摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
1.1 赤拟谷盗 | 第14-15页 |
1.2 甲状旁腺激素受体及其相关研究 | 第15-20页 |
1.2.1 G蛋白偶联受体 | 第15-16页 |
1.2.2 甲状旁腺激素受体的发现 | 第16页 |
1.2.3 PTHR1及其配体的功能 | 第16-17页 |
1.2.4 PTHR2及其配体TIP39的功能 | 第17-18页 |
1.2.5 PTH受体的信号传导途径 | 第18-19页 |
1.2.6 其他脊椎动物中的甲状旁腺激素受体 | 第19页 |
1.2.7 PTHRs及其配体突变引起的疾病 | 第19-20页 |
1.3 RNA-seq相关研究 | 第20-23页 |
1.3.1 RNA-seq技术 | 第20页 |
1.3.2 RNA-seq技术的原理及流程 | 第20-22页 |
1.3.3 RNA-seq技术的优点 | 第22页 |
1.3.4 RNA-seq技术的应用 | 第22-23页 |
1.4 蛋白组学及其研究进展 | 第23-27页 |
1.4.1 蛋白组学的定义 | 第23页 |
1.4.2 蛋白组学的研究内容 | 第23-24页 |
1.4.3 蛋白组学研究的相关技术 | 第24-25页 |
1.4.4 蛋白组学在昆虫中的应用 | 第25-27页 |
1.5 胰岛素受体及其相关研究 | 第27-32页 |
1.5.1 胰岛素受体 | 第27-28页 |
1.5.2 胰岛素受体结构 | 第28-29页 |
1.5.3 昆虫胰岛素类似受体 | 第29-31页 |
1.5.4 胰岛素受体相关的信号通路 | 第31-32页 |
1.6 本实验的研究内容和研究意义 | 第32-34页 |
第二章 赤拟谷盗甲状旁腺激素类似受体的鉴定及功能分析 | 第34-62页 |
2.1 实验材料 | 第34-35页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第34页 |
2.1.2 实验仪器 | 第34页 |
2.1.3 实验试剂 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-45页 |
2.2.1 后生动物的PTHR鉴定及进化分析 | 第35页 |
2.2.2 引物设计 | 第35-36页 |
2.2.3 T.cas-pthrls基因的克隆 | 第36-42页 |
2.2.4 T.cas-pthrls的表达模式分析 | 第42-43页 |
2.2.5 T.cas-pthrls的RNAi分析 | 第43-45页 |
2.2.6 数据处理 | 第45页 |
2.3 结果与分析 | 第45-60页 |
2.3.1 PTHR在后生动物中的鉴定 | 第45-50页 |
2.3.2 T.cas-PTHRLs的氨基酸序列比对 | 第50页 |
2.3.3 后生动物PTHR的进化分析 | 第50-53页 |
2.3.4 T.cas-pthrls基因的鉴定 | 第53-55页 |
2.3.5 T cas-pthrls的表达模式分析 | 第55页 |
2.3.6 T.cas-pthrls的RNAi分析 | 第55-60页 |
2.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
第三章 运用RNA-seq技术对T.cas-pthrls下游基因的筛选和鉴定 | 第62-89页 |
3.1 实验材料 | 第62-63页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第62页 |
3.1.2 实验仪器 | 第62页 |
3.1.3 实验试剂 | 第62-63页 |
3.2 实验方法 | 第63-67页 |
3.2.1 赤拟谷盗的培养 | 第63页 |
3.2.2 RNA的提取、纯化及质量检测 | 第63页 |
3.2.3 RNA测序实验流程 | 第63-64页 |
3.2.4 RNA测序标准信息分析 | 第64-67页 |
3.3 结果与分析 | 第67-79页 |
3.3.1 RNA-seq reads在赤拟谷盗基因组及基因上的匹配 | 第67-68页 |
3.3.2 测序质量评估 | 第68-70页 |
3.3.3 测序饱和度分析 | 第70页 |
3.3.4 测序随机性的统计分析 | 第70-71页 |
3.3.5 基因覆盖度(Coverage)分析 | 第71-72页 |
3.3.6 RNA-seq检测基因的整体分析 | 第72-75页 |
3.3.7 差异表达基因分析 | 第75-76页 |
3.3.8 差异表达基因的功能分析 | 第76-78页 |
3.3.9 实时定量检测RNA-seq数据 | 第78-79页 |
3.4 小结与讨论 | 第79-89页 |
第四章 运用差异蛋白组学技术对T.cas-pthrls下游基因的筛选和鉴定 | 第89-108页 |
4.1 实验材料 | 第89-91页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第89页 |
4.1.2 实验仪器 | 第89页 |
4.1.3 实验试剂及配制 | 第89-91页 |
4.2 实验方法 | 第91-97页 |
4.2.1 赤拟谷盗的培养 | 第91页 |
4.2.2 蛋白样品的制备 | 第91-92页 |
4.2.3 蛋白样品的定量 | 第92页 |
4.2.4 蛋白样品水化上样 | 第92页 |
4.2.5 等电聚焦 | 第92-93页 |
4.2.6 胶条的平衡 | 第93-94页 |
4.2.7 第二维SDS-PAGE电泳 | 第94-95页 |
4.2.8 银染 | 第95页 |
4.2.9 凝胶扫描及图像分析 | 第95-96页 |
4.2.10 蛋白质胶内酶切 | 第96页 |
4.2.11 质谱分析及数据库搜索 | 第96-97页 |
4.2.12 质谱后生物信息学分析 | 第97页 |
4.3 结果与分析 | 第97-105页 |
4.3.1 T.cas-pthrls的RNAi后幼虫全蛋白与野生型的差异 | 第97-98页 |
4.3.2 差异蛋白的质谱鉴定 | 第98-103页 |
4.3.3 差异蛋白的GO和KEGG pathway分析 | 第103-105页 |
4.3.4 差异蛋白qRT-PCR验证 | 第105页 |
4.4 小结与讨论 | 第105-108页 |
第五章 赤拟谷盗胰岛素类似受体的鉴定与功能研究 | 第108-133页 |
5.1 实验材料 | 第108-109页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第108页 |
5.1.2 实验仪器 | 第108页 |
5.1.3 实验试剂及配制 | 第108-109页 |
5.2 实验方法 | 第109-113页 |
5.2.1 后生动物胰岛素受体的鉴定及进化分析 | 第109页 |
5.2.2 引物设计 | 第109-110页 |
5.2.3 T.cas-ilrs基因的克隆 | 第110页 |
5.2.4 T.cas-ilrs的表达模式分析 | 第110-111页 |
5.2.5 T.cas-ilrs的RNAi分析 | 第111-113页 |
5.2.6 数据处理 | 第113页 |
5.3 结果与分析 | 第113-130页 |
5.3.1 胰岛素受体在后生动物中的鉴定 | 第113-116页 |
5.3.2 T.cas-ILRs的氨基酸序列比对分析 | 第116-119页 |
5.3.3 后生动物胰岛素受体的进化分析 | 第119-121页 |
5.3.4 T.cas-ilrs基因的鉴定 | 第121-125页 |
5.3.5 T.cas-ilrs的表达模式分析 | 第125-126页 |
5.3.6 T.cas-ilrs的RNAi分析 | 第126-130页 |
5.4 小结与讨论 | 第130-133页 |
第六章 结论 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-149页 |
在读期间已/待发表的学术论文 | 第149-150页 |
致谢 | 第150页 |