| 摘要 | 第12-16页 |
| ABSTRACTS | 第16-19页 |
| 符号说明 | 第20-22页 |
| 第一章 前言 | 第22-37页 |
| 第一节 肽酶 | 第22-23页 |
| 第二节 氨肽酶N | 第23-37页 |
| 2.1 APN的结构特征 | 第23-25页 |
| 2.2 APN的催化机理 | 第25-26页 |
| 2.3 APN的组织分布 | 第26-27页 |
| 2.4 APN与肿瘤 | 第27-29页 |
| 2.4.1 促进肿瘤新血管的形成 | 第27-28页 |
| 2.4.2 促进肿瘤转移 | 第28页 |
| 2.4.3 APN是肿瘤干细胞的标记物 | 第28-29页 |
| 2.5 以APN靶点的药物研究简介 | 第29-33页 |
| 2.5.1 天然APN抑制剂 | 第29-31页 |
| 2.5.2 化学合成APN抑制剂 | 第31-32页 |
| 2.5.3 APN靶向药物 | 第32-33页 |
| 2.6 以APN靶点的探针研究 | 第33-37页 |
| 2.6.1 APN酶活检测探针 | 第33-35页 |
| 2.6.2 基于NGR的组织检测探针 | 第35页 |
| 2.6.3 基于APN抑制剂的组织检测探针 | 第35-37页 |
| 第二章 以APN为靶点的荧光探针的设计与合成 | 第37-90页 |
| 第一节 可激活型APN荧光探针的设计 | 第38-43页 |
| 1 氨基酸-自发降解连接基团-香豆素类APN探针的设计 | 第39-41页 |
| 1.1 APN识别基团的选择 | 第40页 |
| 1.2 自发降解连接基团的选择 | 第40页 |
| 1.3 荧光团及连接方式的选择 | 第40-41页 |
| 2 氨基酸-萘二酰亚胺类APN探针的设计 | 第41页 |
| 3 氨基酸-自发降解连接基团-萘二酰亚胺类APN探针 | 第41-43页 |
| 第二节 以APN为靶点的荧光抑制剂 | 第43-44页 |
| 第三节 目标探针的合成 | 第44-90页 |
| 1 氨基酸-自发降解连接基团-香豆素类APN探针 | 第44-55页 |
| 1.1 探针1.1-7a、1.1-7b、1.1-7c的合成 | 第44-49页 |
| 1.2 探针1.2-4b、1.2-4c的合成 | 第49-52页 |
| 1.3 探针1.3-7的合成 | 第52-54页 |
| 1.4 讨论 | 第54-55页 |
| 2 氨基酸-萘二酰亚胺类APN探针 | 第55-64页 |
| 2.1 氨基酸-萘二酰亚胺类APN探针的合成 | 第55-59页 |
| 2.2 二肽-萘二酰亚胺类APN探针的合成 | 第59-64页 |
| 3 氨基酸-自发降解连接基团-萘二酰亚胺类探针的合成 | 第64-66页 |
| 4 以APN为靶点的荧光抑制剂 | 第66-90页 |
| 4.1 系列1的合成 | 第66-77页 |
| 4.2 系列2的合成 | 第77-80页 |
| 4.3 系列3的合成 | 第80-88页 |
| 4.4 讨论 | 第88-90页 |
| 第三章 目标探针的活性评价 | 第90-122页 |
| 第一节 可激活型APN荧光探针的活性研究 | 第90-108页 |
| 1 氨基酸-自发降解连接基团-香豆素类APN探针的活性研究 | 第90-97页 |
| 1.1 荧光性质的研究 | 第91-92页 |
| 1.2 探针1.1-7a的灵敏度和动力学参数的测定 | 第92-93页 |
| 1.3 探针1.1-7a的在APN抑制剂筛选中的应用 | 第93-95页 |
| 1.4 讨论与总结 | 第95页 |
| 1.5 实验步骤 | 第95-97页 |
| 1.5.1 LOD的测定 | 第95-96页 |
| 1.5.2 V_(max)和K_m的测定 | 第96页 |
| 1.5.3 蛋白水平APN的IC_(50)测定 | 第96-97页 |
| 1.5.4 细胞表面APN的IC_(50)测定 | 第97页 |
| 2 氨基酸-萘二酰亚胺类APN探针的活性研究 | 第97-102页 |
| 2.1 探针2.1-6c、2.1-6d、2.1-6e的光学性质及动力学参数研究 | 第97-99页 |
| 2.2 探针2.1-6e对细胞表面APN酶活的成像研究 | 第99-100页 |
| 2.3 探针的选择性研究 | 第100-101页 |
| 2.4 讨论与总结 | 第101-102页 |
| 2.5 实验步骤 | 第102页 |
| 2.5.1 探针2.1-6c、2.1-6d、2.1-6e的动力学常数测定 | 第102页 |
| 2.5.2 探针2.1-6e对细胞表面APN酶活的成像 | 第102页 |
| 3 探针2 .2-6在溶酶体成像中的应用 | 第102-106页 |
| 3.1 探针2.2-6的pH依赖性研究 | 第103页 |
| 3.2 探针2.2-6所标记细胞器的确定 | 第103-105页 |
| 3.3 总结与讨论 | 第105页 |
| 3.4 实验步骤 | 第105-106页 |
| 3.4.1 光学性质测定 | 第105-106页 |
| 3.4.2 活细胞成像 | 第106页 |
| 3.4.3 固定细胞成像 | 第106页 |
| 4 氨基酸-自发降解连接基团-萘二酰亚胺类APN探针的活性研究 | 第106-108页 |
| 第二节 具有荧光性质的APN抑制剂的活性研究 | 第108-122页 |
| 1 荧光抑制剂的体外抑酶试验 | 第108-115页 |
| 1.1 IC_(50)测试方法的选择 | 第108-109页 |
| 1.2 测试结果 | 第109-111页 |
| 1.3 分子对接 | 第111-113页 |
| 1.4 讨论 | 第113-114页 |
| 1.5 试验步骤 | 第114-115页 |
| 1.5.1 系列1与系列2的IC_(50)测定 | 第114页 |
| 1.5.2 系列3的IC_(50)测定 | 第114-115页 |
| 1.5.3 ES-2细胞表面APN的IC_(50)测定 | 第115页 |
| 1.5.4 分子对接研究 | 第115页 |
| 2 目标化合物4.1 -3k抑制肿瘤增长试验 | 第115-118页 |
| 2.1 目标化合物4.1-3k体外抗肿瘤细胞增殖试验 | 第116页 |
| 2.2 H_(22)小鼠肝癌人工肺转移试验 | 第116-117页 |
| 2.3 讨论 | 第117页 |
| 2.4 实验步骤 | 第117-118页 |
| 2.4.1 MTT试验 | 第117页 |
| 2.4.2 H_(22)小鼠肝癌人工肺转移试验 | 第117-118页 |
| 3 目标化合物4.1 -3k对肿瘤细胞成像研究 | 第118-122页 |
| 3.1 4.1-3k对肿瘤细胞和非肿瘤细胞成像 | 第118-119页 |
| 3.2 讨论 | 第119页 |
| 3.3 实验步骤 | 第119-122页 |
| 第四章 总结与展望 | 第122-126页 |
| 第一节 总结 | 第122-125页 |
| 1 可激活型APN荧光探针 | 第122-123页 |
| 2 具有荧光性质的APN抑制剂 | 第123-125页 |
| 第二节 展望 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第132-133页 |
| 附：部分中间体和目标化合物的~1HNMR,~(13)CNMR和HRMS图谱 | 第133-175页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第175页 |
