中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
主要缩略词表 | 第10-12页 |
1 绪论 | 第12-28页 |
1.1 研究背景 | 第12-25页 |
1.1.1 自噬过程 | 第12-13页 |
1.1.2 自噬相关基因 | 第13-14页 |
1.1.3 自噬在植物中的功能 | 第14-16页 |
1.1.4 自噬的激活机制 | 第16-18页 |
1.1.5 自噬过程的检测方法 | 第18-19页 |
1.1.6 植物激素与自噬 | 第19-20页 |
1.1.7 ABA信号通路 | 第20-24页 |
1.1.8 ABA信号通路的功能 | 第24-25页 |
1.2 研究内容和意义 | 第25-28页 |
2 实验材料和方法 | 第28-46页 |
2.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 菌种 | 第28-29页 |
2.1.3 载体 | 第29页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第29-30页 |
2.1.5 主要试剂 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.1 试剂配制方法 | 第30-31页 |
2.2.2 荧光定量PCR检测方法 | 第31页 |
2.2.3 种子消毒方法 | 第31-32页 |
2.3 引物设计方法 | 第32-34页 |
2.3.1 用于基因克隆的引物 | 第32页 |
2.3.2 用于重组载体鉴定的引物 | 第32-33页 |
2.3.3 用于定量检测的引物 | 第33页 |
2.3.4 用于突变体验证的引物 | 第33-34页 |
2.4 基因克隆与超表达植物载体的构建 | 第34-40页 |
2.4.1 基因克隆 | 第34-36页 |
2.4.2 超表达植物载体的构建 | 第36-40页 |
2.5 转基因植株的获得和鉴定 | 第40-41页 |
2.5.1 农杆菌侵染方法 | 第40页 |
2.5.2 转基因植株的验证 | 第40-41页 |
2.6 突变体与杂交株系的鉴定 | 第41页 |
2.6.1 突变体的鉴定 | 第41页 |
2.6.2 杂交株系的构建 | 第41页 |
2.7 生理生化实验 | 第41-42页 |
2.7.1 种子萌发实验 | 第41页 |
2.7.2 幼苗处理实验 | 第41-42页 |
2.7.3 植株黑暗处理实验 | 第42页 |
2.7.4 叶片处理实验 | 第42页 |
2.7.5 自噬体的观察 | 第42页 |
2.7.6 DAB染色 | 第42页 |
2.8 酵母双杂交实验方法 | 第42-46页 |
2.8.1 酵母双杂交载体的构建 | 第42-43页 |
2.8.2 酵母双杂交载体转化酵母细胞 | 第43-44页 |
2.8.3 相互作用鉴定及自激活检验 | 第44-46页 |
3 ABA信号调控自噬 | 第46-60页 |
3.1 ABA信号激活自噬体的产生 | 第46-49页 |
3.1.1 ABA处理观察到大量的自噬体 | 第46-47页 |
3.1.2 自噬缺陷抑制GFP亮点的积累 | 第47-48页 |
3.1.3 ABA信号激活自噬体的形成 | 第48-49页 |
3.2 ABA信号激活自噬相关基因的表达 | 第49-50页 |
3.3 ABI4和ABI1调控ABA对自噬相关基因的激活 | 第50-57页 |
3.3.1 ABI5可能不参与调控ABA对自噬相关基因的激活 | 第50-52页 |
3.3.2 ABI4调控ABA对自噬相关基因的激活 | 第52-53页 |
3.3.3 ABI1负调控ABA对自噬相关基因的激活 | 第53-55页 |
3.3.4 ABA信号介导盐胁迫对自噬相关基因的激活 | 第55-57页 |
3.4 讨论 | 第57-60页 |
4 SnRK1是ABA激活自噬的正调控因子 | 第60-68页 |
4.1 ABA激活SnRK1的表达 | 第60-61页 |
4.2 SnRK1.1 超表达株系表型的验证 | 第61-62页 |
4.2.1 SnRK1.1 超表达株系对饥饿的抗性增强 | 第61-62页 |
4.2.2 SnRK1.1 超表达株系对ABA的敏感性增强 | 第62页 |
4.3 SnRK1.1 超表达增强ABA对自噬的激活 | 第62-63页 |
4.4 Raptor1能够与SnRK1.1 和ATG13a相互作用 | 第63-65页 |
4.5 讨论 | 第65-68页 |
5 自噬突变体对外源ABA的敏感性增加 | 第68-74页 |
5.1 自噬突变体萌发对外源ABA的敏感性增加 | 第68-69页 |
5.2 自噬突变体的生长发育对外源ABA的敏感性增加 | 第69-70页 |
5.3 自噬调控ABA诱导的ROS积累 | 第70-71页 |
5.4 讨论 | 第71-74页 |
6 结论与展望 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-91页 |
附录 | 第91页 |
A 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第91页 |
B 作者在攻读学位期间取得的科研成果目录 | 第91页 |