| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 超长链脂肪酸的生物学功能及应用 | 第17-20页 |
| 1.1 超长链脂肪酸的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.2 超长链脂肪酸的应用 | 第18-20页 |
| 1.2.1 芥酸的应用价值 | 第18-19页 |
| 1.2.2 神经酸的应用价值 | 第19-20页 |
| 2 超长链脂肪酸的生物合成 | 第20-32页 |
| 2.1 脂肪酸碳链延长酶 | 第23-28页 |
| 2.1.1 KCS基因的研究进展 | 第23-27页 |
| 2.1.2 KCR基因的研究进展 | 第27-28页 |
| 2.1.3 HCD基因的研究进展 | 第28页 |
| 2.1.4 ECR基因的研究进展 | 第28页 |
| 2.2 三酰甘油的合成 | 第28-32页 |
| 2.2.1 三酰甘油的生物合成 | 第28-31页 |
| 2.2.2 LPAAT基因的研究进展 | 第31-32页 |
| 3 多基因聚合技术 | 第32页 |
| 4 高超长链脂肪酸作物的育种进展 | 第32-37页 |
| 4.1 高芥酸育种进展 | 第33-36页 |
| 4.1.1 过表达FAE1 提高芥酸含量 | 第33页 |
| 4.1.2 引入对芥酸具有亲和力的LPAAT | 第33-34页 |
| 4.1.3 抑制FAD2 基因的表达为芥酸的合成提供足够的底物 | 第34-36页 |
| 4.2 高神经酸育种进展 | 第36-37页 |
| 5 新兴的油料作物——亚麻荠 | 第37-38页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第38-39页 |
| 第一章 甘蓝型油菜BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 的克隆及其底物特异性的研究 | 第39-66页 |
| 引言 | 第39页 |
| 1 本研究的目的与意义 | 第39-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-44页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第40页 |
| 2.1.3 酶类 | 第40页 |
| 2.1.4 生化试剂与耗材 | 第40-41页 |
| 2.1.5 引物合成与测序分析 | 第41页 |
| 2.1.6 软件与数据分析 | 第41页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第41页 |
| 2.1.8 主要试剂的配制 | 第41-44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-56页 |
| 2.2.1 亚麻荠的生长条件 | 第44页 |
| 2.2.2 拟南芥的生长条件 | 第44页 |
| 2.2.3 植物种子总RNA提取及反转录c DNA | 第44-46页 |
| 2.2.4 植物总DNA提取 | 第46-47页 |
| 2.2.5 甘蓝型油菜基因BnaA.FAE1 和BnaC.FAE1 的克隆与表达载体的构建 | 第47-52页 |
| 2.2.6 亚麻荠的转化及阳性种子的筛选 | 第52-53页 |
| 2.2.7 拟南芥的转化及阳性种子的筛选 | 第53-54页 |
| 2.2.8 酵母的转化 | 第54页 |
| 2.2.9 脂肪酸组成的气相色谱分析 | 第54-55页 |
| 2.2.10 Acyl-CoAs的液相-质谱分析 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-63页 |
| 3.1 甘蓝型油菜BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 的克隆及其序列差异性分析 | 第56-57页 |
| 3.2 BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 在亚麻荠种子中特异表达对种子中脂肪酸组成的影响 | 第57-60页 |
| 3.3 BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 转基因的亚麻荠发育的种子中的Acyl-CoAs组成分析 | 第60-61页 |
| 3.4 将BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 在拟南芥fad2/fae1 双突变体中特异表达对其种子中脂肪酸组成的影响 | 第61-62页 |
| 3.5 将BnaA.FAE1 与BnaC.FAE1 在酵母中异源表达对其脂肪酸组成的影响 | 第62-63页 |
| 3.6 对白菜型油菜以及甘蓝种子中的脂肪酸组成的分析 | 第63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第二章 甘蓝型油菜BnFAE1 分子标记开发以及高芥酸、低多不饱和脂肪酸甘蓝型油菜的创建 | 第66-79页 |
| 引言 | 第66-67页 |
| 1 本研究的目的和意义 | 第67页 |
| 2 材料和方法 | 第67-71页 |
| 2.1 实验材料 | 第67-69页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第67-68页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第68页 |
| 2.1.3 酶类 | 第68页 |
| 2.1.4 生化试剂与耗材 | 第68页 |
| 2.1.5 引物合成与测序分析 | 第68页 |
| 2.1.6 软件与数据分析 | 第68页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第68页 |
| 2.1.8 主要试剂的配置 | 第68-69页 |
| 2.2 实验方法 | 第69-71页 |
| 2.2.1 甘蓝型油菜的田间种植及杂交组合 | 第69页 |
