| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 食物过敏及其作用机制 | 第13-16页 |
| 1.1.1 食物过敏的分类 | 第13-14页 |
| 1.1.1.1 IgE介导的食物过敏 | 第13-14页 |
| 1.1.1.2 混合型食物过敏 | 第14页 |
| 1.1.1.3 非IgE介导的食物过敏 | 第14页 |
| 1.1.2 食物过敏的免疫学机理 | 第14-16页 |
| 1.1.2.1 耐受 | 第14-16页 |
| 1.1.2.2 致敏 | 第16页 |
| 1.2 南美白对虾主要过敏原及其致敏机理研究现状 | 第16-18页 |
| 1.2.1 南美白对虾中的主要过敏原 | 第16-17页 |
| 1.2.2 原肌球蛋白致敏机理研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3 肠道菌群在食物过敏中的调节作用及其作用机制 | 第18-20页 |
| 1.3.1 益生菌的主要种类和作用 | 第19页 |
| 1.3.2 益生菌调节食物过敏的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.4 本课题主要研究内容及意义 | 第20-23页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第20页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 1.4.3 研究技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 南美白对虾主要过敏原——原肌球蛋白分离纯化 | 第23-41页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第24页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.4.1 丙酮粉制备 | 第25-26页 |
| 2.2.4.2 TM抽提液pH值及抽提时间的优化 | 第26-27页 |
| 2.2.4.3 TM硫酸铵盐析饱和度的优化 | 第27-29页 |
| 2.2.4.4 TM纯化分析 | 第29-30页 |
| 2.2.4.5 BCA法检测蛋白浓度 | 第30-31页 |
| 2.2.4.6 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第31-33页 |
| 2.2.4.7 TM质谱鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-39页 |
| 2.3.1 抽提液pH值及抽提时间对TM提取的影响 | 第34-36页 |
| 2.3.2 硫酸铵饱和度对TM提取的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.3 TM纯化分析 | 第37-38页 |
| 2.3.4 TM质谱验证 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 Balb/c小鼠原肌球蛋白致敏模型及益生菌治疗模型构建 | 第41-65页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2. 实验材料与方法 | 第42-50页 |
| 3.2.1 实验对象 | 第42页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第43页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第43-50页 |
| 3.2.4.1 益生菌培养及菌悬液制备 | 第43-44页 |
| 3.2.4.2 小鼠免疫方案 | 第44-45页 |
| 3.2.4.3 小鼠体重变化 | 第45-46页 |
| 3.2.4.4 小鼠腹泻及过敏症状评分 | 第46页 |
| 3.2.4.5 小鼠脏器取样及单细胞悬液制备 | 第46-47页 |
| 3.2.4.6 小鼠血清中组胺(HIS)含量测定 | 第47-48页 |
| 3.2.4.7 小鼠血清中原肌球蛋白(TM)特异性IgE和IgG2a含量测定 | 第48-49页 |
| 3.2.4.8 小鼠脾细胞体外培养上清中细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13、IL-10、IL-17A、IFN-γ)含量测定 | 第49-50页 |
| 3.2.5 数据统计学分析 | 第50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-62页 |
| 3.3.1 小鼠体重变化 | 第50-51页 |
| 3.3.2 小鼠腹泻及过敏症状评分 | 第51-52页 |
| 3.3.3 小鼠血清中组胺及抗体含量变化分析 | 第52-56页 |
| 3.3.3.1 小鼠血清中组胺(Histamine)含量的测定 | 第52-55页 |
| 3.3.3.2 小鼠血清中原肌球蛋白特异性IgE含量的测定 | 第55-56页 |
| 3.3.4 小鼠脾细胞体外培养中细胞因子含量的变化分析 | 第56-62页 |
| 3.3.4.1 小鼠脾脏上清液中IL-4含量变化 | 第56-57页 |
| 3.3.4.2 小鼠脾脏上清液中IL-5含量变化 | 第57-58页 |
