摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 引言 | 第13-29页 |
1.1 土壤盐渍化 | 第13-14页 |
1.1.1 盐土 | 第13页 |
1.1.2 土壤盐渍化现状 | 第13-14页 |
1.1.3 土壤盐渍化改良方法 | 第14页 |
1.2 中度嗜盐菌简介 | 第14-16页 |
1.3 中度嗜盐菌的应用 | 第16-18页 |
1.3.1 酶 | 第16页 |
1.3.2 相容性物质 | 第16-17页 |
1.3.3 在环境保护方面的应用 | 第17-18页 |
1.4 嗜盐微生物的盐适应机制 | 第18-27页 |
1.4.1 初级钠离子泵 | 第18-21页 |
1.4.2 细胞次级钠/氢泵对Na~+的调节机制 | 第21-27页 |
1.4.3 渗透调节机制和过程 | 第27页 |
1.5 肇东盐单胞菌(H. zhaodongensis)NEAU-ST10-25T | 第27-28页 |
1.6 本论文研究目的与主要内容 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-54页 |
2.1 肇东盐单胞菌中未知功能蛋白的基因克隆 | 第29-38页 |
2.1.1 实验材料 | 第29-32页 |
2.1.2 实验方法 | 第32-38页 |
2.2 肇东盐单胞菌耐盐碱相关基因测序与序列分析 | 第38-41页 |
2.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
2.2.2 实验方法 | 第39-41页 |
2.3 耐盐碱相关基因的亚克隆及功能互补 | 第41-45页 |
2.3.1 实验材料 | 第41-44页 |
2.3.2 实验方法 | 第44-45页 |
2.4 蛋白序列分析与钠/氢逆向转运蛋白活性的测定 | 第45-48页 |
2.4.1 实验材料 | 第45-46页 |
2.4.2 实验方法 | 第46-48页 |
2.5 Hz_Ump AB表达载体的构建、定位及二聚体的鉴定 | 第48-54页 |
2.5.1 实验材料 | 第48-52页 |
2.5.2 实验方法 | 第52-54页 |
3 结果与分析 | 第54-86页 |
3.1 肇东盐单胞菌中未知功能蛋白的基因克隆 | 第54-57页 |
3.1.1 基因组提取与目的片段制备 | 第54-56页 |
3.1.2 克隆载体p UC18的制备与处理 | 第56页 |
3.1.3 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第56-57页 |
3.2 肇东盐单胞菌耐盐碱相关基因测序与序列分析 | 第57-64页 |
3.2.1 耐盐碱相关基因的序列分析 | 第57-62页 |
3.2.2 外源基因编码的蛋白的疏水性分析与跨膜预测 | 第62-64页 |
3.3 耐盐碱基因的亚克隆及功能互补 | 第64-70页 |
3.3.1 耐盐碱基因的鉴定及亚克隆 | 第64-68页 |
3.3.2 耐盐碱基因的功能互补实验 | 第68-70页 |
3.4 蛋白序列分析与钠/氢逆向转运蛋白活性的测定 | 第70-80页 |
3.4.1 Hz_Ump AB蛋白序列分析 | 第70-76页 |
3.4.2 Hz_DUF2062蛋白序列分析 | 第76-80页 |
3.5 Hz_Ump AB表达载体构建、定位及二聚体鉴定 | 第80-86页 |
3.5.1 Hz_Ump AB共表达载体构建策略 | 第80-81页 |
3.5.2 p ETDuet1ump AB表达载体的构建 | 第81-83页 |
3.5.3 Hz_Ump AB的蛋白定位与二聚体的鉴定 | 第83-86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
5 结论 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第99页 |