| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-46页 |
| 1.1 甾类化合物概述 | 第17-18页 |
| 1.2 甾类化合物的微生物转化 | 第18-20页 |
| 1.2.1 甾类化合物微生物转化的特点 | 第18-20页 |
| 1.2.2 甾类化合物微生物转化反应类型 | 第20页 |
| 1.3 新技术在甾类药物微生物转化中的应用 | 第20-27页 |
| 1.3.1 固定化细胞转化技术 | 第20-22页 |
| 1.3.2 原生质体转化技术 | 第22页 |
| 1.3.3 双水相体系中的转化技术 | 第22-23页 |
| 1.3.4 混合培养转化技术 | 第23页 |
| 1.3.5 顺序发酵 | 第23-24页 |
| 1.3.6 超临界流体中的转化技术 | 第24页 |
| 1.3.7 有机介质中甾体化合物的微生物转化 | 第24-26页 |
| 1.3.8 外加作用因子对甾体转化的影响 | 第26-27页 |
| 1.4 甾体化合物C_(1,2)微生物脱氢研究进展 | 第27-34页 |
| 1.4.1 具有甾体C_(1,2)脱氢能力的微生物 | 第28-29页 |
| 1.4.2 甾体C_(1,2)微生物脱氢反应机理 | 第29-31页 |
| 1.4.3 简单节杆菌甾体C_(1,2)脱氢酶的酶学性质 | 第31-34页 |
| 1.5 简单节杆菌C_(1,2)脱氢动力学模型 | 第34-37页 |
| 1.5.1 微生物生长和酶形成模型 | 第34页 |
| 1.5.2 氢化可的松的溶解速率方程 | 第34-35页 |
| 1.5.3 酶反应动力学方程 | 第35页 |
| 1.5.4 结晶过程的速率方程 | 第35-36页 |
| 1.5.5 底物浓度的变化方程 | 第36页 |
| 1.5.6 发酵液体系中底物和产物的浓度变化速率方程 | 第36-37页 |
| 1.6 本论文的研究对象和主要研究内容 | 第37-39页 |
| 1.6.1 倍他米松的用途 | 第37页 |
| 1.6.2 HMPDD的微生物脱氢反应过程 | 第37-38页 |
| 1.6.3 本论文的研究内容 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 第二章 材料与方法 | 第46-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 2.1.1 试剂 | 第46页 |
| 2.1.2 菌种 | 第46页 |
| 2.1.3 培养基 | 第46-47页 |
| 2.1.4 发酵条件及转化条件 | 第47页 |
| 2.1.5 主要实验仪器及设备 | 第47页 |
| 2.2 有关参数分析方法 | 第47-53页 |
| 2.2.1 葡萄糖含量的测定 | 第47-49页 |
| 2.2.2 生物量的测定 | 第49-50页 |
| 2.2.3 甾体脱氢酶活力测定 | 第50-51页 |
| 2.2.4 HMPDD转化率的测定 | 第51-53页 |
| 2.3 双波长比吸光度法测定HMPTD含量的分析方法建立 | 第53-56页 |
| 2.3.1 实验方法 | 第53-54页 |
| 2.3.2 分析结果 | 第54-56页 |
| 2.4 HMPDD和HMPTD在不同有机溶剂中的溶解度测定 | 第56-58页 |
| 2.4.1 实验方法 | 第56页 |
| 2.4.2 测定结果 | 第56-58页 |
| 2.5 小结 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第三章 优良菌株的选育及产酶条件优化 | 第59-85页 |
| 3.1 引言 | 第59-62页 |
| 3.1.1 菌种选育 | 第59-60页 |
| 3.1.2 简单节杆菌甾体脱氢酶的产酶条件研究 | 第60页 |
| 3.1.3 本章的研究内容 | 第60-62页 |
| 3.2 材料与方法 | 第62-64页 |
| 3.2.1 材料 | 第62页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第64-82页 |
| 3.3.1 不同保藏菌株的HMPDD脱氢性能考察 | 第64-65页 |
| 3.3.2 菌株的分离纯化 | 第65-66页 |
| 3.3.3 菌株2-76-14的形态特征 | 第66-67页 |
| 3.3.4 菌种选育 | 第67-70页 |
| 3.3.5 甘油冷冻管的菌种保藏效果 | 第70-72页 |
| 3.3.6 产酶培养基组成的优化 | 第72-78页 |
| 3.3.7 简单节杆菌产酶条件研究 | 第78-81页 |
| 3.3.8 间歇培养过程中简单节杆菌生长及产酶动力学曲线 | 第81-82页 |
| 3.4 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第四章 简单节杆菌催化HMPDD脱氢动力学研究 | 第85-98页 |
| 4.1 引言 | 第85页 |
| 4.2 材料与方法 | 第85-87页 |
| 4.2.1 菌种 | 第85-86页 |
| 4.2.2 培养基 | 第86页 |
| 4.2.3 菌悬液的制备 | 第86页 |
| 4.2.4 HMPDD的转化反应 | 第86页 |
| 4.2.5 粒径大小以及粒径分布的测量 | 第86页 |
| 4.2.6 酶活力的测定 | 第86页 |