| 2.2.2 高油酸甘蓝型油菜BnFAE1 基因的克隆 | 第69-70页 |
| 2.2.3 等位基因特异引物设计及PCR扩增 | 第70页 |
| 2.2.4 脂肪酸组成的气相色谱分析 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-77页 |
| 3.1 高油酸甘蓝型油菜亲本中BnFAE1 基因的克隆及突变位点分析 | 第71-72页 |
| 3.2 甘蓝型油菜BnFAE1 的分子标记开发 | 第72-74页 |
| 3.3 高芥酸/低多不饱和脂肪酸的油菜单株筛选 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 5 本章小结 | 第78-79页 |
| 第三章 调控几个芥酸合成关键基因对油菜种子中脂肪酸组成的影响 | 第79-108页 |
| 引言 | 第79-80页 |
| 1 本研究的目的与意义 | 第80页 |
| 2 材料和方法 | 第80-97页 |
| 2.1 实验材料 | 第80-82页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第80页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第80页 |
| 2.1.3 酶类 | 第80-81页 |
| 2.1.4 生化试剂与耗材 | 第81页 |
| 2.1.5 引物合成与测序分析 | 第81页 |
| 2.1.6 软件与数据分析 | 第81页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第81页 |
| 2.1.8 主要试剂的配制 | 第81-82页 |
| 2.2 实验方法 | 第82-97页 |
| 2.2.1 甘蓝型油菜的生长条件 | 第82页 |
| 2.2.2 亚麻荠的生长条件 | 第82-83页 |
| 2.2.3 基因克隆与表达载体的构建 | 第83-89页 |
| 2.2.4 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第89-90页 |
| 2.2.5 转基因植株的PCR阳性鉴定 | 第90页 |
| 2.2.6 亚麻荠的转化及阳性种子的筛选 | 第90页 |
| 2.2.7 转基因植株的Southern分析 | 第90-94页 |
| 2.2.8 转基因植株的表达分析 | 第94-95页 |
| 2.2.9 种子中脂肪酸组成分析 | 第95页 |
| 2.2.10 三酰甘油中甘油骨架sn-2 位的脂肪酸组成分析 | 第95-97页 |
| 3 结果与分析 | 第97-104页 |
| 3.1 在甘蓝型油菜种子中特异超表达BnFAE1 对其脂肪酸组成的影响 | 第97-99页 |
| 3.2 在甘蓝型油菜种子中特异抑制BnFAD2 的表达对其脂肪酸组成的影响 | 第99-101页 |
| 3.3 将BnFAE1 超表达株系与BnFAD2 反义抑制株系杂交对其后代种子中脂肪酸组成的影响 | 第101页 |
| 3.4 在甘蓝型油菜中表达酵母SLC1 和SLC1-1 以及甘蓝BoLPAAT对其种子中脂肪酸组成的影响 | 第101-102页 |
| 3.5 在甘蓝型油菜种子中共表达LdLPAAT、BnaA.FAE1 以及RNAi抑制BnLPAAT的表达对其脂肪酸组成的影响 | 第102-104页 |
| 4 讨论 | 第104-107页 |
| 5 本章小结 | 第107-108页 |
| 第四章 共表达脂肪酸碳链延长酶复合体不同成员基因对超长链脂肪酸含量的影响 | 第108-131页 |
| 引言 | 第108-109页 |
| 1 本研究的目的和意义 | 第109页 |
| 2 材料和方法 | 第109-114页 |
| 2.1 实验材料 | 第109-111页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第109页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第109-110页 |
| 2.1.3 酶类 | 第110页 |
| 2.1.4 生化试剂与耗材 | 第110页 |
| 2.1.5 引物合成与测序分析 | 第110页 |
| 2.1.6 软件与数据分析 | 第110页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第110-111页 |
| 2.1.8 主要试剂的配制 | 第111页 |
| 2.2 实验方法 | 第111-114页 |
| 2.2.1 亚麻荠的生长条件 | 第111页 |
| 2.2.2 基因克隆与表达载体的构建 | 第111-113页 |
| 2.2.3 亚麻荠的转化及阳性种子的筛选 | 第113-114页 |
| 2.2.4 转基因植株的表达分析 | 第114页 |
| 2.2.5 种子中脂肪酸组成分析 | 第114页 |
| 2.2.6 Acyl-CoAs的液相-质谱分析 | 第114页 |
| 3 结果与分析 | 第114-127页 |
| 3.1 脂肪酸碳链延长酶基因的各种组合的载体转化亚麻荠 | 第114-115页 |
| 3.2 在亚麻荠种子中仅异源表达LaKCS对其脂肪酸组成的影响 | 第115-116页 |
| 3.3 在亚麻荠种子中At KCR、At HCD和At ECR中任意一个基因与LaKCS共表达对其脂肪酸组成的影响 | 第116-122页 |
| 3.4 在亚麻荠种子中共表达LaKCS、At KCR和At HCD对其脂肪酸组成的影响 | 第122页 |
| 3.5 各转基因亚麻荠株系中Acyl-CoA的分析 | 第122-124页 |
| 3.6 各转基因亚麻荠株系发育种子中脂肪酸含量的动态观察 | 第124-127页 |
| 4 讨论 | 第127-130页 |
| 5 本章小结 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-142页 |
| 附录 | 第142-145页 |
| 附录1 | 第142-144页 |
| 附录2 作者简介和在读期间发表的论文 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-147页 |
