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赤拟谷盗甲状旁腺激素类似受体(PTHRLs)与胰岛素类似受体(ILRs)的鉴定与功能分析

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
第一章 文献综述第14-34页
    1.1 赤拟谷盗第14-15页
    1.2 甲状旁腺激素受体及其相关研究第15-20页
        1.2.1 G蛋白偶联受体第15-16页
        1.2.2 甲状旁腺激素受体的发现第16页
        1.2.3 PTHR1及其配体的功能第16-17页
        1.2.4 PTHR2及其配体TIP39的功能第17-18页
        1.2.5 PTH受体的信号传导途径第18-19页
        1.2.6 其他脊椎动物中的甲状旁腺激素受体第19页
        1.2.7 PTHRs及其配体突变引起的疾病第19-20页
    1.3 RNA-seq相关研究第20-23页
        1.3.1 RNA-seq技术第20页
        1.3.2 RNA-seq技术的原理及流程第20-22页
        1.3.3 RNA-seq技术的优点第22页
        1.3.4 RNA-seq技术的应用第22-23页
    1.4 蛋白组学及其研究进展第23-27页
        1.4.1 蛋白组学的定义第23页
        1.4.2 蛋白组学的研究内容第23-24页
        1.4.3 蛋白组学研究的相关技术第24-25页
        1.4.4 蛋白组学在昆虫中的应用第25-27页
    1.5 胰岛素受体及其相关研究第27-32页
        1.5.1 胰岛素受体第27-28页
        1.5.2 胰岛素受体结构第28-29页
        1.5.3 昆虫胰岛素类似受体第29-31页
        1.5.4 胰岛素受体相关的信号通路第31-32页
    1.6 本实验的研究内容和研究意义第32-34页
第二章 赤拟谷盗甲状旁腺激素类似受体的鉴定及功能分析第34-62页
    2.1 实验材料第34-35页
        2.1.1 供试昆虫第34页
        2.1.2 实验仪器第34页
        2.1.3 实验试剂第34-35页
    2.2 实验方法第35-45页
        2.2.1 后生动物的PTHR鉴定及进化分析第35页
        2.2.2 引物设计第35-36页
        2.2.3 T.cas-pthrls基因的克隆第36-42页
        2.2.4 T.cas-pthrls的表达模式分析第42-43页
        2.2.5 T.cas-pthrls的RNAi分析第43-45页
        2.2.6 数据处理第45页
    2.3 结果与分析第45-60页
        2.3.1 PTHR在后生动物中的鉴定第45-50页
        2.3.2 T.cas-PTHRLs的氨基酸序列比对第50页
        2.3.3 后生动物PTHR的进化分析第50-53页
        2.3.4 T.cas-pthrls基因的鉴定第53-55页
        2.3.5 T cas-pthrls的表达模式分析第55页
        2.3.6 T.cas-pthrls的RNAi分析第55-60页
    2.4 小结与讨论第60-62页
第三章 运用RNA-seq技术对T.cas-pthrls下游基因的筛选和鉴定第62-89页
    3.1 实验材料第62-63页
        3.1.1 供试昆虫第62页
        3.1.2 实验仪器第62页
        3.1.3 实验试剂第62-63页
    3.2 实验方法第63-67页
        3.2.1 赤拟谷盗的培养第63页
        3.2.2 RNA的提取、纯化及质量检测第63页
        3.2.3 RNA测序实验流程第63-64页
        3.2.4 RNA测序标准信息分析第64-67页
    3.3 结果与分析第67-79页
        3.3.1 RNA-seq reads在赤拟谷盗基因组及基因上的匹配第67-68页
        3.3.2 测序质量评估第68-70页
        3.3.3 测序饱和度分析第70页
        3.3.4 测序随机性的统计分析第70-71页
        3.3.5 基因覆盖度(Coverage)分析第71-72页
        3.3.6 RNA-seq检测基因的整体分析第72-75页
        3.3.7 差异表达基因分析第75-76页
        3.3.8 差异表达基因的功能分析第76-78页
        3.3.9 实时定量检测RNA-seq数据第78-79页
    3.4 小结与讨论第79-89页
第四章 运用差异蛋白组学技术对T.cas-pthrls下游基因的筛选和鉴定第89-108页
    4.1 实验材料第89-91页
        4.1.1 供试昆虫第89页
        4.1.2 实验仪器第89页
        4.1.3 实验试剂及配制第89-91页
    4.2 实验方法第91-97页
        4.2.1 赤拟谷盗的培养第91页
        4.2.2 蛋白样品的制备第91-92页
        4.2.3 蛋白样品的定量第92页
        4.2.4 蛋白样品水化上样第92页
        4.2.5 等电聚焦第92-93页
        4.2.6 胶条的平衡第93-94页
        4.2.7 第二维SDS-PAGE电泳第94-95页
        4.2.8 银染第95页
        4.2.9 凝胶扫描及图像分析第95-96页
        4.2.10 蛋白质胶内酶切第96页
        4.2.11 质谱分析及数据库搜索第96-97页
        4.2.12 质谱后生物信息学分析第97页
    4.3 结果与分析第97-105页
        4.3.1 T.cas-pthrls的RNAi后幼虫全蛋白与野生型的差异第97-98页
        4.3.2 差异蛋白的质谱鉴定第98-103页
        4.3.3 差异蛋白的GO和KEGG pathway分析第103-105页
        4.3.4 差异蛋白qRT-PCR验证第105页
    4.4 小结与讨论第105-108页
第五章 赤拟谷盗胰岛素类似受体的鉴定与功能研究第108-133页
    5.1 实验材料第108-109页
        5.1.1 供试昆虫第108页
        5.1.2 实验仪器第108页
        5.1.3 实验试剂及配制第108-109页
    5.2 实验方法第109-113页
        5.2.1 后生动物胰岛素受体的鉴定及进化分析第109页
        5.2.2 引物设计第109-110页
        5.2.3 T.cas-ilrs基因的克隆第110页
        5.2.4 T.cas-ilrs的表达模式分析第110-111页
        5.2.5 T.cas-ilrs的RNAi分析第111-113页
        5.2.6 数据处理第113页
    5.3 结果与分析第113-130页
        5.3.1 胰岛素受体在后生动物中的鉴定第113-116页
        5.3.2 T.cas-ILRs的氨基酸序列比对分析第116-119页
        5.3.3 后生动物胰岛素受体的进化分析第119-121页
        5.3.4 T.cas-ilrs基因的鉴定第121-125页
        5.3.5 T.cas-ilrs的表达模式分析第125-126页
        5.3.6 T.cas-ilrs的RNAi分析第126-130页
    5.4 小结与讨论第130-133页
第六章 结论第133-135页
参考文献第135-149页
在读期间已/待发表的学术论文第149-150页
致谢第150页

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