| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-37页 |
| 第一章 马链球菌兽疫亚种与猪链球菌病的研究进展 | 第11-27页 |
| 1 病原学 | 第12页 |
| 2 流行病学 | 第12-13页 |
| 3 临床症状及病理变化 | 第13-14页 |
| ·临床症状 | 第13页 |
| ·病理变化 | 第13-14页 |
| 4 毒力因子与致病机理 | 第14-20页 |
| ·类M蛋白 | 第14-16页 |
| ·纤维结合素结合蛋白 | 第16-17页 |
| ·IgG结合蛋白 | 第17-18页 |
| ·透明质酸荚膜 | 第18页 |
| ·链激酶 | 第18-19页 |
| ·金属结合脂蛋白 | 第19-20页 |
| 5 猪链球菌病的诊断 | 第20-24页 |
| ·分离培养及生化鉴定 | 第20-21页 |
| ·血清学鉴定 | 第21页 |
| ·分子鉴定 | 第21-24页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第21-22页 |
| ·脉冲场凝胶电泳法 | 第22-23页 |
| ·多位点酶电泳法 | 第23页 |
| ·多位点序列分型 | 第23-24页 |
| 6 猪链球菌病的防治 | 第24-26页 |
| ·药物治疗 | 第24页 |
| ·疫苗的研究进展 | 第24-26页 |
| ·弱毒苗 | 第24-25页 |
| ·全菌灭活苗 | 第25页 |
| ·基因工程苗 | 第25-26页 |
| 7 小结 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-37页 |
| 第二篇 研究报告 | 第37-71页 |
| 第二章 马链球菌兽疫亚种新鉴定免疫原性蛋白的原核表达 | 第37-55页 |
| 1 材料 | 第38-40页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·主要酶和试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·引物设计及合成 | 第38-40页 |
| 2 方法 | 第40-47页 |
| ·模板DNA的提取 | 第40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第41-42页 |
| ·质粒的提取 | 第42页 |
| ·重组质粒构建 | 第42-44页 |
| ·PCR扩增产物和质粒的双酶切 | 第42-43页 |
| ·连接 | 第43页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| ·连接产物的转化 | 第44页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第44页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE检测重组融合蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·制胶 | 第44-45页 |
| ·上样与电泳 | 第45页 |
| ·染色与脱色 | 第45页 |
| ·重组融合蛋白的纯化与复性 | 第45-47页 |
| ·重组菌的大量诱导 | 第45-46页 |
| ·包涵体的纯化 | 第46页 |
| ·上清的纯化 | 第46页 |
| ·融合蛋白的复性 | 第46-47页 |
| ·重组融合蛋白免疫印迹 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| ·PCR扩增结果 | 第47-48页 |
| ·重组菌的PCR鉴定和双酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·重组质粒在BL21中的表达 | 第49-50页 |
| ·融合蛋白的纯化与鉴定 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 马链球菌兽疫亚种新鉴定免疫原性蛋白对小鼠的免疫效力评价 | 第55-71页 |
| 1 材料 | 第56页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·试验动物 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-61页 |
| ·菌株的复壮 | 第56-57页 |
| ·ATCC35246株LD_(50)的测定 | 第57-58页 |
| ·免疫原的制备 | 第58页 |
| ·全菌苗及亚单位疫苗的制备 | 第58页 |
| ·无菌检验与安全检验 | 第58页 |
| ·小鼠的主动免疫保护性试验 | 第58-59页 |
| ·小鼠的免疫 | 第58页 |
| ·攻毒试验 | 第58-59页 |
| ·ELISA检测重组融合蛋白抗体效价 | 第59-60页 |
| ·血清样本的采集 | 第59页 |
| ·小鼠抗体动态效价测定 | 第59-60页 |
| ·调理吞噬试验 | 第60-61页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞的制备 | 第60-61页 |
| ·细菌悬液制备 | 第61页 |
| ·调理吞噬 | 第61页 |
| ·统计学分析 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-65页 |
| ·菌株的复壮 | 第61-62页 |
| ·ATCC35246株对ICR小鼠的LD_(50) | 第62-63页 |
| ·安全性检验 | 第63页 |
| ·重组蛋白对小鼠的免疫保护效力试验 | 第63-64页 |
| ·ELISA检测重组蛋白抗血清效价 | 第64页 |
| ·调理吞噬试验 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 全文总结 | 第71-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
