| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写词表 | 第15-17页 |
| 第1章 引言 | 第17-19页 |
| 第2章 文献综述 | 第19-33页 |
| 1 甲状腺癌相关信号转导通路研究进展 | 第19-24页 |
| 1.1 RET/PTC-RAS-RAF-MEK/ERK-MAPK信号传导通路 | 第19-21页 |
| 1.2 PI3K/AKT信号通路 | 第21-22页 |
| 1.3 粘着斑激酶FAK(FOCAL ADHESION KINASE) | 第22-23页 |
| 1.4 NF-κB信号通路 | 第23-24页 |
| 1.5 结语 | 第24页 |
| 2 SONIC HEDGEHOG信号通路研究进展 | 第24-33页 |
| 2.1 SHH的分类和结构 | 第24-26页 |
| 2.2 SONIC HEDGEHOG的信号转导途径 | 第26-29页 |
| 2.3 SHH蛋白与SONIC HEDGEHOG信号通路的生物学功能 | 第29-32页 |
| 2.4 结语 | 第32-33页 |
| 第3章 甲状腺乳头状癌组织中SHH和GLI1的表达及其临床意义研究 | 第33-41页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.2 方法 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-38页 |
| 2.1 SHH和GLI1在甲状腺乳头状癌及癌旁甲状腺组织中的表达情况 | 第35-37页 |
| 2.2 SHH和GLI1表达与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 3.1 SONIC HEDGEHOG信号通路与PTC | 第38-39页 |
| 3.2 SHH和GLI1在PTC表达意义的评价 | 第39页 |
| 4 结论 | 第39-41页 |
| 第4章 甲状腺乳头状癌细胞培养及慢病毒载体构建 | 第41-80页 |
| 第1节 人甲状腺乳头状癌原代细胞的体外长期培养 | 第41-52页 |
| 1 材料和方法 | 第41-45页 |
| 1.1 研究对象、主要试剂及仪器 | 第41-43页 |
| 1.2 PTC细胞分离和培养 | 第43-44页 |
| 1.3 PTC细胞监测和鉴定 | 第44-45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| 2.1 PTC细胞培养生长情况形态学观察 | 第45-48页 |
| 2.2 PTC细胞培养液中的TG和TPO表达情况 | 第48页 |
| 2.3 免疫细胞化学检测TG | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 3.1 PTC取材对象和取材方式 | 第49-50页 |
| 3.2 PTC细胞的营养及生存条件 | 第50页 |
| 3.3 PTC细胞监测和鉴定 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 第2节 SHH基因在PTC细胞表达情况与慢病毒感染PTC细胞实验 | 第52-65页 |
| 1 材料和方法 | 第52-58页 |
| 1.1 实验细胞、主要试剂及仪器 | 第52-53页 |
| 1.2 实验方法 | 第53-58页 |
| 2 结果 | 第58-63页 |
| 2.1 SHH和TG的REAL-TIME PCR结果 | 第58-62页 |
| 2.2 PTC原代细胞PGC-FU-LV感染绿色荧光表达情况 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 3.1 SHH基因在PTC细胞表达情况评价 | 第63-64页 |
| 3.2 慢病毒感染PTC细胞实验评价 | 第64页 |
| 4 结论 | 第64-65页 |
| 第3节 人SHH基因重组过表达慢病毒载体的构建与鉴定 | 第65-80页 |
| 1 材料和方法 | 第65-71页 |
| 1.1 慢病毒载体、主要试剂及仪器 | 第65-66页 |
| 1.2 实验方法 | 第66-71页 |
| 2 结果 | 第71-77页 |
| 2.1 PCR扩增目的基因 | 第71页 |
| 2.2 重组质粒PGC-FU-SHH的PCR阳性克隆鉴定 | 第71-72页 |
| 2.3 重组质粒PGC-FU-SHH的测序结果 | 第72-74页 |
| 2.4 转染293T细胞后荧光显微镜观察结果及WESTERN-BLOTTING检测鉴定结果 | 第74-76页 |
| 2.5 病效价测定结果 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 3.1 逆转录病毒与慢病毒 | 第77-78页 |
| 3.2 慢病毒载体的应用 | 第78页 |
| 3.3 PGC-FU-SHH-GFP慢病毒过表达载体的建立及评价 | 第78-79页 |
| 4 结论 | 第79-80页 |
| 第5章 慢病毒转染后稳定过表达SHH对PTC细胞体外生物学性状影响的研究 | 第80-94页 |
| 1 材料和方法 | 第81-84页 |
| 1.1 主要试剂及仪器 | 第81-82页 |
| 1.2 实验方法 | 第82-84页 |
| 2 结果 | 第84-91页 |
| 2.1 慢病毒载体转染PTC原代细胞的效率 | 第84-85页 |
| 2.2 稳定过表达SHH对PTC细胞体外生物学的性状影响 | 第85-88页 |
| 2.3 稳定过表达SHH对PTC细胞中SHH通路相关基因表达变化 | 第88-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| 3.1 SHH的作用 | 第91-92页 |
| 3.2 在PTC中SONIC HEDGEHOG信号转导通路的功能 | 第92-93页 |
| 3.3 可能调节SHH通路活性的因素 | 第93页 |
| 4 结论 | 第93-94页 |
| 第6章 结论 | 第94-95页 |
| 创新点 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-105页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
