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东方山羊豆铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与分析

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-19页
   ·超氧化物歧化酶(SOD)研究进展第12-17页
     ·SOD在植物细胞内的分布第12-14页
     ·植物SOD基因的组织表达特异性第14-15页
     ·环境胁迫与植物SOD的关系第15-16页
     ·ABA与植物SOD基因的表达调控第16页
     ·SOD转基因植物与植物的抗逆性第16-17页
   ·东方山羊豆研究进展第17-18页
   ·本研究目的及意义第18-19页
第二章 东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的克隆及序列分析第19-33页
   ·材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌株第19页
     ·克隆载体第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·主要溶液和培养基第20页
   ·方法第20-27页
     ·植物材料的处理方法第20页
     ·东方山羊豆总RNA 的提取第20-21页
     ·RACE 引物合成第21页
     ·制备5'-RACE-Ready cDNA和3'-RACE-Ready cDNA第21-22页
     ·5'-RACE和3'-RACE PCR反应第22-23页
     ·PCR 产物回收第23-24页
     ·PCR 回收产物与TA 克隆载体的连接第24页
     ·连接产物的转化第24页
     ·单克隆的培养及检测第24-25页
     ·全长cDNA 的开放阅读框序列的获得第25-26页
     ·阳性克隆菌液保存第26页
     ·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因的生物信息学分析方法第26-27页
   ·结果与分析第27-32页
     ·东方山羊豆总RNA 的提取第27页
     ·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因5'末端和3'末端序列的获得第27-28页
     ·东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因开放阅读框(ORF)的获得第28页
     ·东方山羊豆Cu/ZnSOD 蛋白序列的分析第28-32页
   ·讨论第32-33页
第三章 东方山羊豆Cu/ZnSOD 基因的表达分析第33-40页
   ·材料第33页
   ·方法第33-35页
     ·植物材料处理方法第33页
     ·引物设计第33页
     ·引物质量检测第33-34页
     ·Cu/ZnSOD基因的组织表达特异性第34-35页
     ·Cu/ZnSOD基因在不同逆境胁迫下的表达量第35页
   ·结果与分析第35-38页
     ·引物质量检测结果第35-36页
     ·Cu/ZnSOD基因的组织表达特异性第36-37页
     ·Cu/ZnSOD基因在不同逆境胁迫下的表达分析第37-38页
   ·讨论第38-40页
第四章 东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的亚细胞定位第40-50页
   ·材料第40-41页
     ·主要试剂、溶液及培养基第40-41页
     ·菌株和载体第41页
     ·植物材料第41页
   ·方法第41-46页
     ·引物设计第41页
     ·酶切Cu/ZnSOD基因和载体pCAMBIA1302第41-42页
     ·对酶切后的载体pCAMBIA1302进行去磷酸化第42-43页
     ·连接,转化第43页
     ·抽提质粒第43-44页
     ·农杆菌感受态制备第44页
     ·农杆菌的转化及阳性克隆的鉴定第44-45页
     ·烟草的培养第45页
     ·农杆菌的活化第45页
     ·烟草注射第45页
     ·观察蛋白表达第45-46页
   ·结果与分析第46-48页
     ·构建植物超表达载体流程第46页
     ·超表达载体的PCR 检测第46-47页
     ·亚细胞定位第47-48页
   ·讨论第48-50页
第五章 结论与展望第50-51页
   ·结论第50页
   ·创新点第50页
   ·后续工作的展望第50-51页
参考文献第51-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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