目录 | 第7-9页 |
致谢 | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-36页 |
1.1 植物在缺磷条件下体内代谢系统的改变 | 第16-17页 |
1.2 植物在缺磷条件下根构型的改变 | 第17-18页 |
1.3 植物磷信号途径 | 第18-22页 |
1.3.1 以转录因子AtPHR1为中心调控途径 | 第18-20页 |
1.3.2 miRNA在磷信号途径中的作用 | 第20页 |
1.3.3 PHO2在磷信号途径中的作用 | 第20-21页 |
1.3.4 SPX在磷信号途径中的作用 | 第21-22页 |
1.4 紫色酸性磷酸酶的合成与分泌 | 第22-34页 |
1.4.1 紫色酸性磷酸酶的结构 | 第22-23页 |
1.4.2 植物紫色酸性磷酸酶家族分析 | 第23-26页 |
1.4.3 植物紫色酸性磷酸酶的基因功能 | 第26-32页 |
1.4.4 植物紫色酸性磷酸酶的基因调控 | 第32-34页 |
1.5 磷高效作物的改造 | 第34-35页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
第二章 材料与方法 | 第36-49页 |
2.1 试验材料 | 第36页 |
2.1.1 水稻材料 | 第36页 |
2.1.2 试验载体和菌株 | 第36页 |
2.2 实验方法 | 第36-49页 |
2.2.1 水稻的培养条件 | 第36-37页 |
2.2.2 农杆菌介导的水稻和大豆转基因体系 | 第37-40页 |
2.2.3 进化树构建 | 第40-41页 |
2.2.4 半定量和定量PCR技术 | 第41页 |
2.2.5 水稻无机磷和有机磷含量的测定 | 第41-42页 |
2.2.6 根表面酸性磷酸酶活性染色(BCIP染色法) | 第42页 |
2.2.7 蛋白提取和总蛋白含量测定 | 第42-43页 |
2.2.8 酸性磷酸酶活性测定 | 第43-44页 |
2.2.9 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和胶上酸性磷酸酶的染色 | 第44-45页 |
2.2.10 蛋白质谱检测技术 | 第45页 |
2.2.11 原核表达 | 第45-49页 |
第三章 水稻紫色酸性磷酸酶Ia亚家族的表达调控 | 第49-57页 |
3.1 水稻紫色酸性磷酸酶的生物信息学分析 | 第49-52页 |
3.1.1 水稻紫色酸性磷酸酶的蛋白质性质分析 | 第49-50页 |
3.1.2 PAPIa基因的结构分析 | 第50-52页 |
3.1.3 PAPIa亚家族进化树构建 | 第52页 |
3.2 PAPIa家族基因在转录水平上的调控 | 第52-55页 |
3.2.1 OsPAP10a和OsPAP10c特异性受缺磷强烈地诱导 | 第52-54页 |
3.2.2 OsPAP10a和OsPAP10c在转录水平上都受到OsPHR2、OsPHO2和OsSPX1的调控 | 第54-55页 |
3.3 OsPAP10c在蛋白水平上受缺磷强烈的诱导 | 第55-57页 |
第四章 水稻紫色酸性磷酸酶OsPAP10a和OsPAP10c的功能研究 | 第57-69页 |
4.1 OsPAP10a是一种分泌性酸性磷酸酶 | 第57-62页 |
4.1.1 OsPAP10a的超表达转基因水稻的培育与鉴定 | 第57-59页 |
4.1.2 OsPAP10a是分泌到根表面的酸性磷酸酶 | 第59-60页 |
4.1.3 OsPAP10a能够利用营养液中的有机磷ATP并促进水稻提早抽穗 | 第60-61页 |
4.1.4 OsPAP10a促进水稻提早抽穗 | 第61-62页 |
4.2 OsPAP10c也是具有分泌性的酸性磷酸酶并强于OsPAP10a | 第62-65页 |
4.2.1 OsPAP10c的超表达转基因水稻的培育与鉴定 | 第62-63页 |
4.2.2 OsPAP10c的根表面酸性磷酸酶活性的测定 | 第63-65页 |
4.3 OsPAP10a,OsPAP10c蛋白的原核表达 | 第65-69页 |
4.3.1 OsPAP10a的原核表达 | 第65-68页 |
4.3.2 OsPAP10c的原核表达 | 第68-69页 |
第五章 讨论与展望 | 第69-71页 |
第六章 附录抗病毒大豆转基因的获得与鉴定 | 第71-74页 |
6.1 PCR鉴定转基因植株 | 第71页 |
6.2 试纸条鉴定转基因植株 | 第71-72页 |
6.3 转基因大豆植株的抗花叶病毒病的鉴定 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
附表1 | 第84-85页 |
攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第85页 |