摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第8-15页 |
1.1 β_2-GPI 概述 | 第8-9页 |
1.2 β_2-GPI 的结构特征 | 第9页 |
1.3 β_2-GPI 的抗原表位 | 第9-10页 |
1.4 β_2-GPI 的生理作用 | 第10-12页 |
1.4.1 β_2-GPI 的凝血作用 | 第11-12页 |
1.4.2 β_2-GPI 对凋亡细胞、外源物质等异物的清除作用 | 第12页 |
1.5 oxLDL、β_2-GPI 和 anti-β_2-GPI 与疾病的关系 | 第12-15页 |
第二章 Bac-to-Bac 昆虫杆状病毒重组表达工艺介绍 | 第15-17页 |
2.1 利用 Bac-to-Bac 昆虫杆状病毒表达系统简介及优势 | 第15-16页 |
2.2 Bacmid 转染扩毒和蛋白质表达 | 第16-17页 |
2.2.1 昆虫细胞培养 | 第16-17页 |
2.2.2 Bamid 重组病毒转染 Sf9 细胞 | 第17页 |
第三章 实验材料与方法 | 第17-25页 |
3.1 实验材料 | 第17-20页 |
3.1.1 细胞株及载体 | 第17-18页 |
3.1.2 培养基 | 第18页 |
3.1.3 主要试剂和工具酶 | 第18-19页 |
3.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
3.2 方法 | 第20-25页 |
3.2.1 质粒 Bacmid-β_2-GPI PCR 鉴定 | 第20页 |
3.2.2 Sf9 昆虫细胞的培养 | 第20-21页 |
3.2.3 Bacmid-β_2-GPI 重组穿梭载体转染 Sf9 细胞 | 第21页 |
3.2.4 重组杆状病毒的鉴定 | 第21-22页 |
3.2.5 重组病毒扩增 | 第22页 |
3.2.6 目的蛋白的初步鉴定 | 第22-23页 |
3.2.7 目的蛋白的纯化 | 第23-25页 |
第四章 结果与讨论 | 第25-31页 |
4.1 质粒 Bacmid-β_2-GPI 的 PCR 鉴定 | 第25页 |
4.2 Bacmid-β_2-GPI 重组穿梭载体转染 Sf9 细胞 | 第25页 |
4.3 重组杆状病毒的鉴定 | 第25-27页 |
4.4 重组病毒扩毒 P2 | 第27页 |
4.5 重组病毒扩毒 P3 | 第27-28页 |
4.6 Sf9 细胞无血清培养 | 第28-29页 |
4.7 表达产物 SDS-PAGE 的鉴定 | 第29页 |
4.8 表达产物纯化及 Western-blot 鉴定 | 第29-30页 |
4.9 结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-36页 |
致谢 | 第36页 |