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木食性高等白蚁肠道内纤维素降解菌的筛选及酶活性分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1. 绪论第12-17页
    1.1 引言第12页
    1.2 木质纤维素的组成及其降解酶类第12-13页
    1.3 白蚁与其肠道微生物组成的共生体系第13-16页
        1.3.1 白蚁的分类第13-14页
        1.3.2 低等白蚁及其肠道微生物对木质纤维素的降解第14-15页
        1.3.3 高等白蚁及其肠道微生物对木质纤维素的降解第15-16页
    1.4 研究目的和意义第16-17页
2. 实验材料第17-20页
    2.1 白蚁样品的采集和饲养第17页
    2.2 培养基第17-18页
        2.2.1 培养基1第17页
        2.2.2 培养基2第17页
        2.2.3 培养基3第17页
        2.2.4 培养基4第17页
        2.2.5 分离纯化培养基第17-18页
        2.2.6 LB培养基(液体)第18页
        2.2.7 LB培养基(固体)第18页
    2.3 实验所用溶液和试剂第18-19页
    2.4 其他常用试剂第19页
    2.5 实验仪器和设备第19-20页
3. 实验方法第20-27页
    3.1 白蚁的解剖及肠道菌悬液制备第20-21页
    3.2 纤维素降解菌的富集培养第21页
    3.3 筛选纤维素降解菌第21页
    3.4 筛选的混合菌群扫描电镜观察第21页
    3.5 混合菌群细菌的16S RRNA基因文库的构建第21-23页
        3.5.1 混合菌群细菌基因组DNA的提取第21-22页
        3.5.2 混合菌群细菌16S rRNA基因的扩增引物与反应体系第22页
        3.5.3 混合菌群细菌16S rRNA基因的扩增条件第22页
        3.5.4 混合菌群细菌16S rRNA基因文库的构建第22-23页
        3.5.5 RFLP分析第23页
    3.6 混合菌群中不同细菌的分离纯化与共培养第23-24页
        3.6.1 混合菌群不同细菌的分离纯化第23-24页
        3.6.2 混合菌群中分离菌株的的革兰氏染色和形态观察第24页
        3.6.3 混合菌系分离菌株的共培养第24页
    3.7 混合菌群纤维素酶、木聚糖酶活性测定及产酶条件研究第24-26页
        3.7.1 葡萄糖标准曲线及回归方程第24页
        3.7.2 粗酶液提取第24-25页
        3.7.3 采用DNS法检测酶活性第25-26页
    3.8 利用刚果红平板筛选纤维素降解菌第26-27页
        3.8.1 富集培养第26页
        3.8.2 用刚果红平板筛选纤维素降解菌第26页
        3.8.3 筛选菌株的分离纯化和革兰氏染色观察第26页
        3.8.4 筛选菌株的16S rRNA基因分析第26页
        3.8.5 酶活性分析第26-27页
4. 实验结果第27-41页
    4.1 一个能降解纤维素的混合菌群的筛选与初步研究第27-36页
        4.1.1 能降解纤维素的混合菌群的筛选第27-28页
        4.1.2 混合菌群扫描电镜观察第28-29页
        4.1.3 混合菌群细菌16S rRNA基因文库的构建第29-31页
        4.1.4 混合菌群中细菌的分离纯化与共培养第31-34页
        4.1.5 混合菌群纤维素酶和木聚糖酶产酶条件研究第34-36页
    4.2 利用刚果红平板筛选纤维素降解菌第36-41页
        4.2.1 利用刚果红平板筛选纤维素降解菌第36-38页
        4.2.2 筛选菌株分离纯化和革兰氏染色观察第38-39页
        4.2.3 筛选菌株的16S rRNA基因分析第39页
        4.2.4 XB-7和JH-8酶活性初步分析第39-41页
5. 讨论第41-43页
参考文献第43-46页
致谢第46页

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