| 摘要 | 第13-15页 |
| ABSTRACT | 第15-17页 |
| 前言 | 第18-35页 |
| 1. 聚合物自聚集纳米粒给药系统概述 | 第18-26页 |
| 2. 壳聚糖自聚集纳米粒给药系统研究进展 | 第26-31页 |
| 3. pH敏感型自聚集纳米粒简介 | 第31-32页 |
| 4. 本课题的立题依据与研究意义 | 第32-34页 |
| 5. 本课题研究主要内容与方案设计 | 第34-35页 |
| 第一章 脱氧胆酸修饰的羧甲基壳聚糖的合成与结构表征 | 第35-52页 |
| 1. 材料与仪器 | 第35-36页 |
| 2. 实验方法 | 第36-40页 |
| 2.1 羧甲基壳聚糖(CMCS)的合成 | 第36-37页 |
| 2.1.1 壳聚糖的纯化 | 第37页 |
| 2.1.2 CMCS的合成 | 第37页 |
| 2.2 脱氧胆酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成 | 第37页 |
| 2.3 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的合成 | 第37页 |
| 2.4 共聚物的结构表征 | 第37-40页 |
| 2.4.1 FTIR红外表征 | 第37页 |
| 2.4.2 ~1H NMR核磁共振表征 | 第37-38页 |
| 2.4.3 羧甲基和脱氧胆酸取代度的测定 | 第38-39页 |
| 2.4.4 X-射线衍射分析 | 第39页 |
| 2.4.5 差示扫描量热分析(DSC) | 第39页 |
| 2.4.6 热重分析(TGA) | 第39页 |
| 2.4.7 粘均分子量的测定 | 第39-40页 |
| 3. 结果与讨论 | 第40-50页 |
| 3.1 羧甲基壳聚糖的合成工艺考察 | 第40-42页 |
| 3.1.1 NaOH浓度 | 第40页 |
| 3.1.2 碱化温度和时间 | 第40-41页 |
| 3.1.3 氯乙酸用量 | 第41页 |
| 3.1.4 反应温度和时间 | 第41-42页 |
| 3.1.5 壳聚糖分子量 | 第42页 |
| 3.2 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的合成工艺考察 | 第42-44页 |
| 3.2.1 DMSO/H_2O | 第42-43页 |
| 3.2.2 DOCA-NHS/壳聚糖糖单元的比例 | 第43页 |
| 3.2.3 反应温度 | 第43-44页 |
| 3.2.4 反应时间 | 第44页 |
| 3.3 DCMC取代度总结 | 第44-45页 |
| 3.4 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的结构表征 | 第45-49页 |
| 3.4.1 DOCA-NHS结构表征 | 第45-46页 |
| 3.4.2 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的红外表征 | 第46-48页 |
| 3.4.3 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖的~1H NMR核磁表征 | 第48-49页 |
| 3.5 X射线衍射分析 | 第49页 |
| 3.6 差示扫描量热分析 | 第49-50页 |
| 3.7 热重分析 | 第50页 |
| 4. 小结 | 第50-52页 |
| 第二章 脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒的制备及其性质 | 第52-66页 |
| 1. 材料与仪器 | 第52-53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-54页 |
| 2.1 自聚集纳米粒的制备 | 第53页 |
| 2.2 临界聚集浓度的测定 | 第53页 |
| 2.2.1 表面张力法 | 第53页 |
| 2.2.2 芘荧光探针法 | 第53页 |
| 2.3 pH敏感性考察 | 第53-54页 |
| 2.3.1 浊度和等电点测定 | 第53-54页 |
| 2.3.2 粒径和zeta电位变化 | 第54页 |
| 2.3.3 内核完整性考察 | 第54页 |
| 2.4 粒径和zeta电位测定 | 第54页 |
| 2.5 形态学观察 | 第54页 |
| 2.6 初步稳定性考察 | 第54页 |
| 3. 结果与讨论 | 第54-65页 |
| 3.1 CAC的测定 | 第54-58页 |
| 3.1.1 表面张力法 | 第54-56页 |
| 3.1.2 芘荧光探针法 | 第56-58页 |
| 3.2 pH敏感性考察 | 第58-60页 |
| 3.2.1 浊度和等电点测定 | 第58-59页 |
| 3.2.2 粒径和zeta电位变化 | 第59页 |
| 3.2.3 内核完整性考察 | 第59-60页 |
| 3.3 DCMC自聚集纳米粒的聚集性质 | 第60页 |
| 3.4 粒径和zeta电位测定 | 第60-63页 |
| 3.4.1 DCMC浓度对粒径的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.2 超声功率对粒径的影响 | 第61页 |
| 3.4.3 超声时间对粒径的影响 | 第61页 |
| 3.4.4 DOCA取代度对粒径和zeta电位的影响 | 第61-63页 |
| 3.4.5 DCMC分子量对粒径和zeta电位的影响 | 第63页 |
| 3.5 形态学观察 | 第63-64页 |
| 3.6 初步稳定性考察 | 第64-65页 |
| 4. 小结 | 第65-66页 |
| 第三章 载阿霉素脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒的制备及性质 | 第66-87页 |
| 1. 材料与仪器 | 第66页 |
| 2. 实验方法 | 第66-70页 |
| 2.1 含量测定方法的建立 | 第66-67页 |
| 2.2 释放度测定方法的建立 | 第67-68页 |
| 2.3 载药纳米粒的制备 | 第68页 |
| 2.4 包封率和载药量的测定 | 第68页 |
| 2.5 粒径和zeta电位的测定 | 第68页 |
| 2.6 形态学观察 | 第68页 |
| 2.7 释放度考察 | 第68-70页 |
| 2.7.1 阿霉素碱基的溶解度测定 | 第69页 |
| 2.7.2 释放度考察 | 第69-70页 |
| 2.8 体外稳定性考察 | 第70页 |
| 2.8.1 动态条件下的稳定性 | 第70页 |
| 2.8.2 长期放置稳定性 | 第70页 |
| 3. 结果与讨论 | 第70-86页 |
| 3.1 含量测定方法的建立 | 第70-72页 |
| 3.2 释放度测定方法的建立 | 第72-74页 |
| 3.3 载药纳米粒的制备 | 第74-79页 |
| 3.3.1 制备方法的选择 | 第74-75页 |
| 3.3.2 处方因素考察 | 第75-79页 |
| 3.4 形态观察 | 第79-80页 |
| 3.5 释放度考察 | 第80-85页 |
| 3.5.1 阿霉素碱基的溶解度测定 | 第80页 |
| 3.5.2 载药量对药物释放的影响 | 第80-81页 |
| 3.5.3 DOCA取代度对药物释放的影响 | 第81页 |
| 3.5.4 释放介质pH值对药物释放的影响 | 第81-83页 |
| 3.5.5 CS分子量对药物释放的影响 | 第83-84页 |
| 3.5.6 体外释放模型拟合 | 第84-85页 |
| 3.6 载药纳米粒的体外稳定性考察 | 第85-86页 |
| 3.6.1 37℃动态条件下的稳定性 | 第85页 |
| 3.6.2 4℃长期放置稳定性 | 第85-86页 |
| 4. 小结 | 第86-87页 |
| 第四章 载阿霉素脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒体外抗肿瘤活性研究 | 第87-108页 |
| 1. 材料与仪器 | 第87-88页 |
| 2. 实验方法 | 第88-91页 |
| 2.1 溶液及培养液的配制方法 | 第88页 |
| 2.2 细胞培养 | 第88页 |
| 2.3 耐药细胞的表征 | 第88-89页 |
| 2.3.1 细胞形态学观察 | 第88页 |
| 2.3.2 细胞生长曲线和群体倍增时间的测定 | 第88-89页 |
| 2.3.3 药物敏感试验(MTT法) | 第89页 |
| 2.3.4 流式细胞术检测P糖蛋白表达 | 第89页 |
