英文缩写 | 第11-13页 |
绪论 | 第13-31页 |
1 树突状细胞与肿瘤免疫治疗研究现状 | 第13-22页 |
1.1 树突状细胞的生物学特性 | 第14-15页 |
1.1.1 特性 | 第14页 |
1.1.2 来源 | 第14页 |
1.1.3 分化发育与成熟 | 第14-15页 |
1.1.4 表型 | 第15页 |
1.2 树突状细胞的抗原提呈 | 第15-16页 |
1.2.1 DC的基本抗原提呈途径 | 第15页 |
1.2.2 DC对MHC Ⅱ类抗原的提呈 | 第15页 |
1.2.3 DC对MHC Ⅰ类抗原的提呈 | 第15-16页 |
1.3 树突状细胞与特异性细胞免疫 | 第16-17页 |
1.3.1 DC为T细胞提供双信号刺激 | 第16页 |
1.3.2 DC与TH细胞间的相互作用 | 第16-17页 |
1.3.3 DC细胞因子分泌 | 第17页 |
1.3.4 DC参与免疫调节 | 第17页 |
1.4 树突状细胞与肿瘤发生 | 第17-18页 |
1.5 树突状细胞与肿瘤免疫逃避 | 第18页 |
1.6 树突状细胞与肿瘤免疫治疗 | 第18-20页 |
1.6.1 特异性肿瘤免疫治疗 | 第18-19页 |
1.6 2 基因治疗 | 第19-20页 |
1.7 树突状细胞与慢性粒细胞白血病治疗 | 第20-21页 |
1.8 结语 | 第21-22页 |
2 白细胞介素18及其抗肿瘤研究进展 | 第22-29页 |
2.1 IL-18的发现与命名 | 第22页 |
2.2 IL-18的来源 | 第22-23页 |
2.3 IL-18的分子特性和表达调控 | 第23页 |
2.4 IL-18的受体和信号传导 | 第23-24页 |
2.4.1 IRAK途径 | 第23-24页 |
2.4.2 MAPK途径 | 第24页 |
2.4.3 Fas 配体途径 | 第24页 |
2.5 IL-18的免疫调节活性 | 第24-26页 |
2.5.1 调节细胞因子 | 第24-25页 |
2.5.2 调节免疫细胞 | 第25-26页 |
2.6 IL-18的抗肿瘤作用机制 | 第26-28页 |
2.6.1 NK细胞介导的抗肿瘤 | 第26-27页 |
2.6.2 T细胞介导的抗肿瘤 | 第27页 |
2.6.3 肿瘤血管形成的抑制 | 第27页 |
2.6.4 粘附分子的调节 | 第27-28页 |
2.6.5 肿瘤细胞凋亡 | 第28页 |
2.7 IL-18与肿瘤治疗 | 第28-29页 |
2.8 结语 | 第29页 |
3 树突状细胞的慢性粒细胞白血病治疗研究 | 第29-31页 |
第一部分 CML细胞体外诱生DC及其激活抗白血病免疫反应 | 第31-59页 |
一、 材料 | 第31-34页 |
1 主要实验仪器和器材 | 第31-32页 |
2 主要试剂 | 第32-34页 |
3 实验对象 | 第34页 |
二、 方法 | 第34-40页 |
1 慢性粒细胞白血病细胞诱生DC及形态观察、表型鉴定 | 第35-36页 |
1.1 慢性粒细胞白血病细胞诱生DC | 第35页 |
1.2 CML DCs形态观察 | 第35页 |
1.3 流式细胞仪(FCM)细胞表型检测 | 第35-36页 |
2 免疫磁珠富集CML DCs及白血病源性检测 | 第36-38页 |
2.1 CML DCs富集 | 第36页 |
2.2 CML DCs的白血病源性检测 | 第36-38页 |
3 CML DCs抗白血病免疫反应 | 第38-40页 |
3.1 CML患者T细胞扩增 | 第38-39页 |
3.2 CML DCs与T细胞增殖 | 第39页 |
3.3 CML DCs与特异性CTL杀伤作用 | 第39-40页 |
3.4 集落培养 | 第40页 |
4 统计方法 | 第40页 |
三、 结果 | 第40-53页 |
1 CML DCs形态学观察及细胞表面标志检测 | 第40-46页 |
1.1 显微镜观察 | 第41页 |
1.2 电镜观察 | 第41页 |
1.3 荧光显微镜观察 | 第41-45页 |
1.4 流式细胞仪检测 | 第45-46页 |
