中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
前言 | 第9-12页 |
材料与方法 | 第12-19页 |
1. 材料 | 第12-13页 |
1.1 菌株与细胞株 | 第12页 |
1.2 质粒 | 第12页 |
1.3 分子生物学试剂盒 | 第12页 |
1.4 实验用化学试剂 | 第12页 |
1.5 细胞培养试剂 | 第12页 |
1.6 抗体及蛋白偶联珠 | 第12-13页 |
1.7 主要实验仪器 | 第13页 |
2. 方法 | 第13-19页 |
2.1 重组质粒的构建及鉴定表达 | 第13-14页 |
2.2 质粒提取 | 第14-15页 |
2.3 哺乳动物细胞的转染 | 第15页 |
2.4 细胞免疫荧光 | 第15-16页 |
2.5 Western Blot实验分析 | 第16页 |
2.6 细胞核质分离实验 | 第16-17页 |
2.7 体外蛋白纯化及提取 | 第17页 |
2.8 免疫共沉淀(IP)实验 | 第17-18页 |
2.9 GST pull-down实验分析 | 第18-19页 |
结果 | 第19-29页 |
1. 免疫共沉淀(IP实验)发现HPIP与LC3B存在相互作用 | 第19页 |
2. 免疫荧光观察HPIP与LC3B的定位变化 | 第19-20页 |
3. 细胞核质实验分离检测HPIP与LC3B的定位 | 第20-22页 |
3.1 肿瘤细胞中内源性LC3B的分布 | 第20-21页 |
3.2 过表达HPIP基因的稳定克隆细胞系中LC3B的分布 | 第21-22页 |
4. 自噬干预条件下,HPIP与LC3B的定位 | 第22-24页 |
4.1 自噬条件的选择 | 第22-23页 |
4.2 自噬诱导下,HPIP与LC3B的定位 | 第23-24页 |
5. 自噬干预下,HPIP对自噬的作用 | 第24-25页 |
6. HPIP与P62之间的相互作用关系 | 第25-26页 |
7. HPIP与ATG4B对LC3B有竞争性作用 | 第26-29页 |
7.1 HPIP与LC3B、ATG4B与LC3B之间的相互作用 | 第26-27页 |
7.2 HPIP与ATG4B之间的相互作用 | 第27-28页 |
7.3 HPIP与ATG4B均可与LC3B(151-377bp)结合 | 第28-29页 |
讨论 | 第29-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
文献综述 | 第37-48页 |
参考文献 | 第43-48页 |
附录 (缩略词表) | 第48-50页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |