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人β2-GPⅠ基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达及纯化

摘要第4-5页
Abstract第5页
目录第6-8页
第一章 前言第8-15页
    1.1 β_2-GPI 概述第8-9页
    1.2 β_2-GPI 的结构特征第9页
    1.3 β_2-GPI 的抗原表位第9-10页
    1.4 β_2-GPI 的生理作用第10-12页
        1.4.1 β_2-GPI 的凝血作用第11-12页
        1.4.2 β_2-GPI 对凋亡细胞、外源物质等异物的清除作用第12页
    1.5 oxLDL、β_2-GPI 和 anti-β_2-GPI 与疾病的关系第12-15页
第二章 Bac-to-Bac 昆虫杆状病毒重组表达工艺介绍第15-17页
    2.1 利用 Bac-to-Bac 昆虫杆状病毒表达系统简介及优势第15-16页
    2.2 Bacmid 转染扩毒和蛋白质表达第16-17页
        2.2.1 昆虫细胞培养第16-17页
        2.2.2 Bamid 重组病毒转染 Sf9 细胞第17页
第三章 实验材料与方法第17-25页
    3.1 实验材料第17-20页
        3.1.1 细胞株及载体第17-18页
        3.1.2 培养基第18页
        3.1.3 主要试剂和工具酶第18-19页
        3.1.4 主要仪器第19-20页
    3.2 方法第20-25页
        3.2.1 质粒 Bacmid-β_2-GPI PCR 鉴定第20页
        3.2.2 Sf9 昆虫细胞的培养第20-21页
        3.2.3 Bacmid-β_2-GPI 重组穿梭载体转染 Sf9 细胞第21页
        3.2.4 重组杆状病毒的鉴定第21-22页
        3.2.5 重组病毒扩增第22页
        3.2.6 目的蛋白的初步鉴定第22-23页
        3.2.7 目的蛋白的纯化第23-25页
第四章 结果与讨论第25-31页
    4.1 质粒 Bacmid-β_2-GPI 的 PCR 鉴定第25页
    4.2 Bacmid-β_2-GPI 重组穿梭载体转染 Sf9 细胞第25页
    4.3 重组杆状病毒的鉴定第25-27页
    4.4 重组病毒扩毒 P2第27页
    4.5 重组病毒扩毒 P3第27-28页
    4.6 Sf9 细胞无血清培养第28-29页
    4.7 表达产物 SDS-PAGE 的鉴定第29页
    4.8 表达产物纯化及 Western-blot 鉴定第29-30页
    4.9 结论第30-31页
参考文献第31-36页
致谢第36页

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