| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 符号说明 | 第17-19页 |
| 第一章 前言 | 第19-30页 |
| 1 类风湿性关节炎发病机制 | 第20-27页 |
| 1.1 RA发病机制的自身免疫反应过程 | 第21-23页 |
| 1.2 IL-6与RA的关系 | 第23-24页 |
| 1.3 IL-12与RA的关系 | 第24-25页 |
| 1.4 基质金属蛋白酶与RA的关系 | 第25-26页 |
| 1.5 NF-κB与RA的关系 | 第26-27页 |
| 2 鲨鱼软骨多糖与RA | 第27-28页 |
| 2.1 鲨鱼软骨多糖与IL-6和IL-12 | 第27-28页 |
| 2.2 鲨鱼软骨多糖与MMPs | 第28页 |
| 3 本课题拟解决的问题 | 第28-30页 |
| 第二章 鲨鱼软骨多糖的分离、纯化与筛选 | 第30-42页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| 1.1 试剂 | 第30页 |
| 1.2 仪器 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| 2.1 鲨鱼软骨提取物的精制 | 第31页 |
| 2.2 鲨鱼软骨多糖的分离、纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.1 QFF离子交换色谱分离鲨鱼软骨多糖 | 第31-32页 |
| 2.2.2 分离后样品的脱盐 | 第32页 |
| 2.3 鲨鱼软骨多糖的纯度测定 | 第32-33页 |
| 2.4 咔唑法测糖醛酸含量 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-40页 |
| 3.1 鲨鱼软骨多糖的分离、纯化 | 第33-37页 |
| 3.1.1 QFF离子交换色谱分离鲨鱼软骨多糖 | 第33-34页 |
| 3.1.2 分离后样品的脱盐 | 第34-37页 |
| 3.2 鲨鱼软骨多糖各组分醋酸纤维素薄膜电泳 | 第37-38页 |
| 3.3 咔唑法测糖醛酸含量 | 第38-40页 |
| 3.3.1 葡萄糖醛酸内酯标准曲线的测定 | 第38-39页 |
| 3.3.2 各样品糖醛酸含量的测定 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 第三章 鲨鱼软骨多糖的结构研究 | 第42-51页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1.1 试剂 | 第42页 |
| 1.2 仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| 2.1 紫外光谱扫描 | 第42页 |
| 2.2 红外光谱扫描 | 第42页 |
| 2.3 质谱测定 | 第42-43页 |
| 2.4 核磁共振图谱测定 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-49页 |
| 3.1 鲨鱼软骨多糖的紫外扫描图谱 | 第43-44页 |
| 3.2 鲨鱼软骨多糖的红外光谱扫描 | 第44-46页 |
| 3.3 鲨鱼软骨多糖质谱的测定 | 第46页 |
| 3.4 核磁共振图谱测定 | 第46-49页 |
| 3.4.1 鲨鱼软骨多糖~1H-NMR分析结果 | 第47页 |
| 3.4.2 鲨鱼软骨多糖~(13)C-NMR分析结果 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 鲨鱼软骨多糖对Rat IL-6和Rat IL-12分泌的影响 | 第51-71页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| 1.1 试剂 | 第51页 |
| 1.2 仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-55页 |
| 2.1 大鼠类风湿性关节炎模型的建立 | 第51-52页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第51-52页 |
| 2.1.2 实验动物分组 | 第52页 |
| 2.1.3 大鼠类风湿性关节炎模型的建立 | 第52页 |
| 2.2 大鼠类风湿性关节炎疗效评价 | 第52-53页 |
| 2.2.1 大鼠体重及足跖肿胀度指标变化 | 第52页 |
| 2.2.2 观察大鼠踝关节和膝关节组织形态学改变 | 第52页 |
| 2.2.3 X线评价 | 第52-53页 |
| 2.3 大鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备和培养 | 第53页 |
| 2.4 细胞因子的测定 | 第53-55页 |
| 2.4.1 Rat IL-6含量的测定 | 第54页 |
| 2.4.2 Rat IL-12含量的测定 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-68页 |
| 3.1 大鼠体重及足跖肿胀度指标变化 | 第55-61页 |
| 3.1.1 大鼠体重指标的变化 | 第55-57页 |
| 3.1.2 大鼠足跖肿胀度指标变化 | 第57-58页 |
| 3.1.3 X线评价 | 第58-61页 |
| 3.2 大鼠腹腔巨噬细胞培养液Rat IL-6含量测定 | 第61-63页 |
| 3.2.1 Rat IL-6标准曲线的测定 | 第61-62页 |
| 3.2.2 Rat IL-6的表达水平 | 第62-63页 |
| 3.3 大鼠腹腔巨噬细胞培养液Rat IL-12含量测定 | 第63-65页 |
| 3.3.1 Rat IL-12标准曲线的测定 | 第63页 |
| 3.3.2 Rat IL-12的表达水平 | 第63-65页 |
| 3.4 不同鲨鱼软骨多糖浓度对Rat IL-6、Rat IL-12含量的影响 | 第65-68页 |
| 3.4.1 三种鲨鱼软骨多糖对Rat IL-6含量影响测定 | 第65-66页 |
| 3.4.2 三种鲨鱼软骨多糖对Rat IL-12含量影响测定 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 5 小结 | 第70-71页 |
| 第五章 鲨鱼软骨多糖对Rat IL-6和Rat IL-12 mRNA转录的影响 | 第71-88页 |
| 1 材料 | 第71-72页 |
| 1.1 试剂 | 第71页 |
| 1.2 主要仪器设备及耗材 | 第71-72页 |
| 1.3 溶液配置 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-79页 |
| 2.1 提取分离总RNA | 第72-73页 |
| 2.1.1 实验器具的处理与准备 | 第72-73页 |
| 2.1.2 总RNA的提取分离 | 第73页 |
| 2.2 RT-PCR | 第73-78页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第74-76页 |
| 2.2.2 目的基因及内参照基因的反转录 | 第76-77页 |
| 2.2.3 目的基因及内参照基因的PCR扩增 | 第77-78页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第78页 |
| 2.3 退火温度的选择 | 第78页 |
| 2.4 鲨鱼软骨多糖对Rat IL-6及Rat IL-12 mRNA转录的影响 | 第78-79页 |
| 3 结果 | 第79-85页 |
| 3.1 总RNA的提取分离 | 第79-80页 |
| 3.1.1 总RNA1％琼脂糖凝胶电泳 | 第79页 |
| 3.1.2 总RNA参数 | 第79-80页 |
| 3.2 退火温度的选择 | 第80-81页 |
| 3.2.1 内参照β-actin退火温度的选择 | 第80页 |
| 3.2.2 目的基因退火温度的选择 | 第80-81页 |
| 3.3 鲨鱼软骨多糖对Rat IL-6及Rat IL-12 mRNA转录的影响 | 第81-85页 |
| 3.3.1 SCP-3、SCP-4和SCP-5对Rat IL-6 mRNA转录的影响 | 第81-83页 |
| 3.3.2 SCP-3、SCP-4和SCP-5对Rat IL-12mRNA转录的影响 | 第83-85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 5 小结 | 第87-88页 |
| 第六章 鲨鱼软骨多糖对明胶酶活性的影响 | 第88-95页 |
| 1 材料 | 第88页 |
| 1.1 试剂 | 第88页 |
| 1.2 仪器 | 第88页 |
| 2 方法 | 第88-90页 |
| 2.1 琥珀酰化明胶的制备 | 第89页 |
| 2.2 明胶酶浓度的选择 | 第89页 |
| 2.3 鲨鱼软骨多糖对明胶酶活性影响的测定 | 第89-90页 |
| 3 结果 | 第90-93页 |
| 3.1 明胶酶浓度的选择 | 第90-91页 |
| 3.2 鲨鱼软骨多糖对明胶酶活性影响的测定 | 第91-93页 |
| 4 讨论 | 第93-94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 总结 | 第95-97页 |
| 附录 | 第97-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第124页 |
