| 目录 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 致病性大肠杆菌简介 | 第15-19页 |
| 1.1.1 致病性大肠杆菌简介 | 第15-16页 |
| 1.1.2 肠出血性大肠杆菌O157：H7流行病学 | 第16-17页 |
| 1.1.3 肠出血性大肠杆菌O157：H7致病机理及主要致病基因 | 第17-19页 |
| 1.2 大肠杆菌生物膜形成机制 | 第19-22页 |
| 1.2.1 生物膜简介及与细菌毒力的关系 | 第19-20页 |
| 1.2.2 细菌的群体感应系统与生物膜形成 | 第20-22页 |
| 1.2.3 致病性大肠杆菌的群体感应系统 | 第22页 |
| 1.3 SOS反应与细菌毒力和生物膜形成的关系 | 第22-23页 |
| 1.4 肠出血性大肠杆菌的治疗困局 | 第23-24页 |
| 1.5 本文的主要研究意义和研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 对生物膜形成具有抑制作用的潜在药物筛选 | 第25-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 中药 | 第25页 |
| 2.1.3 仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 培养基 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 中药水煎液的制备 | 第26页 |
| 2.2.2 细菌活化及培养 | 第26页 |
| 2.2.3 梯度稀释法制备中药平板及固体平板法MIC的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 试管法和蛋白定量法分析生物膜形成量 | 第27页 |
| 2.2.5 微孔板法分析生物膜形成量 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-33页 |
| 2.3.1 两种生物膜定量方法的比较 | 第28-29页 |
| 2.3.2 固体平板上37种中药饮片的MIC及其对生物膜形成的影响 | 第29-33页 |
| 第三章 中药饮片和抗生素对O157：H7毒力因子表达量的影响 | 第33-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 菌株 | 第33页 |
| 3.1.2 中药 | 第33页 |
| 3.1.3 仪器与试剂 | 第33-34页 |
| 3.1.4 培养基 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 抗生素母液的配置 | 第34页 |
| 3.2.2 中药水煎液的制备 | 第34-35页 |
| 3.2.3 细菌活化及培养 | 第35页 |
| 3.2.4 抗生素MIC的测定 | 第35页 |
| 3.2.5 梯度稀释法制备中药平板及固体平板法MBC的测定 | 第35页 |
| 3.2.6 RNA提取 | 第35-36页 |
| 3.2.7 RNA反转录得cDNA | 第36-37页 |
| 3.2.8 Real-time PCR引物设计和反应 | 第37页 |
| 3.2.9 RNA质量检测 | 第37-38页 |
| 3.2.10 志贺毒素蛋白含量的检测 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第39-54页 |
| 3.3.1 抗生素和中药的MIC | 第39-40页 |
| 3.3.2 RNA的质量和引物特异性 | 第40页 |
| 3.3.3 Real-time PCR扩增曲线分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 管家基因和目的基因扩增标准曲线 | 第41页 |
| 3.3.5 抗生素和中药对stx2表达量的影响 | 第41-45页 |
| 3.3.6 抗生素和中药对stx2表达产物志贺蛋白表达量的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.7 抗生素和中药对eae表达量的影响 | 第47-50页 |
| 3.3.8 抗生素和中药对ygaG表达量的影响 | 第50-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-57页 |
| 3.4.1 抗生素和中药对大肠杆菌O157：H7的stx2表达量的影响 | 第54页 |
| 3.4.2 抗生素和中药对大肠杆菌O157：H7的eae表达量的影响 | 第54页 |
| 3.4.3 抗生素和中药对大肠杆菌O157：H7的ygaG表达量的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.4 抗生素和中药对大肠杆菌O157：H7的stx2和ygaG表达的影响作用存在差异的原因分析 | 第55-57页 |
| 第四章 中药饮片和抗生素对SOS反应的诱导作用 | 第57-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 菌株 | 第57-58页 |
| 4.1.2 仪器与试剂 | 第58页 |
| 4.1.3 缓冲液及培养基 | 第58页 |
| 4.2 方法 | 第58-60页 |
| 4.2.1 抗生素母液的配置 | 第58-59页 |
| 4.2.2 中药水煎液的制备 | 第59页 |
| 4.2.3 umu-lacZ体系检测步骤 | 第59-60页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第60-62页 |
| 4.4 本章小结 | 第62-65页 |
| 4.4.1 抗生素对于SOS反映的诱导强度与它们的抗菌机制有关 | 第62-63页 |
| 4.4.2 中药对SOS反应无明显诱导作用的原因需要深入研究 | 第63页 |
| 4.4.3 stx2的表达与SOS反应的诱导表现出协同效应 | 第63-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间已(待)发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 附件 | 第78页 |