| 3.3.4.3 小鼠脾脏上清液中IL-13含量变化 | 第58-59页 |
| 3.3.4.4 小鼠脾脏上清液中IL-10含量变化 | 第59-60页 |
| 3.3.4.5 小鼠脾脏上清液中IL-17A含量变化 | 第60-61页 |
| 3.3.4.6 小鼠脾脏上清液中IFN-γ含量变化 | 第61-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-64页 |
| 3.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 第四章 益生菌对Balb/c致敏小鼠肠黏膜免疫调节作用探究 | 第65-85页 |
| 4.1 前言 | 第65-66页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第66-74页 |
| 4.2.1 实验对象 | 第66页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第66-67页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第67页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第67-73页 |
| 4.2.4.1 益生菌培养及菌悬液制备 | 第67页 |
| 4.2.4.2 小鼠免疫方案 | 第67页 |
| 4.2.4.3 切片及石蜡包埋 | 第67页 |
| 4.2.4.4 特殊染色法小鼠肠道中的肥大细胞和杯状细胞 | 第67-69页 |
| 4.2.4.5 免疫组化检测小鼠肠道中的CD4~+T细胞和嗜酸性粒细胞 | 第69页 |
| 4.2.4.6 TUNEL法检测小鼠肠道中的凋亡细胞 | 第69-70页 |
| 4.2.4.7 小鼠肠道组织症状评分 | 第70页 |
| 4.2.4.8 小鼠脏器中相关mRNA的表达量测定 | 第70-73页 |
| 4.2.5 数据统计学分析 | 第73-74页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第74-84页 |
| 4.3.1 小鼠肠道中杯状细胞分析 | 第74-76页 |
| 4.3.2 小鼠肠道中的肥大细胞分析 | 第76-78页 |
| 4.3.3 小鼠肠道CD4~+T细胞分析 | 第78-80页 |
| 4.3.4 小鼠肠道嗜酸性粒细胞分析 | 第80-82页 |
| 4.3.5 小鼠肠道中的凋亡细胞分析 | 第82-83页 |
| 4.3.6 小鼠脾脏、小肠、大肠相关基因mRNA表达量变化分析 | 第83-84页 |
| 4.3.6.1 小鼠脾脏、小肠、大肠中IL-4、IL-5、IL-13基因的表达量 | 第83-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 第五章 益生菌对Balb/c致敏小鼠肠道菌群及代谢产物的联合分析 | 第85-97页 |
| 5.1 前言 | 第85-86页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第86-90页 |
| 5.2.1 实验对象 | 第86页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第86页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第86-87页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第87-89页 |
| 5.2.4.1 益生菌培养、菌悬液制备、小鼠免疫方案 | 第87页 |
| 5.2.4.2 小鼠肠道内容物提取 | 第87页 |
| 5.2.4.3 肠道内容物代谢产物气质联用上机检测 | 第87-88页 |
| 5.2.4.4 肠道内容物16S扩增子测序 | 第88-89页 |
| 5.2.5 数据统计学分析 | 第89-90页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第90-96页 |
| 5.3.1 GC-TOF-MS原始数据预处理 | 第90-91页 |
| 5.3.2 主成分分析(PCA) | 第91页 |
| 5.3.3 正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA) | 第91-92页 |
| 5.3.4 肠道内容物差异代谢产物层次聚类分析 | 第92-93页 |
| 5.3.5 小鼠肠道内容物代谢通路分析 | 第93-94页 |
| 5.3.6 肠道内容物KEGG代谢通路分析 | 第94-95页 |
| 5.3.7 肠道菌群相对丰度分析 | 第95-96页 |
| 5.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 第六章 总结论、创新点及研究展望 | 第97-100页 |
| 6.1 总结论 | 第97-99页 |
| 6.2 创新点 | 第99页 |
| 6.3 研究展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-106页 |
| 附录一: 中英文对照表 | 第106-107页 |
| 附录二: 质谱鉴定原始数据 | 第107-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
