粘质沙雷氏菌的原生质体诱变及几丁质酶的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-20页 |
| 1. 导言 | 第9-18页 |
| ·几丁质酶及其分类 | 第10-11页 |
| ·几丁质酶的分布 | 第11-13页 |
| ·植物几丁质酶 | 第11-12页 |
| ·动物几丁质酶 | 第12页 |
| ·微生物几丁质酶 | 第12-13页 |
| ·产几丁质酶微生物的类群 | 第12-13页 |
| ·微生物几丁质酶的性质 | 第13页 |
| ·微生物产几丁质酶的特性 | 第13-14页 |
| ·多样性 | 第13-14页 |
| ·诱导性 | 第14页 |
| ·分泌性 | 第14页 |
| ·微生物几丁质酶的理化性质 | 第14-15页 |
| ·环境条件对酶活性的影响 | 第14页 |
| ·分子量 | 第14-15页 |
| ·等电点 | 第15页 |
| ·金属离子的影响 | 第15页 |
| ·几丁质酶的应用 | 第15-17页 |
| ·植物几丁质酶的应用 | 第15-16页 |
| ·参与植物抗胁迫反应 | 第15页 |
| ·参与发育调控 | 第15-16页 |
| ·其它生理功能 | 第16页 |
| ·微生物几丁质酶的应用 | 第16-17页 |
| ·抑制病原真菌生长,抵抗真菌感染 | 第16页 |
| ·水解几丁质,制备壳寡糖 | 第16页 |
| ·在抗病基因工程中的应用 | 第16页 |
| ·在害虫防治中具有增效作用 | 第16-17页 |
| ·粘质沙雷氏菌合成几丁质酶水解几丁质的研究进展 | 第17-18页 |
| ·微生物产碱性几丁质酶研究和应用中所面临的问题 | 第18页 |
| 2. 实验设计 | 第18-20页 |
| 第2章 产几丁质酶RZ21菌株的单诱变与复合诱变 | 第20-31页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要试剂及来源 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备型号及来源 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-25页 |
| ·生长曲线及几丁质酶产酶曲线的测定 | 第21页 |
| ·菌悬液的制备 | 第21页 |
| ·菌体量的测定 | 第21-22页 |
| ·原生质体的紫外线诱变 | 第22页 |
| ·NaNO_2诱变 | 第22-23页 |
| ·复合因素诱变 | 第23页 |
| ·摇瓶复筛培养 | 第23页 |
| ·诱变株的遗传稳定性研究 | 第23页 |
| ·胶体几丁质的制备 | 第23-24页 |
| ·几丁质酶活力的测定 | 第24页 |
| ·DNS试剂的配制-Ghose法 | 第24页 |
| ·DNS标准曲线 | 第24-25页 |
| ·实验结果 | 第25-29页 |
| ·粘质沙雷氏菌的生长曲线及产酶曲线 | 第25-26页 |
| ·原生质体紫外线诱变结果 | 第26-27页 |
| ·NaNO_2的诱变结果 | 第27页 |
| ·复合诱变结果 | 第27-28页 |
| ·摇瓶复筛结果 | 第28-29页 |
| ·诱变菌株遗传稳定性的研究 | 第29页 |
| ·讨论与分析 | 第29-31页 |
| 第3章 产几丁质酶NU2诱变株的培养条件优化 | 第31-46页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·出发菌株 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·主要试剂及来源 | 第32页 |
| ·主要仪器设备型号及来源 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·培养方法 | 第32页 |
| ·测定方法 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-45页 |
| ·碳源筛选结果 | 第33-34页 |
| ·氮源筛选结果 | 第34-36页 |
| ·无机盐NaCl浓度的筛选 | 第36-37页 |
| ·外加几丁质形态对酶活提高效果的影响 | 第37-40页 |
| ·胶体几丁质对几丁质酶活力的提高效果 | 第37-38页 |
| ·50目粉末几丁质对几丁质酶活力的提高效果 | 第38-39页 |
| ·150目粉末几丁质对几丁质酶活力的提高效果 | 第39-40页 |
| ·培养温度对诱变株NU2几丁质酶活力的影响 | 第40页 |
| ·初始pH对诱变株NU2几丁质酶活力的影响 | 第40-41页 |
| ·转速对诱变株NU2几丁质酶活力的影响 | 第41-42页 |
| ·装液量对诱变株NU2几丁质酶活力的影响 | 第42-43页 |
| ·接种量对诱变株NU2几丁质酶活力的影响 | 第43页 |
| ·正交试验 | 第43-45页 |
| ·讨论与分析 | 第45-46页 |
| 第4章 NU2诱变株几丁质酶酶学性质研究 | 第46-60页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-50页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·菌种 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-47页 |
| ·主要试剂及来源 | 第47页 |
| ·主要仪器设备型号及来源 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·几丁质酶的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·试剂配制 | 第48-49页 |
| ·蛋白浓度测定方法 | 第49页 |
| ·几丁质酶水解活性的测定方法 | 第49-50页 |
| ·温度对几丁质酶活力的影响 | 第50页 |
| ·pH对几丁质酶活力的影响 | 第50页 |
| ·不同缓冲液对酶活力的影响 | 第50页 |
| ·不同化学物质对几丁质酶活力的影响 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-59页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第50-51页 |
| ·透析 | 第51页 |
| ·几丁质酶催化水解几丁质的最适作用温度 | 第51-52页 |
| ·几丁质酶的热稳定性 | 第52页 |
| ·几丁质酶催化水解几丁质的最适作用pH | 第52-53页 |
| ·几丁质酶的pH稳定性 | 第53页 |
| ·不同缓冲液对酶活力的影响 | 第53-54页 |
| ·金属及非金属离子对几丁质酶活力的影响 | 第54-57页 |
| ·酸根离子对酶活的效应 | 第54-55页 |
| ·正一价金属离子对酶活的效应 | 第55页 |
| ·正二价金属离子对酶活的效应 | 第55-56页 |
| ·正三价金属离子对酶活的效应 | 第56-57页 |
| ·重金属离子对酶活的效应 | 第57页 |
| ·EDTA对几丁质酶活力的影响 | 第57页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第57-59页 |
| ·讨论与分析 | 第59-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
