摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-17页 |
1.1 课题研究背景 | 第10页 |
1.2 南极海冰生境 | 第10-11页 |
1.3 海冰物种的多样性 | 第11-12页 |
1.4 国内外南极微生物研究现状 | 第12-14页 |
1.4.1 南极微生物的低温适应性研究 | 第12-13页 |
1.4.2 南极微生物活性物质的研究 | 第13-14页 |
1.5 嗜盐菌耐盐机制的研究进展 | 第14-15页 |
1.6 课题研究目的、意义及主要内容 | 第15-17页 |
1.6.1 课题来源 | 第15页 |
1.6.2 课题研究的目的及意义 | 第15页 |
1.6.3 研究的主要内容 | 第15-17页 |
第2章 耐盐菌的筛选与分子鉴定 | 第17-27页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 菌株来源 | 第17页 |
2.1.2 培养基 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-21页 |
2.2.1 菌株筛选 | 第18页 |
2.2.2 细菌培养及菌体收集 | 第18页 |
2.2.3 菌体基因组的提取及鉴定 | 第18-19页 |
2.2.4 16S rDNA 基因的扩增 | 第19-20页 |
2.2.5 16S rDNA 基因的回收 | 第20页 |
2.2.6 16S rDNA 基因的 T 克隆 | 第20-21页 |
2.2.7 测序及系统发育树的构建 | 第21页 |
2.3 结果与讨论 | 第21-26页 |
2.3.1 菌株的筛选 | 第21-22页 |
2.3.2 基因组的提取 | 第22-23页 |
2.3.3 16S rDNA 基因的克隆 | 第23页 |
2.3.4 阳性克隆鉴定 | 第23-26页 |
2.4 本章小结 | 第26-27页 |
第3章 菌株的耐盐性与抗氧化酶系统 | 第27-39页 |
3.1 材料与方法 | 第27-31页 |
3.1.1 实验材料 | 第27页 |
3.1.2 培养基 | 第27-28页 |
3.1.3 菌株生长情况的测定 | 第28页 |
3.1.4 酶液的提取 | 第28页 |
3.1.5 蛋白质含量的测定 | 第28页 |
3.1.6 细胞膜透性的测定 | 第28页 |
3.1.7 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第28-29页 |
3.1.8 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第29页 |
3.1.9 过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第29-30页 |
3.1.10 过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第30-31页 |
3.2 结果与讨论 | 第31-38页 |
3.2.1 不同盐度下培养菌株的生长情况 | 第31-32页 |
3.2.2 不同盐度下培养菌体的湿重 | 第32-33页 |
3.2.3 不同盐度下培养菌株的蛋白质含量 | 第33-34页 |
3.2.4 不同盐度下培养菌株细胞质膜透性 | 第34-35页 |
3.2.5 不同盐度下培养菌株丙二醛(MDA)含量 | 第35页 |
3.2.6 不同盐度下培养菌株超氧物歧化酶(SOD)活性 | 第35-36页 |
3.2.7 不同盐度下培养菌株过氧化氢酶(CAT)活性 | 第36页 |
3.2.8 不同盐度下培养菌株过氧化物酶(POD)活性 | 第36-38页 |
3.3 本章小结 | 第38-39页 |
第4章 不同盐度下菌株差异蛋白质组学研究 | 第39-48页 |
4.1 材料与方法 | 第39-43页 |
4.1.1 试剂及其配制 | 第39-40页 |
4.1.2 双向电泳实验方法 | 第40-42页 |
4.1.3 蛋白质谱的制备和质谱鉴定 | 第42-43页 |
4.2 结果与讨论 | 第43-47页 |
4.2.1 双向电泳图谱分析 | 第43-45页 |
4.2.2 重要差异蛋白点的质谱分析 | 第45-47页 |
4.3 本章小结 | 第47-48页 |
第5章 硫氧还蛋白基因的克隆与表达 | 第48-59页 |
5.1 实验材料 | 第49页 |
5.2 实验方法 | 第49-51页 |
5.2.1 活化菌株 | 第49页 |
5.2.2 提取菌株全基因组 | 第49页 |
5.2.3 设计引物 | 第49-50页 |
5.2.4 PCR 扩增、纯化及测序 | 第50页 |
5.2.5 Trx 基因的表达 | 第50-51页 |
5.3 结果与讨论 | 第51-58页 |
5.3.1 Trx 基因的克隆 | 第51-52页 |
5.3.2 Trx 基因的序列分析 | 第52-55页 |
5.3.3 Trx 表达载体的构建 | 第55-57页 |
5.3.4 Trx 基因异源诱导表达 | 第57-58页 |
5.4 本章小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69页 |