| 4.2.7 HMPDD脱氢转化率的测定 | 第86-87页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第87-92页 |
| 4.3.1 投料方式对HMPDD粒径分布的影响 | 第87-88页 |
| 4.3.2 甾体脱氢酶稳定性考察 | 第88页 |
| 4.3.3 不同菌体量对反应初速度的影响 | 第88页 |
| 4.3.4 底物浓度对脱氢反应初速度的影响 | 第88-89页 |
| 4.3.5 不同初始底物浓度的转化过程曲线 | 第89-90页 |
| 4.3.6 动力学方程的建立 | 第90-92页 |
| 4.4 小结 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93-97页 |
| 参考文献 | 第97-98页 |
| 第五章 水相中简单节杆菌催化HMPDD脱氢工艺条件研究 | 第98-118页 |
| 5.1 材料与方法 | 第98-99页 |
| 5.1.1 材料 | 第98-99页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第99页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第99-111页 |
| 5.2.1 菌体生长特性曲线 | 第99-100页 |
| 5.2.2 投料方法和底物增溶对脱氢转化率的影响 | 第100-105页 |
| 5.2.3 摇瓶转化条件的研究 | 第105-108页 |
| 5.2.4 不同外源电子受体对转化的影响 | 第108-109页 |
| 5.2.5 添加不同代谢中间体对HMPDD转化的影响 | 第109-111页 |
| 5.3 HMPDD的C_(1,2)微生物脱氢新工艺研究 | 第111-116页 |
| 5.3.1 洗涤细胞转化工艺 | 第111-112页 |
| 5.3.2 培养液稀释转化新工艺 | 第112-113页 |
| 5.3.3 超声波处理对HMPDD转化的影响 | 第113-116页 |
| 5.4 小结 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-118页 |
| 第六章 HMPDD微生物脱氢反应的放大 | 第118-132页 |
| 6.1 引言 | 第118-119页 |
| 6.2 材料与方法 | 第119-120页 |
| 6.2.1 材料 | 第119页 |
| 6.2.2 方法 | 第119-120页 |
| 6.2.3 HMPD转化产物的分析 | 第120页 |
| 6.2.4 生物反应器 | 第120页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第120-124页 |
| 6.3.1 10L罐发酵结果 | 第120-123页 |
| 6.3.2 300L罐间歇发酵结果 | 第123页 |
| 6.3.3 3T罐间歇发酵结果 | 第123-124页 |
| 6.3.4 HMPDD转化产物的结构分析 | 第124页 |
| 6.4 小结 | 第124-131页 |
| 参考文献 | 第131-132页 |
| 第七章 两相体系中简单节杆菌催化HMPDD的C_(1,2)脱氢反应研究 | 第132-148页 |
| 7.1 引言 | 第132-133页 |
| 7.2 材料与方法 | 第133-135页 |
| 7.2.1 菌种 | 第133-134页 |
| 7.2.2 培养基 | 第134页 |
| 7.2.3 试剂 | 第134页 |
| 7.2.4 主要试验仪器及设备 | 第134-135页 |
| 7.2.5 实验方法 | 第135页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第135-146页 |
| 7.3.1 两相体系的构建 | 第135-139页 |
| 7.3.2 两相体系中HMPDD脱氢反应的影响因素 | 第139-146页 |
| 7.4 小结 | 第146页 |
| 参考文献 | 第146-148页 |
| 第八章 两相体系中固定化细胞催化的HMPDD C_(1,2)脱氢反应 | 第148-158页 |
| 8.1 引言 | 第148-149页 |
| 8.2 材料与方法 | 第149-151页 |
| 8.2.1 菌种 | 第149页 |
| 8.2.2 培养基 | 第149页 |
| 8.2.3 试剂 | 第149-150页 |
| 8.2.4 主要仪器设备 | 第150页 |
| 8.2.5 实验方法 | 第150-151页 |
| 8.3 结果与讨论 | 第151-156页 |
| 8.3.1 不同细胞固定化制备方法的比较 | 第151-152页 |
| 8.3.2 海藻酸钙包埋细胞固定化条件的研究 | 第152-153页 |
| 8.3.3 固定化细胞增殖时间对HMPDD转化率的影响 | 第153-154页 |
| 8.3.4 增殖培养基中KH_2PO_4浓度对固定化细胞转化力的影响 | 第154页 |
| 8.3.5 两相体系中转化条件对HMPDD转化率的影响 | 第154-156页 |
| 8.4 小结 | 第156-157页 |
| 参考文献 | 第157-158页 |
| 第九章 结论与建议 | 第158-162页 |
| 9.1 结论 | 第158-160页 |
| 9.2 建议 | 第160-162页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第162-164页 |
| 致谢 | 第164页 |
