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双组份系统AfsQ1/Q2对天蓝链霉菌中coelimycin P2合成的调控机制的研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 绪论第10-20页
    1.1 链霉菌次级代谢及其分子调控研究第10-16页
        1.1.1 链霉菌是一类重要的工业微生物第10页
        1.1.2 链霉菌的次级代谢受到复杂的严格调控第10页
        1.1.3 双组分系统(Two-component system, TCS)是链霉菌次级代谢的重要调控因子第10-16页
    1.2 coelimycin P2生物合成的调控机制第16-18页
        1.2.1 coelimycin P2的简介第16-17页
        1.2.2 coelimycin P2合成的分子调控研究第17-18页
    1.3 本论文研究概述第18-20页
第二章 天蓝链霉菌缺失基因afs Q1/Q2对黄色色素coelimycin P2合成的影响第20-32页
    2.1 材料与方法第20-27页
        2.1.1 材料第20-22页
        2.1.2 方法第22-27页
    2.2 结果第27-29页
        2.2.1 在含有不同浓度的Glu(10,20,50,75m M)的基本培养基(MM)上,观察出发菌株SBJ512的coelimycin P2产生情况第27页
        2.2.2 afs Q1/Q2缺失突变株SBJ513的PCR验证第27-28页
        2.2.3 afs Q1/Q2缺失对天蓝色链霉菌coelimycin P2产生的影响第28-29页
    2.3 讨论第29-31页
        2.3.1 不同浓度Glu对天蓝色链霉菌合成coelimycin P2的产量造成影响第29-30页
        2.3.2 双组份系统Afs Q1/Q2参与coelimycin P2合成的调控第30-31页
    2.4 本章小结第31-32页
第三章 双组份系统Afs Q1/Q2参与coelimycin P2生物合成的调控机制研究第32-54页
    3.1 材料与方法第32-43页
        3.1.1 材料第32-35页
        3.1.2 方法第35-43页
    3.2 结果第43-51页
        3.2.1 coelimycin P2生物合成基因簇的共转录分析第43-45页
        3.2.2 afs Q1/Q2缺失对coelimycin P2生物合成基因簇转录的影响第45-46页
        3.2.3 Afs Q1在coelimycin P2合成基因簇上的结合靶点第46-47页
        3.2.4 5′-RACE实验确定cpk A、cpk D的转录起始位点第47-48页
        3.2.5 EMSA实验验证Afs Q1在cpk A和cpk D之间的的结合位点第48-49页
        3.2.6 对菌株SBJ 514(Afs Q1结合位点突变菌株)进行产CoelimycinP2的表型分析第49-50页
        3.2.7 Coelimycin P2生物合成基因簇中cpk A/D基因间隔区内Afs Q1结合位点突变对基因簇转录的影响分析第50-51页
    3.3 讨论第51-53页
        3.3.1 多种调控蛋白参与Coelimycin P2的合成的调控第51-52页
        3.3.2 双组份系统Afs Q1/Q2可能与其他调控因子相互作用调控Coelimycin P2的合成第52-53页
        3.3.3 双组份系统Afs Q1/Q2调控机制的复杂性第53页
    3.4 本章小结第53-54页
第四章 途径特异性调控基因kaso间接介导Coelimycin P2合成基因簇基因的表达第54-66页
    4.1 材料与方法第54-61页
        4.1.1 材料第54-56页
        4.1.2 方法第56-61页
    4.2 实验结果第61-65页
        4.2.1 蛋白Cpko纯化之后的结果第61页
        4.2.2 体外EMSA实验验证蛋白Cpko在Coelimycin P2合成基因簇上的结合靶点第61-62页
        4.2.3 对菌株SBJ512、SBJ513△cpko、SBJ514△cpko进行转录分析第62-64页
        4.2.4 菌株SBJ513△cpko、SBJ514△cpko产coelimycin P2的表型分析第64-65页
    4.3 讨论第65页
    4.4 本章小结第65-66页
参考文献第66-75页
发表论文和参加科研情况说明第75-76页
致谢第76-77页

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