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肇东盐单胞菌中耐盐碱基因筛选及DUF1538与DUF2062家族成员的耐盐碱功能鉴定

摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
1 引言第13-29页
    1.1 土壤盐渍化第13-14页
        1.1.1 盐土第13页
        1.1.2 土壤盐渍化现状第13-14页
        1.1.3 土壤盐渍化改良方法第14页
    1.2 中度嗜盐菌简介第14-16页
    1.3 中度嗜盐菌的应用第16-18页
        1.3.1 酶第16页
        1.3.2 相容性物质第16-17页
        1.3.3 在环境保护方面的应用第17-18页
    1.4 嗜盐微生物的盐适应机制第18-27页
        1.4.1 初级钠离子泵第18-21页
        1.4.2 细胞次级钠/氢泵对Na~+的调节机制第21-27页
        1.4.3 渗透调节机制和过程第27页
    1.5 肇东盐单胞菌(H. zhaodongensis)NEAU-ST10-25T第27-28页
    1.6 本论文研究目的与主要内容第28-29页
2 材料与方法第29-54页
    2.1 肇东盐单胞菌中未知功能蛋白的基因克隆第29-38页
        2.1.1 实验材料第29-32页
        2.1.2 实验方法第32-38页
    2.2 肇东盐单胞菌耐盐碱相关基因测序与序列分析第38-41页
        2.2.1 实验材料第38-39页
        2.2.2 实验方法第39-41页
    2.3 耐盐碱相关基因的亚克隆及功能互补第41-45页
        2.3.1 实验材料第41-44页
        2.3.2 实验方法第44-45页
    2.4 蛋白序列分析与钠/氢逆向转运蛋白活性的测定第45-48页
        2.4.1 实验材料第45-46页
        2.4.2 实验方法第46-48页
    2.5 Hz_Ump AB表达载体的构建、定位及二聚体的鉴定第48-54页
        2.5.1 实验材料第48-52页
        2.5.2 实验方法第52-54页
3 结果与分析第54-86页
    3.1 肇东盐单胞菌中未知功能蛋白的基因克隆第54-57页
        3.1.1 基因组提取与目的片段制备第54-56页
        3.1.2 克隆载体p UC18的制备与处理第56页
        3.1.3 阳性克隆的筛选与鉴定第56-57页
    3.2 肇东盐单胞菌耐盐碱相关基因测序与序列分析第57-64页
        3.2.1 耐盐碱相关基因的序列分析第57-62页
        3.2.2 外源基因编码的蛋白的疏水性分析与跨膜预测第62-64页
    3.3 耐盐碱基因的亚克隆及功能互补第64-70页
        3.3.1 耐盐碱基因的鉴定及亚克隆第64-68页
        3.3.2 耐盐碱基因的功能互补实验第68-70页
    3.4 蛋白序列分析与钠/氢逆向转运蛋白活性的测定第70-80页
        3.4.1 Hz_Ump AB蛋白序列分析第70-76页
        3.4.2 Hz_DUF2062蛋白序列分析第76-80页
    3.5 Hz_Ump AB表达载体构建、定位及二聚体鉴定第80-86页
        3.5.1 Hz_Ump AB共表达载体构建策略第80-81页
        3.5.2 p ETDuet1ump AB表达载体的构建第81-83页
        3.5.3 Hz_Ump AB的蛋白定位与二聚体的鉴定第83-86页
4 讨论第86-88页
5 结论第88-89页
致谢第89-90页
参考文献第90-99页
攻读博士学位期间发表的学术论文第99页

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