| 2.4 [D]NP对MCF-7和MCF-7/Adr的细胞毒作用 | 第89-90页 |
| 2.4.1 孵育时间对[D]NP细胞毒作用的影响 | 第90页 |
| 2.4.2 载体分子量对[D]NP细胞毒作用的影响 | 第90页 |
| 2.5 [D]NP的细胞摄取和细胞内分布 | 第90页 |
| 2.6 流式细胞术检测[D]NP的细胞摄取和外排 | 第90-91页 |
| 3. 结果与讨论 | 第91-107页 |
| 3.1 耐药细胞的表征 | 第91-93页 |
| 3.1.1 细胞形态学观察 | 第91页 |
| 3.1.2 细胞生长曲线和群体倍增时间的测定 | 第91-92页 |
| 3.1.3 药物敏感试验(MTT法) | 第92页 |
| 3.1.4 流式细胞术检测P糖蛋白表达 | 第92-93页 |
| 3.2 [D]NP的细胞毒作用 | 第93-100页 |
| 3.2.1 不同孵育时间[D]NP的细胞毒作用 | 第93-97页 |
| 3.2.2 不同分子量[D]NP的细胞毒作用 | 第97-100页 |
| 3.3 [D]NP的细胞摄取和细胞内分布 | 第100-106页 |
| 3.4 流式细胞术检测[D]NP的细胞摄取和外排 | 第106-107页 |
| 4. 小结 | 第107-108页 |
| 第五章 载阿霉素脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒药动学与组织分布研究 | 第108-130页 |
| 1. 动物、材料与仪器 | 第108-109页 |
| 2. 实验方法 | 第109-111页 |
| 2.1 大鼠血浆样品中阿霉素含量测定方法的建立 | 第109页 |
| 2.2 [D]NP大鼠体内药动学 | 第109-110页 |
| 2.3 H22荷瘤小鼠血浆与组织样品中阿霉素含量分析方法的建立 | 第110页 |
| 2.4 [D]NP在H22荷瘤小鼠体内的组织分布 | 第110-111页 |
| 2.4.1 H22荷瘤小鼠模型的建立 | 第110-111页 |
| 2.4.2 [D]NP在H22荷瘤小鼠体内的组织分布 | 第111页 |
| 2.5 统计学分析 | 第111页 |
| 3. 结果与讨论 | 第111-128页 |
| 3.1 大鼠血浆样品中阿霉素含量测定方法的建立 | 第111-112页 |
| 3.2 [D]NP大鼠体内药动学 | 第112-114页 |
| 3.3 H22荷瘤小鼠血浆与组织样品中阿霉素含量分析方法的建立 | 第114-116页 |
| 3.4 [D]NP在H22荷瘤小鼠体内的组织分布 | 第116-127页 |
| 3.5 [D]NP在H22荷瘤小鼠体内的靶向性评价 | 第127-128页 |
| 4. 小结 | 第128-130页 |
| 第六章 载阿霉素脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒体内药效学研究 | 第130-141页 |
| 1. 动物、材料与仪器 | 第130页 |
| 2. 实验方法 | 第130-132页 |
| 2.1 H22荷瘤小鼠模型的建立 | 第130-131页 |
| 2.2 抑瘤实验 | 第131页 |
| 2.3 外周血白细胞计数 | 第131页 |
| 2.4 肿瘤和心脏的组织形态学检查 | 第131-132页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第132-140页 |
| 3.1 荷瘤小鼠照片 | 第132页 |
| 3.2 抑瘤实验 | 第132-135页 |
| 3.2.1 瘤体积变化 | 第132-134页 |
| 3.2.2 抑瘤率 | 第134-135页 |
| 3.3 体重变化 | 第135-137页 |
| 3.4 外周血白细胞计数 | 第137-138页 |
| 3.5 肿瘤和心脏的组织形态学检查 | 第138-140页 |
| 4 小结 | 第140-141页 |
| 全文结论 | 第141-143页 |
| 创新点与展望 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-155页 |
| 缩略词表 | 第155-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第158-159页 |
| 附件 | 第159页 |
