式PCR方法 | 第42-44页 |
| 3.1.1 引物设计 | 第42-43页 |
| 3.1.2 特异性试验 | 第43-44页 |
| 3.1.3 敏感性试验 | 第44页 |
| 3.2 两种提取DNA方法的比较 | 第44-47页 |
| 3.2.1 紫外分光光度法检测DNA质量 | 第44-46页 |
| 3.2.2 琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量 | 第46-47页 |
| 3.3 样本检测结果与分析 | 第47-51页 |
| 3.3.1 阳性样本数 | 第47-48页 |
| 3.3.2 阳性样本测序结果 | 第48-49页 |
| 3.3.3 不同地区样本阳性率差异 | 第49页 |
| 3.3.4 超市和市场阳性率差异 | 第49-51页 |
| 3.4 PCR-RFLP基因分型结果 | 第51-57页 |
| 3.4.1 SAG3基因片段扩增结果 | 第51页 |
| 3.4.2 SAG3基因片段分型结果 | 第51-53页 |
| 3.4.3 SAG3基因片段非典型型测序结果 | 第53-54页 |
| 3.4.4 GRA6基因片段扩增结果 | 第54页 |
| 3.4.5 GRA6基因片段分型结果 | 第54-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