2 CML DCs富集及白血病源性检测 | 第46-48页 |
2.1 树突状细胞富集 | 第46页 |
2.2 CML DCs白血病源性检测 | 第46-48页 |
3 CML DCs抗白血病免疫 | 第48-53页 |
3.1 T细胞纯度检测 | 第48页 |
3.2 CML DCs与T淋巴细胞增殖 | 第48-49页 |
3.3 CML DCs与特异性CTL杀伤作用 | 第49-52页 |
3.4 集落培养 | 第52-53页 |
四、 讨论 | 第53-59页 |
第二部分 Percoll密度离心法富集慢性粒细胞白血病DC前体细胞的方法学研究 | 第59-68页 |
一、 材料 | 第59-60页 |
1 主要实验仪器和器材 | 第59页 |
2 主要试剂 | 第59-60页 |
二、 方法 | 第60-61页 |
1 55%Percoll分离外周血单个核细胞 | 第60页 |
2 各层细胞分类计数 | 第60页 |
3 DC诱导及细胞表型检测 | 第60-61页 |
4 统计方法 | 第61页 |
三、 结果 | 第61-65页 |
1 各层细胞分类计数 | 第61-63页 |
2 细胞表型检测 | 第63-65页 |
四、 讨论 | 第65-68页 |
第三部分 CML DCs治疗慢性粒细胞白血病的临床研究 | 第68-76页 |
一、 材料 | 第68-69页 |
1 主要仪器和器材 | 第68页 |
2 主要试剂 | 第68页 |
3 临床资料 | 第68-69页 |
二、 方法 | 第69-71页 |
1 DC的扩增、诱导、检测和冻存 | 第69页 |
2 DC回输 | 第69页 |
3 迟发型超敏反应检测 | 第69-70页 |
4 外周血CD4+、CD8+ 细胞检测 | 第70页 |
5 染色体检测 | 第70页 |
6 bcr-abl+细胞检测 | 第70-71页 |
三、 结果 | 第71-73页 |
1 DC回输 | 第71页 |
2 DTH | 第71页 |
3 染色体分析 | 第71页 |
4 DC回输前后WBC变化 | 第71-72页 |
5 外周血CD4+、CD8+ 细胞检测 | 第72页 |
6 bcr-abl+细胞百分率FISH检测 | 第72-73页 |
四、 讨论 | 第73-76页 |
第四部分 转染白细胞介素18基因树突状细胞增强抗白血病作用的实验研究 | 第76-91页 |
一、 材料 | 第76-77页 |
1 主要实验仪器和器材 | 第76页 |
2 主要试剂 | 第76-77页 |
二、 方法 | 第77-81页 |
1 质粒制备与纯化 | 第78页 |
2 DC的诱导和扩增 | 第78页 |
3 IL-18的转染 | 第78-79页 |
4 细胞内IL-18水平检测 | 第79页 |
5 IL-18 mRNA表达的RT-PCR检测 | 第79-80页 |
6 DC培养上清中IL-18浓度的ELISA检测 | 第80页 |
7 IL-18基因修饰DC的体外刺激T细胞增殖反应 | 第80页 |
8 IL-18基因修饰DC激活特异性CTL的杀伤作用 | 第80-81页 |
9 IL-18基因修饰DC对NK细胞杀伤活性的影响 | 第81页 |
10 统计学方法 | 第81页 |
三、 结果 | 第81-87页 |
1 RT-PCR检测结果 | 第82页 |
2 IL-18浓度的ELISA检测 | 第82-83页 |
3 细胞内IL-18检测 | 第83页 |
4 CD80+、CD86+细胞数检测 | 第83-84页 |
5 IL-18基因修饰DC的体外刺激T细胞增殖反应 | 第84-85页 |
6 IL-18基因修饰DC激活特异性CTL的杀伤作用 | 第85-86页 |
7 IL-18基因修饰DC对NK细胞活性作用的影响 | 第86-87页 |
四、 讨论 | 第87-91页 |
结 论 | 第91-92页 |
参 考 文 献 | 第92-103页 |
攻读博士学位期间已发表的文章 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
摘要 | 第105-116页 |