| 前言 | 第12-14页 |
| 第一篇:文献综述 | 第14-38页 |
| 第一章 哺乳动物防御素研究进展及应用前景展望 | 第14-26页 |
| 1 哺乳动物防御素的产生与分子构形特点 | 第14-18页 |
| 2 防御素的基因表达与生物合成 | 第18-19页 |
| 3 哺乳动物防御素的生物学活性 | 第19-22页 |
| 4 哺乳动物防御素在医学与农牧业上的应用前景 | 第22-26页 |
| 第二章 动物乳腺生物反应器研究及应用进展 | 第26-38页 |
| 1 乳腺生物反应器及其原理 | 第26-27页 |
| 2 乳腺生物反应器的构建 | 第27-29页 |
| 3 外源基因乳腺表达方法 | 第29-30页 |
| 4 乳腺生物反应器的优势与应用 | 第30-33页 |
| 5 乳腺生物反应器存在的主要问题 | 第33-35页 |
| 6 乳腺生物反应器的应用前景 | 第35-38页 |
| 第二篇:研究内容 | 第38-118页 |
| 第一章 鼠小肠隐窝防御素 Defc14 基因的合成、克隆与测序 | 第38-56页 |
| 1 材料与方法 | 第38-49页 |
| 1.1 材料 | 第38-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| 2.1 pGEM-Dec14 载体构建图 | 第49-50页 |
| 2.2 合成基因片段连接后琼脂糖凝胶电泳结果 | 第50页 |
| 2.3 重组质粒pGEM-Defc14 的PCR 鉴定 | 第50-51页 |
| 2.4 重组质粒pGEM-Defc14 的酶切鉴定 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-56页 |
| 第二章 兔巨噬细胞防御素 Mcp-1 基因的克隆与测序 | 第56-66页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 1.1 材料 | 第56页 |
| 1.2 方法 | 第56-59页 |
| 2 结果 | 第59-63页 |
| 2.1 pGEM-Mcp-1 载体构建图 | 第59-60页 |
| 2.2 RT-PCR 结果 | 第60-61页 |
| 2.3 RT-PCR 回收产物序列测定 | 第61-62页 |
| 2.4 重组质粒pGEM-MCP-1(含牛β-酪蛋白信号肽序列)的PCR 鉴定 | 第62-63页 |
| 2.5 重组质粒pGEM-MCP-1(含牛β-酪蛋白信号肽序列)的酶切鉴定 | 第63页 |
| 2.6 重组质粒pGEM-MCP-1(含牛β-酪蛋白信号肽序列)序列测定 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 第三章 防御素真核表达载体的构建 | 第66-94页 |
| 1 材料与方法 | 第66-75页 |
| 1.1 材料 | 第66页 |
| 1.2 方法 | 第66-75页 |
| 2 结果 | 第75-89页 |
| 2.1 pBC1-Neo 载体构建策略 | 第75页 |
| 2.2 pGEM-T-neo 质粒 PCR 和单酶切鉴定 | 第75-77页 |
| 2.3 重组质粒pGEM-T-Neo 的核苷酸测序结果 | 第77-82页 |
| 2.4 pBC1-Neo 质粒PCR、单酶切和正反向鉴定 | 第82-84页 |
| 2.5 pBC1-Neo-Defc14 和pBC1-Neo-Mcp-1 载体构建策略 | 第84-86页 |
| 2.6 pBC1-neo-Defcr4 进行 PCR、单酶切和正反向鉴定 | 第86-88页 |
| 2.7 pBC1-Neo-Mcp-1 PCR 和单酶切鉴定 | 第88-89页 |
| 2.8 pBC1-Neo-Defc14 和pBC1-Neo-Mcp-1 正反向鉴定 | 第89页 |
| 3 讨论 | 第89-92页 |
| 4 小结 | 第92-94页 |
| 第四章 防御素 Defc14 和 Mcp-1 基因在牛乳腺中的瞬时表达 | 第94-104页 |
| 1 材料与方法 | 第94-96页 |
| 1.1 材料 | 第94-95页 |
| 1.2 方法 | 第95-96页 |
| 2 结果 | 第96-99页 |
| 2.1 牛奶中抗菌活性物的测定结果 | 第96-97页 |
| 2.2 牛奶中防御素(Defc14)梯次 RP-HPLC 分离纯化结果 | 第97-98页 |
| 2.3 防御素表达量的时效变化 | 第98-99页 |
| 2.4 防御素提取物的 SDS—PAGE 电泳结果 | 第99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| 4 小结 | 第102-104页 |
| 第五章 牛奶中 Defc14 防御素的分离、纯化与液质谱分析 | 第104-118页 |
| 1 材料 | 第104-105页 |
| 2 方法 | 第105-107页 |
| 3 结果 | 第107-112页 |
| 3.1 牛奶第一次 RP—HPLC 分离结果 | 第107-108页 |
| 3.2 牛奶第二次 RP—HPLC 分离结果 | 第108页 |
| 3.3 提取液抗菌活性检测结果 | 第108页 |
| 3.4 提取纯化物的紫外光谱扫描结果 | 第108-109页 |
| 3.5 提取物纯化物的液相一质谱联用仪分析结果 | 第109-112页 |
| 4 讨论 | 第112-116页 |
| 5 小结 | 第116-118页 |
| 结论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-130页 |
| 中文摘要 | 第130-134页 |
| 英文摘要 | 第134页 |
| 致谢 | 第136页 |
