摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)研究进展 | 第12-17页 |
·SOD在植物细胞内的分布 | 第12-14页 |
·植物SOD基因的组织表达特异性 | 第14-15页 |
·环境胁迫与植物SOD的关系 | 第15-16页 |
·ABA与植物SOD基因的表达调控 | 第16页 |
·SOD转基因植物与植物的抗逆性 | 第16-17页 |
·东方山羊豆研究进展 | 第17-18页 |
·本研究目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的克隆及序列分析 | 第19-33页 |
·材料 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·克隆载体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要溶液和培养基 | 第20页 |
·方法 | 第20-27页 |
·植物材料的处理方法 | 第20页 |
·东方山羊豆总RNA 的提取 | 第20-21页 |
·RACE 引物合成 | 第21页 |
·制备5'-RACE-Ready cDNA和3'-RACE-Ready cDNA | 第21-22页 |
·5'-RACE和3'-RACE PCR反应 | 第22-23页 |
·PCR 产物回收 | 第23-24页 |
·PCR 回收产物与TA 克隆载体的连接 | 第24页 |
·连接产物的转化 | 第24页 |
·单克隆的培养及检测 | 第24-25页 |
·全长cDNA 的开放阅读框序列的获得 | 第25-26页 |
·阳性克隆菌液保存 | 第26页 |
·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因的生物信息学分析方法 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-32页 |
·东方山羊豆总RNA 的提取 | 第27页 |
·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因5'末端和3'末端序列的获得 | 第27-28页 |
·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因开放阅读框(ORF)的获得 | 第28页 |
·东方山羊豆Cu/ZnSOD 蛋白序列的分析 | 第28-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第三章 东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因的表达分析 | 第33-40页 |
·材料 | 第33页 |
·方法 | 第33-35页 |
·植物材料处理方法 | 第33页 |
·引物设计 | 第33页 |
·引物质量检测 | 第33-34页 |
·Cu/ZnSOD基因的组织表达特异性 | 第34-35页 |
·Cu/ZnSOD基因在不同逆境胁迫下的表达量 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-38页 |
·引物质量检测结果 | 第35-36页 |
·Cu/ZnSOD基因的组织表达特异性 | 第36-37页 |
·Cu/ZnSOD基因在不同逆境胁迫下的表达分析 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第四章 东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的亚细胞定位 | 第40-50页 |
·材料 | 第40-41页 |
·主要试剂、溶液及培养基 | 第40-41页 |
·菌株和载体 | 第41页 |
·植物材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-46页 |
·引物设计 | 第41页 |
·酶切Cu/ZnSOD基因和载体pCAMBIA1302 | 第41-42页 |
·对酶切后的载体pCAMBIA1302进行去磷酸化 | 第42-43页 |
·连接,转化 | 第43页 |
·抽提质粒 | 第43-44页 |
·农杆菌感受态制备 | 第44页 |
·农杆菌的转化及阳性克隆的鉴定 | 第44-45页 |
·烟草的培养 | 第45页 |
·农杆菌的活化 | 第45页 |
·烟草注射 | 第45页 |
·观察蛋白表达 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-48页 |
·构建植物超表达载体流程 | 第46页 |
·超表达载体的PCR 检测 | 第46-47页 |
·亚细胞定位 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论与展望 | 第50-51页 |
·结论 | 第50页 |
·创新点 | 第50页 |
·后续工作的展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |