| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-32页 |
| ·人血清白蛋白简介 | 第13-17页 |
| ·人血清白蛋白结构及体内合成过程 | 第13页 |
| ·人血清白蛋白的生理功能 | 第13-14页 |
| ·人血清白蛋白的应用 | 第14-15页 |
| ·人血清白蛋白的市场 | 第15页 |
| ·人血清白蛋白来源 | 第15页 |
| ·血源白蛋白的提取 | 第15-17页 |
| ·重组人血清白蛋白 | 第17-21页 |
| ·重组人血清白蛋白的表达系统 | 第17-18页 |
| ·国内外重组人血清白蛋白的开发 | 第18页 |
| ·重组人血清白蛋白的分离纯化 | 第18-21页 |
| ·毕赤酵母发酵生产重组人血清白蛋白 | 第21-23页 |
| ·毕赤酵母发酵液的特点 | 第21-22页 |
| ·毕赤酵母蛋白酶 | 第22-23页 |
| ·双水相萃取技术 | 第23-26页 |
| ·传统双水相萃取技术 | 第23-24页 |
| ·亲水性有机溶剂/无机盐双水相萃取技术 | 第24页 |
| ·双水相萃取的特点 | 第24-25页 |
| ·亲水性有机溶剂/无机盐双水相萃取技术的应用 | 第25-26页 |
| ·疏水层析 | 第26-29页 |
| ·疏水层析原理 | 第26-27页 |
| ·疏水层析分离过程 | 第27页 |
| ·疏水层析缓冲液中盐的选择 | 第27-28页 |
| ·疏水层析介质 | 第28页 |
| ·纯化策略中的疏水层析 | 第28-29页 |
| ·本课题的研究内容及意义 | 第29-32页 |
| ·本课题的研究内容 | 第29-30页 |
| ·本课题的研究方案 | 第30页 |
| ·本课题的研究意义 | 第30-32页 |
| 2 重组人血清白蛋白在亲水性有机溶剂/无机盐双水相体系中的分配规律 | 第32-42页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·发酵上清液的制备 | 第33页 |
| ·不同双水相体系萃取能力测定 | 第33-34页 |
| ·亲水性有机溶剂/无机盐双水相体系相图的绘制 | 第34页 |
| ·重组人血清白蛋白在双水相体系中分配行为的研究 | 第34-35页 |
| ·分析方法 | 第35-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-41页 |
| ·不同双水相体系萃取能力测定 | 第37-39页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾双水相体系相图的绘制 | 第39-40页 |
| ·重组人血清白蛋白在磷酸氢二钾/乙醇双水相体系中的分配规律 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 3 双水相萃取发酵液中重组人血清白蛋白的研究 | 第42-57页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·实验材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾体系萃取分离发酵液中的重组人血清白蛋白 | 第43页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾双水相萃取对发酵液中杂质的去除效果 | 第43页 |
| ·重组人血清白蛋白在双水相上相中稳定性分析 | 第43页 |
| ·双水相上相中蛋白酶性质分析及活性测定 | 第43-44页 |
| ·双水相体系中盐回收方法的研究 | 第44页 |
| ·分析方法 | 第44-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-56页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾双水相萃取发酵液中重组人血清白蛋白条件研究 | 第48-50页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾双水相萃取对发酵液中杂质的去除 | 第50-51页 |
| ·双水相萃取对发酵液中蛋白酶的去除作用 | 第51-54页 |
| ·乙醇/磷酸氢二钾体系中盐回收方法的研究 | 第54-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 4 重组人血清白蛋白纯化方法研究 | 第57-75页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·实验材料与仪器 | 第57-58页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·减压蒸馏回收乙醇 | 第58页 |
| ·添加不同种类盐的疏水层析 | 第58-59页 |
| ·添加不同盐疏水层析后的重组人血清白蛋白稳定性 | 第59页 |
| ·添加不同盐的疏水层析,得到重组人血清白蛋白中的蛋白酶分析 | 第59-60页 |
| ·添加磷酸氢二钾的疏水层析对杂质的去除效果 | 第60页 |
| ·pH对添加磷酸氢二钾疏水层析的影响 | 第60-61页 |
| ·DEAE阴离子层析条件的优化 | 第61页 |
| ·分析方法 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-74页 |
| ·减压蒸馏后乙醇含量 | 第61页 |
| ·添加盐种类和浓度对疏水层析收率的影响 | 第61-63页 |
| ·添加盐种类和浓度对疏水层析后重组人血清白蛋白纯度的影响 | 第63-66页 |
| ·添加不同盐疏水层析后的重组人血清白蛋白稳定性 | 第66-67页 |
| ·添加不同盐疏水层析,得到的重组人血清白蛋白中蛋白酶分析 | 第67-70页 |
| ·pH对添加磷酸氢二钾疏水层析的影响 | 第70-71页 |
| ·添加磷酸氢二钾疏水层析对多糖、色素的去除效果 | 第71-73页 |
| ·DEAE阴离子层析条件优化 | 第73页 |
| ·DEAE阴离子层析对多糖及色素的去除效果 | 第73-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 5 重组人血清白蛋白鉴定分析 | 第75-81页 |
| ·前言 | 第75页 |
| ·实验材料与仪器 | 第75页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·实验仪器 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-77页 |
| ·纯化方法各步对多糖、色素及蛋白酶A的去除效果 | 第75-76页 |
| ·重组人血清白蛋白鉴定分析 | 第76页 |
| ·分析方法 | 第76-77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-80页 |
| ·纯化过程各步重组人血清白蛋白收率及杂质含量 | 第77页 |
| ·色素水平测定 | 第77-78页 |
| ·HPLC分析重组人血清白蛋白纯度 | 第78-79页 |
| ·质谱测定重组人血清白蛋白分子量 | 第79-80页 |
| ·圆二色光谱分析重组人血清白蛋白二级结构 | 第80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
