| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-28页 |
| 1.1 木聚糖 | 第17-18页 |
| 1.1.1 木聚糖酶的结构 | 第17页 |
| 1.1.2 木聚糖的水解方式 | 第17页 |
| 1.1.3 木聚糖酶的水解酶系 | 第17-18页 |
| 1.2 木聚糖酶研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 木聚糖酶的来源 | 第18-19页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的分类及理化性质 | 第19-20页 |
| 1.2.3 木聚糖酶的应用 | 第20页 |
| 1.2.4 木聚糖酶的国内外研究现状 | 第20-21页 |
| 1.3 木聚糖酶的分子改造及异源表达 | 第21-23页 |
| 1.3.1 木聚糖酶的分子改造 | 第21-23页 |
| 1.3.2 木聚糖酶的异源表达 | 第23页 |
| 1.4 木聚糖酶的固定化研究 | 第23-24页 |
| 1.4.1 酶的定向固定化 | 第23-24页 |
| 1.4.2 新型材料-可得然胶的应用 | 第24页 |
| 1.5 木聚糖酶资源的宏基因组学开发 | 第24-25页 |
| 1.5.1 宏基因组学的简介 | 第24-25页 |
| 1.5.2 木聚糖酶的分子克隆 | 第25页 |
| 1.6 木糖异构酶的研究现状 | 第25-26页 |
| 1.7 本文的研究目的与内容 | 第26-28页 |
| 第二章 木聚糖酶XynⅡ的亚克隆和表达 | 第28-36页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 mEsprit-XynⅡ-His质粒的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.3 木聚糖酶酶活测定 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-35页 |
| 2.3.1 mEsprit-XynⅡ-His质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.2 木聚糖酶酶活的测定 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 磁性琼脂糖金属微球固定化纯化木聚糖酶 | 第36-55页 |
| 3.1 试验材料与仪器 | 第36-38页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第36-38页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 Fe_3O_4纳米颗粒的制备 | 第38页 |
| 3.2.2 磁性琼脂糖金属微球的制备 | 第38-39页 |
| 3.2.3 磁性琼脂糖金属微球表征 | 第39页 |
| 3.2.4 磁性琼脂糖金属微球磁响应性测定 | 第39页 |
| 3.2.5 磁性琼脂糖金属微球固定木聚糖酶条件研究 | 第39-40页 |
| 3.2.6 酶学性质研究 | 第40-41页 |
| 3.2.7 木聚糖酶的纯化 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-54页 |
| 3.3.1 磁性琼脂糖金属微球表征 | 第41-43页 |
| 3.3.2 磁性琼脂糖金属微球磁响应性测定 | 第43页 |
| 3.3.3 磁性琼脂糖金属微球固定木聚糖酶条件研究 | 第43-47页 |
| 3.3.4 酶学性质研究 | 第47-53页 |
| 3.3.5 木聚糖酶的纯化 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 磁性可得然胶金属微球固定化纯化木聚糖酶 | 第55-70页 |
| 4.1 试验材料 | 第55页 |
| 4.1.1 试验溶液 | 第55页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第55页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第55页 |
| 4.2 试验方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 Fe_3O_4纳米颗粒的制备 | 第55页 |
| 4.2.2 磁性可得然胶金属微球的制备 | 第55-56页 |
| 4.2.3 磁性可得然胶金属微球表征 | 第56页 |
| 4.2.4 磁性可得然胶金属微球磁响应性测定 | 第56页 |
| 4.2.5 磁性可得然胶金属微球固定木聚糖酶条件研究 | 第56页 |
| 4.2.6 酶学性质研究 | 第56-57页 |
| 4.2.7 木聚糖酶的纯化 | 第57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-69页 |
| 4.3.1 磁性可得然胶金属微球表征 | 第57-59页 |
| 4.3.2 磁性可得然胶金属微球磁响应性测定 | 第59-60页 |
| 4.3.3 磁性可得然胶金属微球固定木聚糖酶条件研究 | 第60-63页 |
| 4.3.4 酶学性质研究 | 第63-68页 |
| 4.3.5 木聚糖酶的纯化 | 第68-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 第五章 通过宏基因组区段改组策略实现木聚糖酶XynⅡ的分子改造 | 第70-82页 |
| 5.1 试验材料 | 第70-71页 |
| 5.1.1 试验材料与仪器 | 第70-71页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第71页 |
| 5.2 试验方法 | 第71-75页 |
| 5.2.1 土壤宏基因组库的提取与纯化 | 第71-72页 |
| 5.2.2 微生物群落多样性测序与功能分析 | 第72-73页 |
| 5.2.3 简并引物设计 | 第73页 |
| 5.2.4 木聚糖酶新基因mEsprit-XynⅡ-New亚克隆 | 第73-75页 |
| 5.2.5 基因测序与序列比对 | 第75页 |
| 5.3 结果与分析 | 第75-82页 |
| 5.3.1 土壤宏基因组的提取与纯化 | 第75页 |
| 5.3.2 微生物群落多样性测序与功能分析 | 第75-79页 |
| 5.3.3 简并引物设计 | 第79-80页 |
| 5.3.4 木聚糖酶新基因mEsprit-XynⅡ-New亚克隆 | 第80-81页 |
| 5.3.5 基因测序与序列比对 | 第81-82页 |
| 第六章 木聚糖代谢途径构建 | 第82-96页 |
| 6.1 试验材料与仪器 | 第82-83页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第82-83页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第83页 |
| 6.2 试验方法 | 第83-86页 |
| 6.2.1 PANY2-Dd-XIase质粒的构建 | 第83页 |
| 6.2.2 木糖异构酶酶活的测定 | 第83-84页 |
| 6.2.3 mEsprit-XynⅡ-BH3683-His质粒的构建 | 第84-85页 |
| 6.2.4 mEsprit-XynⅡ-BH3683-XIase-His质粒的构建 | 第85-86页 |
| 6.2.5 木糖异构酶酶学性质研究 | 第86页 |
| 6.3 结果与分析 | 第86-95页 |
| 6.3.1 PANY2-Dd-XIase质粒的构建 | 第86-88页 |
| 6.3.2 木糖异构酶酶活测定 | 第88-89页 |
| 6.3.3 mEsprit-XynⅡ-BH3683-His质粒的构建 | 第89-90页 |
| 6.3.4 mEsprit-XynⅡ-BH3683-XIase-His质粒的构建 | 第90-92页 |
| 6.3.5 木糖异构酶酶学性质研究 | 第92-95页 |
| 6.4 讨论 | 第95-96页 |
| 第七章 总结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第103-104页 |
